仙灵骨葆相关肝损伤的临床病例分析及拆方实验研究

仙灵骨葆为骨科常用药,临床疗效好,但近年来发现有致肝损伤风险.本研究通过对文献不良反应报告和重点医院病例进行分析,发现文献检索到的仙灵骨葆肝损伤病例存在较大比例的报告信息不完整,难以准确判断其因果关系.重点医院药物性肝损伤(DILI)病例中,筛选出仙灵骨葆相关肝损伤患者6例,其中2例经整合证据链法评价达到了"临床诊断"...     

419名孕妇孕期和产后心理状态及影响因素分析

目的:调查孕妇孕期焦虑、抑郁和产后抑郁的发生率,分析其影响因素。方法:将419名孕妇早孕期采用《早孕心境调查表》,填写综合性医院焦虑/抑郁情绪量表(HAD量表);产后采用《产妇心境调查表》,填写爱丁堡产后抑郁量表(EPDS)。结果:孕妇孕期焦虑发生率为3.3%,抑郁发生率为4.5%;产后抑郁发生率为3.1%。单因素分析显示,孕期焦虑和孕期抑郁与产后抑郁显著相关(P<0.000 1);Logistic回归分析显示,孕期焦虑是产后抑郁的主要危险因素。早孕反应重、人际关系差、居住地条件不满意是孕期焦虑的主要危险因素,吸烟或饮酒习惯、孕期有饮食偏好、不知道孕期适当运动的好处、丈夫对本次怀孕不高兴、性格内向是孕期抑郁的主要危险因素;除孕期焦虑外,非独生子女、对本次怀孕不高兴、产后饮食不满意、人际关系差是产后抑郁的主要危险因素。结论:从孕早期关注孕妇的心理状态,及早发现孕产期不良心理状态,及时干预,促进孕产妇心理健康。     

对301名孕产妇母乳喂养知信行的调查分析

目的 了解上海市长宁区孕产妇母乳喂养知识、态度和行为,探索可能影响母乳喂养的因素.方法 2009年8至12月对上海市长宁区北新泾、周桥、程桥3个街道的孕36～38周孕妇,在孕末随访时进行知识和态度调查,第1次产后访视时调查母乳喂养情况.结果 有301名调查对象了解"如何做到有效吸吮"和"如何保持泌乳"的母乳喂养相关知识者分别为59.5%和52.5%;有60.1%的调查对象不了解"住院时不应喂糖水/奶粉".调查对象母乳喂养知识来源前3位依次是医务人员(93.0%),母亲及其他亲戚(68.1%),书籍、报纸、宣传画册等文字资料(65.4%);希望获得途径前3位依次是医务人员(92.4%),爱婴医院宣传(65.4%),书籍、报纸、宣传画册等文字资料(62.1%).多数调查对象的母乳喂养相关态度较好.产后访视时母乳喂养率为95.3%、纯母乳喂养率仅为46.8%.单因素和多因素分析均显示,调查对象为独生子女的纯母乳喂养率显著低于非独生子女者(P<0.0001).结论 应健全区域母乳喂养支持组织,充分发挥爱婴医院和医务人员的作用,鼓励孕产妇家属共同参与,提供连续性母乳喂养支持,提高纯母乳喂养率.     

去甲基化KG1a细胞DNA对人外周血单个核细胞杀伤活性和T细胞受体Vαβ T细胞增殖的影响

目的:研究去甲基化的急性髓性白血病细胞KG1a的DNA体外诱导人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)的杀伤活性和T细胞受体Vαβ(αβ chain variable gene of T cell receptor,TCR Vαβ)谱系的表达和克隆情况.方法:去甲基化试剂盒对KG1a细胞去甲基化处理,并提取其DNA.应用乳酸脱氢酶释放法检测DNA诱导前后PBMC杀伤KG1a细胞的活性,应用RT-PCR方法扩增各组外周血T细胞的32个TCR Vα亚家族和24个TCR Vβ亚家族的CDR3,并用基因扫描分析扩增产物以确定T细胞的克隆性.结果:基因扫描显示去甲基化的KG1a细胞DNA可以诱导出呈单克隆、寡克隆或寡克隆趋势生长的亚家族T细胞,且在效靶比为20:1时去甲基化的KG1a细胞DNA诱导前后PBMC杀伤KG1a细胞的活性差异有统计学意义(P＜0.05).结论:去甲基化的KG1a细胞DNA可提高PBMC杀伤活性,且诱导T细胞呈克隆性增殖.     

基因扫描分析人T细胞受体CDR3谱型检测T细胞克隆技术的建立

目的建立人T细胞受体（TCR）互补决定区3（CDR3）基因谱型的基因扫描分析术,为分析T细胞克隆提供研究方法。方法分别以Jurkat和Raji细胞作为阳性和阴性对照,应用RT-PCR方法扩增5例健康志愿者外周血T细胞的34个TCR Vα亚家族和26个TCR Vβ亚家族的CDR3,并用基因扫描分析扩增产物以确定T细胞的克隆性。结果T细胞株Jurkat细胞仅表达TCR Vα1．1和Vβ8基因,且为单克隆,而B细胞株Raji细胞则不表达所有的TCR Vα和Vβ基因。5例健康人表达所有的TCR Vα和Vβ基因,均为多克隆T细胞。结论基因扫描分析人TCRCDR3基因谱型是检测T细胞克隆性的精确敏感方法。     

