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目的:探讨micro RNA-21(mi RNA-21)在人口腔鳞癌顺铂耐药细胞中的表达及其作用机制。方法 :采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测mi RNA-21在口腔鳞癌细胞株Tca8113及顺铂耐药细胞株Tca8113/DDP的表达;采用体外转染法将mi RNA-21模拟物(mimics)或抑制物(inhibitor)分别转染Tca8113和Tca8113/DDP细胞,采用RT-PCR检测转染前后细胞中mi RNA-21的表达情况;采用CCK8实验检测转染前后细胞对顺铂敏感性的变化;并用Western blot检测转染前后细胞中PTEN的表达变化。采用双荧光素酶报告基因验证mi RNA-21是否作用于PTEN基因的3’-UTR区预测靶位。结果:mi RNA-21在Tca8113/DDP细胞中的表达水平是Tca8113细胞的(8.26±1.37)倍(P<0.01)。Tca8113细胞转染mi RNA-21 mimics后,细胞中mi RNA-21表达水平是转染前的(10.51±2.18)倍(P<0.01),顺铂对Tca8113细胞增殖的抑制率较转染前明显下降(P<0.05),细胞内PTEN表达水平较转染前明显下降(P<0.05)。Tca8113/DDP细胞在转染mi RNA-21 inhibitor后,细胞中mi RNA-21表达水平是转染前的(0.32±0.14)倍(P<0.01),顺铂对Tca8113/DDP细胞增殖的抑制率与转染前比较明显增加(P<0.05),细胞内PTEN表达水平较转染前明显增高(P<0.05)。经双荧光素酶报告基因验证PTEN是mi RNA-21的靶基因。结论:mi RNA-21在口腔鳞癌顺铂耐药细胞Tca8113/DDP中异常高表达,下调其表达可部分逆转细胞耐药性,mi RNA-21可能通过作用于PTEN参与口腔鳞癌细胞顺铂耐药的发生和发展。 相似文献
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目的检测肺结核病患者外周血单个核细胞(PBMC)中环状RNA circRNF10的表达水平,探讨其在肺结核病诊断中的应用价值。方法采用实时荧光定量PCR法对2016年3月至2017年3月江西省胸科医院收治的90例未经治疗的活动性肺结核患者、40例肺炎患者、40例肺癌患者及70例健康体检者PBMC中circRNF10的表达水平进行检测。应用受试者工作特征曲线(ROC)曲线分析circRNF10诊断肺结核的敏感度和特异度。结果肺结核患者PBMC中circRNF10表达水平(2.11±1.13)显著高于健康对照组(1.00±0.38)、肺炎组(1.14±0.57)和肺癌组(0.93±0.31),差异有统计学意义(F=38.15,P0.01)。肺结核患中肺部空洞组circRNF10水平显著高于无空洞组(t=7.02,P0.01);肺部病灶范围≥2个肺野组circRNF10水平显著高于2个肺野组(t=4.68,P0.01)。与抗结核治疗前(2.31±0.72)相比,肺结核患者circRNF10表达水平在抗结核治疗后3月(1.27±0.41)(t=5.62,P0.01)、6月(0.94±0.38)(t=7.54,P0.01)均有显著降低。ROC曲线分析显示,circRNF10在鉴别肺结核与健康对照、肺炎患者及肺癌患者的曲线下面积(AUC)分别为0.837、0.782、0.861。结论 PBMC中circRNF10有望作为肺结核诊断和疗效监测的潜在生物标志物。 相似文献
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早期发现和诊断结核病(Tuberculosis,TB)病人、及时选用敏感药物给予有效治疗,是减少TB传播机会、控制TB疫情的关键环节。目前,病原学诊断仍是TB诊断的金标准,也是判断疾病活动性、传染性和疗效考核的主要指标。传统的TB病原学检查主要是涂片抗酸染色检查和罗氏培养基培养法(L-J法)。抗酸染色的优点是操作简单,快速,但敏 相似文献
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目的 研究长链非编码RNA NEAT1靶向miR-27b调控类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)细胞生物学功能机制。方法 选取2021年1月至2022年12月在南昌大学第一附属医院东湖院区风湿免疫科确诊的类风湿关节炎(RA)患者40例作为观察组,同期行膝关节手术的健康创伤患者40例作为对照组开展研究。分别采集观察组和对照组研究对象的膝关节滑膜组织中进行培养,培养成功之后将RA-FLS细胞根据免疫荧光分为对照组以及观察组。其中观察组待细胞汇合度达至80%时转入si-NEAT1,对照组则转入对照组-siRNA。比较两组NEAT1、miR-27b的表达,RA-FSL细胞生物学功能,炎症因子表达水平,并行Pearson相关性分析。结果 观察组NEAT1、miR-27b相对表达量分别相较于对照组均更低,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组RA-FSL细胞增殖率、迁移细胞数、侵袭细胞数分别相较于对照组均更低,而细胞凋亡率相较于对照组更高,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平分别... 相似文献
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目的:探讨CD64在类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞亚群上的表达及临床意义,以阐明其在RA发生和发展中的作用。方法:应用流式细胞仪检测44例RA患者和22例正常对照者外周血单核细胞亚群的比例及其CD64的表达,比较RA组和正常对照组之间各单核细胞亚群的比例及其表面CD64表达水平,并分析各单核细胞亚群表面CD64表达与实验室检查数据的相关性。两组间比较采用t检验或者非参数检验,两变量之间相关性采用Pearson或Spearman相关分析。结果:(1)RA组中间型单核细胞比例高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);RA组经典型单核细胞比例和非经典型单核细胞比例低于对照组(P<0.05),差异有统计学意义。