自体游离骨膜移植修复儿童髋关节软骨大面积缺损：动物实验及临床应用

目的:通过自体游离骨膜移植修复儿童髋关节软骨大面积缺损的实验研究和临床应用,观察关节软骨缺损修复的组织形态学变化和临床应用疗效。方法:①动物实验:实验于2002-03/10在南京医科大学附属南京儿童医院儿科研究所完成。选用新西兰幼兔24只,将幼兔股骨头全层关节软骨用利刀切除其表面积的20%以上,制造髋关节软骨大面积缺损模型。按随机数字表法分为2组,每组12只,自体游离骨膜移植组取同侧股骨全层游离骨膜,将骨膜生发层朝向关节腔移植于软骨缺损区;对照组仅同法切除股骨头关节软骨。分别于术后第4,8,12,24周取其股骨头制成标本,对关节软骨缺损修复情况进行大体及组织形态学观察,并用Wston-blot法检测修复组织中Ⅱ型胶原蛋白的表达情况。②临床实验:选择2000-01/2005-06在南京医科大学附属南京儿童医院骨科手术治疗髋关节脱位时,采用自体游离骨膜移植修复髋关节软骨大面积缺损的患儿39例(48髋),监护人均知情同意。术后定期随访检查。髋关节脱位术后疗效根据临床功能及X射线检查结果进行评定:积分16-20分为优,11-15分为良,6-10分为可,<5分为差。结果:①动物实验:自体游离骨膜移植组术后第4周幼兔股骨头软骨缺损被光滑、不透明的类软骨组织替代;12周后软骨缺损由透明的软骨样组织修复;24周后则完全被近似正常的透明软骨修复。对照组术后24周股骨头软骨缺损仍由纤维样组织覆盖。自体游离骨膜移植组术后第4周起软骨缺损修复组织中Ⅱ型胶原蛋白呈持续高表达。②临床实验:39例患儿48髋均获随访,随访18-36个月18例22髋,37-54个月14例16髋,55-72个月7例10髋,平均32个月。髋关节脱位术后疗效优19例25髋(52.1%);良12例10髋(25.0%);可7例8髋(16.7%);差3例3髋(6.2%),优良率达77.1%。结论:动物实验结果显示幼兔自体游离骨膜移植3个月后基本完成了游离骨膜向关节软骨的分化,可为临床应用提供客观依据。临床实验证实,在手术治疗儿童髋关节脱位时,移植自体游离骨膜修复关节软骨大面积缺损,能够提高手术疗效。     

Diazepam versus fentanyl for premedication during percutaneous coronary intervention: results from the Myocardial Protection by Fentanyl during Coronary Intervention (PROFIT) Trial

BACKGROUND: Sedation is a cornerstone in the premedication for percutaneous coronary intervention (PCI). Benzodiazepines and opioids are frequently used. Previous results suggest that opioids mimic the adaptation to ischemia during repeated balloon inflations and may provide direct myocardial protection in addition to their sedative effect. However, no comparative data exist. METHODS: We conducted a prospective, randomized, controlled, single-blind trial comparing diazepam and fentanyl in 276 patients undergoing elective PCI. Patients were randomized to either diazepam 5 mg sublingually or fentanyl 0.05 mg or 0.1 mg intravenously at least 5 minutes prior to the first balloon inflation. The primary end-point was the postprocedural elevation of myocardial markers of necrosis defined as an elevation of cardiac troponin T > or = 0.01 ng/ml. RESULTS: The three groups had similar baseline clinical, angiographic, and procedural characteristics, with no significant differences in lesion morphology, procedural complexity, or adjunctive medical treatment. No significant variation in the hemodynamic response to the study drugs was observed in the three groups. The rate of postprocedural troponin T elevation was 28% in the diazepam group, 20% in the fentanyl 0.05 mg group, and 30% in the fentanyl 0.1 mg group (P = 0.26). Rates of postprocedural myocardial infarction were 3%, 2%, and 2%, respectively (P = 0.84), with one case of in-hospital death in the diazepam group and no urgent TVR in the whole study population. CONCLUSION: Although providing a well-tolerated alternative to diazepam for sedation during PCI, fentanyl did not provide additional cardioprotection assessed through the postinterventional elevation of cardiac troponin T during elective coronary intervention.     