外用噻吗洛尔和激光治疗婴幼儿血管瘤疗效比较

目的：比较外用噻吗洛尔和激光治疗婴幼儿浅表型血管瘤的疗效。方法： 回顾性分析91例外用0.5%噻吗洛尔与85例PDL和Nd:YAG双波长激光治疗的婴幼儿浅表型血管瘤的疗效,瘤体连续2个月无继续改善停止治疗。结果： 噻吗洛尔组总有效率84.6%,激光组总有效率88.2%,差异无统计学意义（P＞0.05）。激光组平均治疗时间及瘤体消退76%～100%的时间分别为2.95±1.30和2.27±1.21个月,短于噻吗洛尔组的7.57±3.28和6.57±2.22个月,两组比较差异均有统计学意义（均P＜0.01）。结论： 两种方法治疗婴幼儿浅表型血管瘤疗效相近,激光治疗较外用噻吗洛尔控制快、疗程短。     

“去重”在肺癌NGS数据分析中的重要作用

目的 探讨“不去重”和“去重”两种方法分析后各NGS相关指标间的差异,研究“去重”在靶向捕获NGS数据分析中的重要作用。方法 通过对58例肺癌患者的DNA样本进行靶向286基因探针杂交方法建库并进行NGS检测,每例NGS检测数据分别进行“去重”和“不去重”两种方法的生物信息学分析,比较两种方法分析得到的NGS相关指标Mapped Reads（可比对上reads比例）、On Target（靶向区域reads比例）、Mean Depth（平均测序深度）以及Uniformity（均一性）等数据之间的差异。结果 “不去重”和“去重”两种方法分析得到平均Mapped Reads、On Target、Mean Depth和Uniformity值,各组指标间差异均有统计学意义（P<0.001）。“去重”方法分析时,Mapped Reads、On Target和MeanDepth 3个指标均呈现出血浆样本与其他3种类型样本间（FFPE、穿刺和手术）差异有统计学意义,在Uniformity指标上则呈现出4种类型样本间差异均无统计学意义。而“不去重”方法分析后结果正好相反。结论 去除PCR扩增所致重复序列的“去重”步骤在NGS数据分析中具有重要的作用,能够改善结果均一性,真实反映所测样本的DNA模板数量及等位基因频率（AF值,allele frequency）。“去重”后结果更有助于临床决策。     

变性高效液相色谱法检测多种途径获取的非小细胞肺癌组织表皮生长因子受体基因突变

背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是最重要的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)治疗靶点,EGFR突变可预测酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)的疗效.DNA直接测序是检测EGFR突变最常用的方法,同时也作为突变检测的"金标准",但该方法耗时较长、所需组织量较多且敏感性较低.变性高效液相色谱法是一种快速、自动化、高敏感性的突变检测方法,本研究旨在探讨变性高效液相色谱法(denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)快速检测NSCLC肿瘤组织EGFR基因突变的诊断价值.方法通过检测已知按不同比例混合的野生型及突变型EGFR质粒DNA,评价DHPLC法的准确性和敏感性.选取经多种途径获取的83例NSCLC患者的冻存肿瘤组织,提取DNA并PCR扩增EGFR外显子19、21,用DHPLC法检测并与直接测序法进行比较.结果当突变型质粒与野生型质粒按1:100混合时,仍可被DHPLC法显著检出,而直接测序法仅可检出1:10水平.83例NSCLC组织标本中,DHPLC法检出22例EGFR突变(突变率26.51%),3例直接测序法结果为野生型,余19例EGFR突变及61例野生型均与直接测序法结果相符.DHPLC法的敏感度为100%,特异度为95.31%,对经皮细针肺穿刺活检、淋巴结活检以及外科切除等途径获取的肿瘤样本均具有较高的敏感度、特异度.EGFR突变与性别、病理类型显著相关,与吸烟状态、年龄等无相关性.结论 DHPLC法可作为NSCLC患者EGFR基因型的初筛方法.     

RNA干扰技术抑制人肺腺癌A549细胞株EGFR基因表达

目的：建立质粒表达载体转录介导的RNAi技术,为开发阻断表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)信号通路的新途径和EGFR下游信号通路研究奠定基础。方法:化学合成siRNA-EGFR序列,构建并鉴定重组载体pSciencer 2.0 U6-shRNA-EGFR,转染A549人肺腺癌细胞株,免疫印迹和RT-PCR检测沉默效果,用四甲基偶氮唑盐比色法、DAPI染色法、Annexin V/PI 双标记法观察基因沉默后细胞生物学特性改变。结果：shRNA-EGFR使EGFR表达明显下调,转染细胞后,显著抑制细胞增殖,诱发凋亡。DAPI染色示细胞核着色增强,胞核缩小,核膜皱缩,染色质凝聚、边缘化、破碎;Annexin V/PI示凋亡早期细胞比例增高;细胞周期分析见 shRNA-EGFR各组 G0-G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少。结论：化学合成法和体内转录质粒载体法介导的RNAi可序列特异性下调A549细胞株EGFR 基因转录和表达。shRNA-EGFR重组质粒通过下调EGFR 表达可抑制细胞增殖和诱发凋亡,部分逆转 NSCLC 细胞的恶性表型,有望成为NSCLC 基因治疗和功能研究的工具。