一种新的国产HRP无毒底物TMBS在酶免疫测定中的应用研究

选择一种安全无毒,使用方便,敏感性好,稳定性好的辣根过氧化物酶(HRP)底物,是自酶免疫测定(Enzyme Immuno-assay,EIA)问世以来,许多学者一直致力于解决的问题。在 EIA 中,HRP 是使用最普遍的一种酶,HRP 活性高,稳定性好,     

快速检测血吸虫循环抗原EIA-kit的应用研究

应用快速检测血吸虫C_(Ag)的EIA-kit检测各期血吸虫病人血清,对急性血吸虫病的阳性率为100.0%(45/45);对慢性血吸虫病的阳性率为94.8%(530/559);但对晚期病人的检出率仅52.4%(66/126).该试剂盒与Kato-Katz法、粪孵法平行检测112例血吸虫病人,Kato-Katz法1次仅能查出54.5%(61/112);孵化法1次查出75.9%(85/112);EIA-kitl次即能查出96.4%(108/112).与常用查抗体的方法平行检测109例血吸虫病人血清,C_(Ag)阳性率为92.9%、IHA为96.9%、COPT为83.7%、ELISA为98.5%.对血吸虫病人治疗效果考核表明,治后3月C_(Ag)转阴率为79.7%、6月为86.1%、1年为91.3%.经实验室和现场应用表明该试剂盒检测C_(Ag)有较高的敏感性和特异性.     

生物素-抗生物素在人和实验动物血吸虫病诊断中的应用研究

应用新的生物放大系统BAS作ABC-ELISA,与常规ELISA比较检测可提高试验的敏感性。采用可溶性虫卵抗原对粪孵毛蚴在5只以下30克粪的68例进行检测,ABC法的检出率可由ELISA的95.6％提高到100％;用成虫抗原时,ABC法的阳性消光值和阴性消光值之比(P/N)为常规ELISA的1.42倍。ABC法用于检测实验家兔血吸虫病可显著提高敏感性(P<0.01),提示BAS系统在人及动物特异性抗体的检测中都是有用的增敏试剂。     

生物素—亲和素系统检测华支睾吸虫特异性抗体的研究

用ABC-ELISA检测华支睾吸虫粪检阳性病人130例,粪检阴性受试者201例及其他疾病82例、并和粪检及另外两种血清学方法(SPA ERASA、常规ELISA)比较:和粪检阳性符合率93.08％,阴性符合率63.37％;ABC-ELISA的阳性反应强度是常规ELISA的1.31倍(p<0.05),其平均几何滴度是SPA-ELISA的1.77倍(p<0.05),特别在轻度感染病人,ABC-ELISA的平均几何滴度明显高于后两种血清学方法;而且非特异性反应较低。     

斑点-ELISA直接法检测黑热病循环抗原的现场验证

我们于1990年4～5月间在甘肃武都、文县及对四川省汶川、南坪、理县等地对黑热病病人血清进行现场测试,同时对麻风,结核等疾病以及疫区正常人进行交叉试验,均获满意结果。 材料与方法:酶标记单克隆抗体(HRP—McAb) 为本所免疫诊断研究室提供。试验时将待测血清以2μl/孔滴于硝酸纤维膜上,阴干,以pH7.5Np—40,Tris、明胶缓冲液洗涤4次,每次10min。弃去,加HRP—McAb(1:100),室温孵育2h,     

黑热病快速ELISA诊断方法的研究

用RPMI1640纯培养的前鞭毛体可溶性抗原预固相PVC载体，用抗入γ链McAb制备酶结合物，TMB底物系统，建立了快速诊断黑热病的ELISA方法，该法与常规ELISA平行检测107例骨髓穿刺证实的黑热病患者血清，阳性符合率均为100%，检测120例健康人血清，均未见假阳性反应，与血吸虫、间日疟、囊虫、旋毛虫、华枝睾吸虫等寄生虫病人血清均未见交叉反应，但与麻风病人血清有10%的交叉反应，结果表明，该法具有较高的敏感性和较好的特异性，可与经典ELISA相比，但本法的操作更简便和快速。     

酶标记抗原斑点试验检测间日疟抗体的研究

作者等在Hawkcs(1982)及Herbrink(1982)所建立的抗原斑点试验(Antigen Spot Test简称AST)的基础上,发展了一种用酶(HRP)标记疟疾抗原检测疟疾抗体的方法,即酶标记抗原斑点试验(Enzyme La-belled Antigen Spot Test,简称ELAST),具有简便、稳定、可靠的效果。 感染食蟹猴疟原虫(plasmodium cynomolgi,简称Pc)的恒河猴,切脾,待疟原虫增殖至10％虫血水平左右,且以裂殖体期和大滋养体期为主时放血。用肝素抗凝,离心去血浆,反复洗血球,分出棕褐色感染     

血吸虫循环抗原检测与病原学诊断方法的比较研究

目的观察比较血吸虫循环抗原与病原学诊断方法的应用效果，为经过周期性群体化疗后的血防工作提供有价值的诊断方法。方法用检测血吸虫循环抗原（ScAg）标准化试剂、尼龙绢集卵孵化法、Kato—Katz法平行检测血吸虫病流行区居民感染情况。结果以粪便检查阳性的血吸虫病患者例数为金标准，ScAg的阳性检出率为95．2％（119／125），集卵孵化法阳性率为81．6％（102／125），Kato—Katz法阳性率为65．6％，（82／125）。粪检总阳性中集卵孵化法漏检率为18．4％（23／125），Kato—Katz法漏检率为34．4％（43／125）。ScAg检测与Kato—Katz法检测结果比较差异有统计学意义（x^2=34．750，P〈0．01），与集卵孵化法检测结果比较差异有统计学意义（r=11．273，P〈0．01）。Kato—Katz法中单片阳性占41．5％，二片以上为阳性者占58．5％。ScAg检测分别采用20m，50m，100m三种不同血清样本量进行比较，检出率分别为84．8％（106／125），95．2％（119／125），96．0％（120／125）。结论三种方法中Kato—Katz法检出率最低，虫卵片数分布有很大的机缘性，只适宜研究时作定量用。集卵孵化法中有较多的未成熟虫卵不能孵化，但适宜与镜检虫卵配合应用。ScAg检测符合率高，简便快速，可将46．6％（109／234）粪检漏检者查出，有利于及时治疗，并切断传染源。