脐血间充质干细胞体外培养方法的改良及其成骨分化能力

目的:采用两种改良方法体外分离培养脐血间充质干细胞,并观察其成骨分化能力。方法:实验于2006-05/09在上海交通大学医学院附属第九人民医院骨与关节中心细胞实验室完成。①所用28份脐血标本由复旦大学医学院附属妇产科医院提供,取自足月健康顺产新生儿,产妇和家属均书面同意,实验经医学伦理委员会批准。②采集28份脐血标本,50～90mL/份,枸橼酸抗凝。采集后12h内密度梯度离心法分离出单个核细胞,接种于100mm×20mm培养皿中,细胞浓度为1×1010L-1,置于含体积分数为0.1胎牛血清的α-MEM培养液中原代培养,5～7d后半量换液,后每隔3～4d全量换液一次。③细胞贴壁后,分两组予以改良培养。改良1组10份,当培养皿底圆形巨核细胞融合、梭形成纤维样细胞脱落时将细胞悬液移入新的培养皿中培养;改良2组18份,待培养皿底圆形巨核细胞渐渐占据优势时,将培养基更换为含体积分数为0.15小牛血清的α-MEM,当圆形巨核细胞大部脱落后换回含体积分数为0.1胎牛血清的α-MEM培养基。成纤维样细胞融合至80%～90%时胰酶消化,按1∶2或1∶3传代培养。④显微镜下观察脐血间充质干细胞的形态。取第5代脐血间充质干细胞,采用流式细胞仪测定细胞免疫表型,以碱性磷酸酶法检测成骨分化能力。结果:①28份脐血间充质干细胞中,共20份原代培养中出现贴壁细胞(改良1组6份,改良2组14份),其中13份培养出能融合且可稳定传代的成纤维样细胞(改良1组4份,改良2组9份),成功率46.4%。②原代培养5～7d后贴壁细胞呈梭形成纤维样细胞和圆形巨核细胞。改良1组与2组于原代培养5周可见成纤维样细胞集落,细胞形态与骨髓间充质干细胞相似,呈较均一的长梭形,传至22代形态无明显变化。③可强烈表达CD29、CD105等间充质干细胞表面标志,而不表达CD34、CD45和CD106等造血干细胞和内皮细胞标志。④成骨诱导1周,脐血间充质干细胞可分化为成骨细胞,碱性磷酸酶染色呈阳性。结论:脐血中存在的单个核细胞经过改良培养后,可提高脐血间充质干细胞的培养成功率。脐血间充质干细胞具有与其他来源的单个核细胞类似的表型及成骨分化潜能,且易于体外扩增、传代稳定。     

血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶2在血管瘤不同生长过程中的表达特征

目的:观察血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶2在血管瘤不同分期中的表达。方法:取自承德医学院附属医院1998-01/2005-12期间血管瘤手术切除的标本共60例及正常带血管皮肤手术切除标本10例,患者家属知情同意。①实验分组:根据Mulliken标准进行病理诊断并分类,所有标本共分4组。增生组22例;退化组20例;退化完成组18例。另取10例正常带血管皮肤组织作为对照组。②采用免疫组织化学S-P法对各组标本的血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶2进行染色。③实验评估:以正常血管上皮细胞或肿瘤细胞胞浆出现棕黄色颗粒为阳性,检测各组血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶2的表达。结果:①随着血管瘤病理时期的变化,血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶2出现明显不同的表达。②增生组血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶2的阳性表达率明显高于其他各组,且随着血管瘤的退化,两者的阳性表达率逐渐下降,至退化完成期时与对照组几乎无差别。③血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶2的表达呈正相关。结论:血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶2在血管瘤的不同分期中起重要作用,其表达水平与血管瘤的病理分期有密切关系。     

Hepatobiliary disorders presenting as fever of unknown origin in Cairo, Egypt: the role of diagnostic ultrasonography

Among 130 patients with fever of unknown origin (FUO) studied from 1981 to 1985, 34 were diagnosed as having hepatobiliary disorders: amoebic liver abscess (11), pyogenic liver abscess (4), hepatic hydatid cysts (2), hepatic fascioliasis (2), tuberculous hepatic granulomas (1), chronic calcular cholecystitis with recurrent cholangitis (2), chronic active hepatitis (2), hepatocellular carcinoma (3), lymphoma involving the liver (4) and hepatic metastasis in (3) cases. Hepatobiliary disorders were the cause in 27% of FUO seen during 4 years.     

人体蛞蝓假寄生1例

患者女性,50岁,黑龙江省七台河市新兴煤矿面包厂工人。2006年11月25日早饭后自觉腹胀,持续1d,因无食欲未再进食。次日清晨,患者呕吐活虫20余条,从中捡出7条置于小瓶中,来哈尔滨医科大学附属第二医院就诊。经胃肠钡餐造影,未见异物。经本教研室鉴定,7条虫体为蛞蝓(Li     

