自体骨髓单个核细胞移植起搏器诱导心力衰竭犬心功能变化 病理图像分析心脏切片胶原纤维定量的客观价值

背景:干细胞再生可修复受损心肌,但目前利用骨髓单个核细胞移植治疗非缺血性心力衰竭的研究相对甚少.目的:探讨自体骨髓单个核细胞心肌移植后,对起搏器诱导的心力衰竭模型犬心功能的影响.方法:细胞移植组、模型对照组犬均通过快速右室心尖部起搏建立心力衰竭模型.造模后,细胞移植组通过心肌直接注射法分多点注入CM-DiI标记的骨髓单个核细胞悬液,模型对照组同法注入等量生理盐水.4周后取材,取心尖、前壁和室间隔心肌,FITC标记心肌肌钙蛋白,观察心肌纤维化程度,测定心肌胶原容积分数,并进行血流动力学检查.结果与结论:细胞移植组可见CM-DiI和FITC双重染色的双阳性的细胞,呈黄色荧光;模型对照组仅可见FITC染色的绿色荧光图像.苏木精-伊红及Masson染色结果示,模型对照组间质中可见炎性细胞浸润,呈显著间质纤维化和心肌细胞纤维化;而细胞移植组未见明显间质炎性细胞浸润,间质无心肌细胞纤维化,提示快速右室心尖部起搏可成功建立犬心力衰竭模型.与模型对照组比较,移植后4周细胞移植组心尖、前壁、室间隔的胶原容积分数均明显降低(P < 0.05),射血分数明显升高 (P < 0.05),左室舒张末期内径及左室收缩末内径均无明显变化(P > 0.05).说明自体骨髓单个核细胞在心力衰竭犬心肌中可增殖分化为心肌样细胞,并改善心功能,其机制可能与抑制心力衰竭心肌纤维化进程有关.     

经冠状动脉移植自体骨髓单个核细胞治疗犬急性心肌梗死

背景:近年的研究表明,细胞移植可以修复受损的心肌组织,促进缺血区域新生血管的形成,改善缺血心肌的灌注和收缩功能.目的:观察白体骨髓单个核细胞经冠状动脉移植至犬心肌梗死模型后在体内的分化及对心功能的影响.设计、时间及地点:随机列照动物实验,于2006-09/2008-04在天津泰达国际心血管病医院动物实验室完成.材料:成年杂种犬16只,体质量15～25 kg,通过结扎冠状动脉前降支中段建立急性心肌梗死模型.方法:16只杂种犬投币法随机分为移植组(n=10)和对照组(n=6),移植组于心肌梗死后2 h经冠状动脉内移植CM-Dil标记的骨髓单个核细胞:对照组注射等量生理盐水.冠状动脉结扎后2 h及6周时行超声心动图检查,移植后6周处死所有动物于梗死区及其邻近部位取材.主要观察指标:①心肌梗死后6局两组心功能指标比较.②荧光显微镜下观察骨髓单个核细胞在心肌组织中的分化情况.③透射电镜观察移植组梗死区心肌组织的变化.结果:纳入杂种犬16只,全部存活.左前降支结扎2 h后可见结扎点远端心肌组织变紫,室壁活动减弱,心电图出现ST段弓背样抬高.①对照组心肌梗死后6周和心肌梗死后2 h相比各项指标均无显著改善(P0.05).移植组术后6周时左心室射血分数、左心室收缩期末内径及左心室短轴缩短率均较心肌梗死后2 h有明显改善(P<0.01),其中左心室射血分数与对照组相比亦有明显改善(P<0.05),移植组射血分数较对照组提高7%左右.②荧光显微镜下可见移植组自体骨髓单个核细胞经冠状动脉移植后可分布于梗死区及梗死周边区.并表达肌球蛋白重链:正常心肌组织及对照组心肌组织内未见移植细胞.③透射电镜下可见移植组分化完全的血管内皮细胞及类心肌样细胞.结论:骨髓单个核细胞可在梗死区梗死周边区存活并逐渐分化成心肌样细胞,促进缺血心肌血管新生,改善心功能.     