(2)RA组各单核细胞亚群CD64表达(MFI)显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)RA患者外周血经典型单核细胞和中间型单核细胞CD64表达(MFI)与DAS28呈正相关(rs=0.308,P=0.044;rs=0.302,P=0.049)。(4)RA患者各单核细胞亚群CD64表达(MFI)与ESR,CRP呈正相关(rs=0.410,P=0.008;rs=0.475,P=0.003;rs=0.448,P=0.003;rs=0.473,P=0.004;rs=0.348,P=0.026;rs=0.340,P=0.042)。(5)RA患者RF阳性组、ACPA阳性组外周血经典型单核细胞、中间型单核细胞上CD64表达(MFI)明显高于对应的阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。(6)中间型单核细胞CD64高表达组血清细胞因子IL-6水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:RA患者外周血单核细胞亚群CD64表达异常,经典型单核细胞和中间型单核细胞CD64表达与炎症水平、自身抗体产生和疾病活动性有明确的相关性。以外,中间型单核细胞CD64的表达与细胞因子相关。 相似文献
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目的 探讨人参皂苷Rg1对脂多糖(LPS)诱导的小鼠心肌细胞损伤的保护作用及其对促炎分子lincRNA-COX2表达的影响.方法 分离培养原代BALB/c乳鼠的心肌细胞,用终浓度为25、50、100 μmol/L人参皂苷Rg1预处理12 h后,分别加入终浓度为10 mg/L的LPS刺激6 h(25、50、100 μmol/L人参皂苷Rg1+LPS组),以单纯10 μg/L LPS(LPS组)、未经人参皂苷Rg1及LPS处理(对照组)作对照,ELISA法检测心肌细胞培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)蛋白分泌;MTT法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)生成;RT-qPCR法检测细胞内lincRNA-COX2表达变化情况.结果 与LPS组相比,25、50、100 μmol/L人参皂苷Rg1+LPS组细胞培养上清液中的TNF-α、IL-6蛋白浓度呈剂量依赖性地减少,心肌细胞中lincRNA-COX2表达被抑制,心肌细胞的存活率相应提高.结论 人参皂苷Rg1能够保护LPS所致小鼠心肌细胞损伤,其机制可能与抑制炎症因子TNF-α、IL-6分泌,下调促炎因子lincRNA-COX2表达有关. 相似文献
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目的建立显微镜观察药物敏感度检测(MODS)技术快速测定吡嗪酰胺(PZA)耐药性,并探讨其在结核分枝杆菌(MTB)PZA耐药性测定中的应用价值。方法用24孔细胞培养板建立MODS技术,进行PZA耐药性检测,并对最佳检测条件进行探讨。将该技术用于112株MTB临床分离株的PZA耐药性检测,将检测结果与罗氏绝对浓度法的药敏结果进行比较分析,对不符合的菌株进行最低抑菌浓度(MIC)测定和MTB pncA基因序列测定分析。结果 MODS检测PZA耐药性的最佳测定条件为pH=5.7,药物浓度为100μg/mL。如以绝对浓度法药敏结果为判断标准,MODS检测PZA耐药性的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值分别为95.7%、88.4%、92.9%、93.0%和92.7%。MODS与绝对浓度法检测结果不符的8株菌株中,MIC和pncA基因测序结果表明,有6株的MODS结果与MIC和pncA基因测序结果相符,2株的结果不符。结论 MODS检测MTBPZA耐药性具有快速、操作简便、价廉等优点,与绝对浓度法药敏结果有较高的符合率,可作为PZA耐药性的快速筛选方法之一。 相似文献
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目的探讨肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)中长链非编码RNA(lncRNA)核富含丰富的转录本1(NEAT1)的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测65例肺结核病患者(结核组)及30例健康体检者(健康对照组)PBMC中lncRNA NEAT1的表达量,分析其与结核病发生发展以及转归的相关性。结果 RT-PCR检测结果显示lncRNA NEAT1在肺结核患者PBMC中的相对表达水平是健康对照组的4.90±0.72倍,差异有统计学意义(P0.01)。LncRNA NEAT1在初治和复治病例中表达差异无统计学意义(P0.05);lncRNA NEAT1在肺部有无空洞及空洞数量分组之间表达差异有统计学意义(P0.05),即lncRNA NEAT1随空洞累及范围的增加而升高。肺结核患者PBMC中lncRNA NEAT1表达量随着治疗时间逐渐下降,恢复至正常水平。结论肺结核患者PBMC中lncRNA NEAT1表达升高,且与肺结核的发展和转归有关,监测PBMC中lncRNA NEAT1表达或可以评估结核病患者预后情况。 相似文献
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目的 探讨含T细胞免疫球蛋白和酪氨酸免疫抑制受体结构域蛋白(TIGIT)和程序性死亡分子(PD1)在类风湿关节炎(RA)患者外周血滤泡辅助性T(TFH)细胞上的表达及其临床意义。方法 应用流式细胞仪检测79例RA患者(RA组)和45例对照者(HC组)外周血TFH细胞TIGIT和PD1阳性的百分率和平均荧光强度(MFI),并进行比较,分析其与RA实验室检查指标的相关性。结果 (1)与HC组相比,RA组仅PD1+TFH细胞百分率和PD1表达MFI增高,差异有统计学意义(P<0.01)。(2) RA组TIGIT+PD1-TFH细胞百分率低于HC组(P<0.01);RA组TIGIT+PD1+TFH细胞百分率、PD1表达MFI和TIGIT-PD1+TFH细胞百分率、PD1表达MFI高于HC组(P<0.05)。(3) RA组外周血TIGIT+PD1+TFH细胞PD1表达MFI与类风湿因... 相似文献