自主研制镍钛记忆合金左心耳封堵器封闭左心耳对实验动物左心功能的影响

目的:应用经胸彩色多普勒超声技术评价自主研制的镍钛记忆合金左心耳封堵器封闭左心耳对实验动物猪左心房、左心室功能的影响。方法:实验于2005-09/2006-08在南京医科大学第一附属医院江苏省实验动物中心完成。①实验分组:选用苏钟小型种猪17只,随机分为实验组12只和对照组5只。②实验干预:实验组12只苏钟小型种猪使用自主研制的左心耳封堵器(发明专利号码:200610037789.3,公开号CN1799521,由镍钛合金骨架、多聚四氟乙烯膜和传送连接部分等构成。其外观呈单盘状,封堵器的左心房面呈圆盘状,直接连接放入心耳内的圆柱体结构)行左心耳封堵,对照组5只手术步骤相同而不采用封堵器行左心耳封堵。③实验评估:两组动物分别于术前、术后1周、2周、4周采用经胸超声心动图检查观察心功能的改变,测量左心房内径、最大及最小容积、左房射血分数、左心房搏出量、血流分数等左房功能参数以及左室射血分数、左室短轴缩短率、Tei指数、E/A比值等指标。结果:①实验动物数量分析:在施行左心耳封堵后,1头猪于术中出血过多并出现室颤后死亡,1头猪因封堵器脱入左房,卡在二尖瓣口导致死亡。其余动物封堵效果良好。②两组动物术后1,2,4周左房功能指标各参数与术前比较无明显变化(P>0.05);与术前相比,实验组术后1周、2周左室射血分数、左心室短轴缩短率、E/A比值分别由术前的0.70±0.04、0.39±0.03、1.33±0.28降低至术后1周的0.59±0.05、0.31±0.03、0.95±0.11(P<均0.01)及术后2周的0.62±0.05、0.33±0.05、0.90±0.05(P<均0.01);Tei指数由术前的0.48±0.02增加至术后1周的0.59±0.03(P<0.01)及术后2周的0.58±0.04(P<0.01)。对照组手术前后左室功能指标差异无显著性。结论:自主研制左心耳封堵器可以有效的封堵左心耳;左心耳封堵后短期内对实验动物左房功能无明显影响;封堵后短期内对左心室功能具有短期的减弱,更长期的安全性有待于进一步研究。     

异丙酚激活蛋白激酶C对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察异丙酚对大鼠离体心肌缺血再灌注的影响及蛋白激酶C激活的作用。方法:实验于2004-04/2005-03在河北省医学科学院药研室完成。48只大鼠离体心脏随机分为6组,每组8只。分别为:正常对照组,持续灌注Lock液65min;缺血再灌注模型组,用含脂肪乳对照的灌流液灌注15min后,以钳夹主动脉灌注管造成全心常温缺血25min后,恢复再灌注30min,灌流液与预灌时相同;异丙酚15,30,60μmol/L组,缺血前和再灌期的灌流液中分别含相应浓度的异丙酚,余同缺血再灌注模型组;异丙酚60μmol/L 蛋白激酶抑制剂5μmol/L组,灌流液中含5μmol/L的chelerythrine的灌流液,其余同异丙酚60μmol/L组。实验评估:①Powerlab/8s仪记录各组平衡末、缺血前及再灌30min时心率、左室发展压、左室舒张末压、左室压力变化速率、冠状动脉流量等心功能指标。②测定冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶、磷酸肌酸激酶活性。③透射电镜观察心肌细胞超微结构变化。④差速离心提取心肌线粒体,测定线粒体超氧化物岐化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、ATP酶活性和丙二醛含量。结果:48只大鼠均进入结果分析。①平衡灌注末、缺血前各组间心功能指标差异无显著性(P>0.05),再灌注30min末,异丙酚30,60μmol/L组左室发展压、左室压力变化速率、冠状动脉流量明显高于缺血再灌注模型组(P<0.05),左室舒张末压明显低于缺血再灌注模型组(P<0.05)。异丙酚60μmol/L 蛋白激酶C抑制剂5μmol/L组左室发展压、左室压力变化速率、冠状动脉流量明显低于单纯异丙酚60μmol/L组(P<0.05),但仍高于与缺血再灌注模型组(P<0.05)。②心肌缺血再灌后,冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶和肌酸激酶活性明显高于正常对照组(P<0.05)。异丙酚30,60μmol/L组、异丙酚60μmol/L 蛋白激酶C抑制剂5μmol/L组乳酸脱氢酶、肌酸激酶活性明显低于缺血再灌注模型组(P<0.05),异丙酚60μmol/L 蛋白激酶C抑制剂5μmol/L组乳酸脱氢酶和肌酸激酶活性与异丙酚60μmol/L组无明显差异。③与缺血再灌注模型组相比,异丙酚组心肌损伤明显减轻,尤其是60μmol/L组,心肌纤维排列均匀,线粒体膜结构完整,仅轻度水肿,嵴清晰,糖原可见。异丙酚60μmol/L 蛋白激酶C抑制剂5μmol/L组心肌超微结构显示损伤程度重于异丙酚60μmol/L组。④异丙酚30,60μmol/L、异丙酚60μmol/L 蛋白激酶C抑制剂5μmol/L组丙二醛含量低于缺血再灌注模型组(P<0.05),ATP酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性明显高于缺血再灌注模型组(P<0.05)。异丙酚60μmol/L组与异丙酚60μmol/L 蛋白激酶C抑制剂5μmol/L组相比,上述指标无明显差异。结论:异丙酚对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用,可能与其抗脂质过氧化和激活蛋白激酶C有关。