构建胶质原纤维酸性蛋白原核表达载体及蛋白表达鉴定

背景:胶质原纤维酸性蛋白在神经损伤的发生发展过程中具有重要作用.目的:对胶质纤维酸性蛋白进行基因克隆,构建原核表达质粒并加以鉴定.设计、时间及地点:单一样本观察,于2008-09/1 1在上海市长征医院神经外科实验室完成.材料:中间载体pGEM-T Easy质粒购于Promega公司,原核表达质粒pGEX-4T-2由上海市长征医院神经外科实验室保存.方法:从人脑胶质瘤组织提取mRNA,采用反转录一聚合酶链反应的方法扩增胶质纤维酸性蛋白序列并表达,然后与载体pGEX-4T-2连接,转化宿主菌BL21构建重组质粒,诱导表达后纯化,Westem-blot鉴定.主要观察指标:总RNA鉴定结果,聚合酶链反应扩增产物分子质量的鉴定,重组表达载体的酶切鉴定,Western-blot鉴定.结果:抽提肿瘤组织总RNA后,电泳清晰可见rRNA28S、18S、5S 3条带.且总RNA的A260nm/A280nm值为1.903.聚合酶链反应结果显示,在约1 300 bp左右有一条特异性条带,与预期的胶质原纤维酸性蛋白基因大小一致.重组表达载体的酶切鉴定及测序结果与GenBank的胶质原纤维酸性蛋白序列一致,经Western-blot验证为目的蛋白.结论:用双酶切、DNA测序与Western.blot的方法证实原核表达载体构建成功.     

脑脊液漏的诊断和治疗

目的 探讨脑脊液漏的规范化诊断和治疗方法以改善患者预后.方法 回顾性分析我院自1994年1月-2007年3月收治的75例脑脊液漏的病例资料,其中鼻漏51例,耳漏9例,切口或伤口漏15例;外伤性漏39例,手术后漏32例,自发性漏4例.23例通过体位休息和药物治疗治愈,16例通过脑脊液引流和(或)伤口局部处理获愈;手术治疗36例,其中开颅修补17例,颅外修补17例,分流5例(其中3例为修补术后再行分流).结果 治愈64例,好转10例,死亡1例.结论 规范化的诊断、治疗方案有助于提高脑脊液漏的治愈率,减少并发症.     

经冠状动脉化学消融术治疗顽固性心律失常的实验研究和临床应用

20世纪80年代初期,心律失常经导管电极电融术(electrical ablation)开始应用于临床。与抗心律失常药物或置入式心脏复律/除颤器(AICD)的姑息治疗不同,电融术人为造成心律失常起源灶或传导径路区心肌损害可达到治愈心律失常的目的,并免除手术治疗可能产生的某些危险。1983年,     

血清总胆红素水平与冠脉支架植入术后再狭窄的关系

目的:探讨血清总胆红素水平与冠状动脉支架内再狭窄的相关性。方法:对2005年2月至2010年8月在我院行冠脉支架植入术后1年行冠状动脉造影随访的797例患者的资料进行回顾性分析,以支架植入段内径狭窄≥50%为再狭窄,分为再狭窄组(153例)和对照组(644例),分析两组患者的临床资料、临床生化指标及冠脉造影结果的差异,探讨血清总胆红素水平和支架内再狭窄的关系。结果:再狭窄组总胆红素水平低于对照组,差异有统计学意义(P=0.008)。多因素Logistic回归分析显示:尿酸、糖尿病与再狭窄呈正相关(P<0.05)。支架直径、血清总胆红素水平与再狭窄呈负相关(P<0.05)。结论:血清总胆红素水平与冠状动脉支架内再狭窄密切相关,高血清总胆红素浓度水平是冠脉支架术后再狭窄的保护因素。     

构建胶质原纤维酸性蛋白原核表达载体及蛋白表达鉴定

背景：胶质原纤维酸性蛋白在神经损伤的发生发展过程中具有重要作用。 目的：对胶质纤维酸性蛋白进行基因克隆,构建原核表达质粒并加以鉴定。 设计、时间及地点：单一样本观察,于2008-09/11在上海市长征医院神经外科实验室完成。 材料：中间载体pGEM-T Easy质粒购于Promega 公司,原核表达质粒pGEX-4T-2由上海市长征医院神经外科实验室保存。 方法：从人脑胶质瘤组织提取mRNA, 采用反转录-聚合酶链反应的方法扩增胶质纤维酸性蛋白序列并表达,然后与载体pGEX-4T-2连接,转化宿主菌BL21构建重组质粒,诱导表达后纯化,Western-blot鉴定。 主要观察指标：总RNA鉴定结果,聚合酶链反应扩增产物分子质量的鉴定,重组表达载体的酶切鉴定,Western-blot鉴定。 结果：抽提肿瘤组织总RNA后,电泳清晰可见rRNA28S、18S、5S 3条带。且总RNA的A260nm/A280 nm值为1.903。聚合酶链反应结果显示,在约1 300 bp左右有一条特异性条带,与预期的胶质原纤维酸性蛋白基因大小一致。重组表达载体的酶切鉴定及测序结果与GenBank的胶质原纤维酸性蛋白序列一致,经Western-blot验证为目的蛋白。 结论：用双酶切、DNA测序与Western-blot的方法证实原核表达载体构建成功。     

以晕厥、严重心律失常为表现的老年肺栓塞2例

病例1：女,81岁,4d前无明显诱因出现一过性黑朦,无意识丧失,服速效救心丸稍缓解,急诊心电图示Ⅲ。房室传导阻滞,为行永久性起搏器植入术收入院。查体：血压150／80mmHg,呼吸20次／分,心率70次／分,心肺未见明显异常,心电图提示完全性左束支传导阻滞。入院次日常规化验发现血D-二聚体0．6mg／L,考虑肺栓塞,血气分析：pH7．46．PO2 55mmHg,PCO2 36mmHg,考虑肺栓塞;心脏彩超提示室间隔中下段及左室下壁基底段节段性运动异常,少、中量主动脉瓣反流,少量三尖瓣反流,各房、室内径不大。     

等剂量国产与进口氯吡格雷对急诊PCI术后影响的等效性比较

目的 探讨等剂量国产氯吡格雷(泰嘉)和进口氯吡格雷(波立维)对急性心肌梗死(AMI)患者急诊经皮冠状动脉内介入治疗(PCI)术后疗效及安全性是否相同.方法 前瞻性入选204例接受急诊PCI治疗的AMI患者,分为泰嘉组(123例)及波立维组(81例),在急诊室给予300 mg负荷剂量,序贯75 mg/d,随访3～28个月,观察急性、亚急性、晚期、极晚期支架内血栓和心肌梗死、心源性死亡、脑卒中的联合终点不良心脏事件(MACE)的影响以及出血等相关副作用的影响.结果.泰嘉组和波立维组均无支架内血栓和出血事件;波立维组有2例心源性死亡,分别为心源性休克及心脏破裂;两组靶血管重建及联合终点事件发生率,经统计学检验,差异无统计学意义(χ2分别为0.000和0.921,P值分别为0.989和0.337);两组之间累积MACE经Kaplan-Meier生存分析计算,绘制K-M曲线,经Log Rank比较,差异无统计学意义(χ2=0.679,P=0.410).结论.等剂量国产与进口氯吡格雷对AMI患者急诊直接PCI术后疗效及安全性相似.     

EFFECTS OF CLASS

Ｓｕｄｄｅｎｃａｒｄｉａｃｄｅａｔｈｆｒｏｍｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｔａｃｈｙｃａｒｄｉａｏｒｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｆｉｂｒｉｌｌａｔｉｏｎ(ＶＴ/ＶＦ)ｒｅｍａｉｎｓａｍａｊｏｒｈｅａｌｔｈｐｒｏｂｌｅｍ,ｗｉｔｈａｎｅｓｔｉｍａｔｅｄ300000ｅｐｉｓｏｄｅｓ/ｙｅａｒｉｎｔｈｅＵｎｉｔｅｄＳｔａｔｅｓ1　ＣｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌａｎｔｉａｒｒｈｙｔｈｍｉｃｄｒｕｇｔｈｅｒａｐｙｐｒｅｖｅｎｔｓＶＴ/ＶＦｓｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅｉｎ20%-50%ｏｆｓｕｃｈｐａｔｉｅｎｔｓ2,3　Ｔｈｅｉｍｐｌａｎｔａｂｌｅｃａｒ…