RNAi沉默PSMA基因对前列腺癌LNCaP细胞生物学行为的影响

目的：构建LNCaP细胞PSMA基因的shRNA真核表达载体，探讨其对LNCaP细胞中PSMA基因表达的干扰作用。方法:针对PSMA mRNA序列设计合成3对编码shRNA的寡核苷酸链，退火形成双链，连接入含有BamHⅠ和HindⅢ酶切位点的pSilencer 2.1-U6-neo真核表达载体，双酶切及测序鉴定。使用脂质体转染的方法将重组质粒导入LNCaP细胞，G418筛选后RT-PCR、Western blotting检测其对PSMA基因干扰作用，并观察对LNCaP细胞生物学行为的影响。结果:经酶切及测序鉴定，成功构建shRNA真核表达载体p-shRNA1,2,3转染LNCaP后，对细胞PSMA mRNA表达抑制率分别为33.15%、9.26%、41.97%，Western blotting结果显示对PSMA蛋白表达的抑制率分别为26.26%、6.47%、40.69%。选择抑制效率较高的p-shRNA3进行体外生长及侵袭力实验，发现干扰后对LNCaP细胞侵袭力增强, 但是对细胞生长影响不大。结论:成功构建了人PSMA基因的RNAi的真核表达载体，并在LNCaP细胞中有效地发挥了对PSMA基因表达的干扰作用，初步发现PSMA在前列腺癌的侵袭中起负向调节作用，为进一步研究PSMA的生物学功能，探索前列腺癌的发病机制奠定一定的实验基础。     

多层(四层)螺旋CT结肠仿真内窥镜的临床应用

目的：研究多层螺旋CT仿真结肠镜(MSCTVC)检查的临床应用价值。材料与方法：应用MSCTVC和电子结肠镜(EC)对30例病人进行检查对照。其中17例还作了病理学检查。结果：MSCTVC与EC诊断符盒，结肠癌15例，息肉9例(其中1例息肉直径6mm)，囊肿1例。MSCTVC与EC不符合5例，其中1例EC未插入升结肠，MSCTVC发现升结肠癌；l例EC发现多发性息肉，MSCTVC发现结肠癌；1例EC发现乙状结肠息肉，MSCTVC加SSD发现横结肠冗长；1例EC插不进，MSCTVC发现回盲部癌；1例EC发现左半结肠1个息肉，右半结肠插不进。MSCTVC发现升结肠、肝曲、脾曲各有1个息肉。17例作病理学检查，MSCTVC和EC诊断为结肠癌者病理诊断为腺癌9例。良恶性不能明确者2例，MSCTWC和EC诊断为息肉者，病理学诊断为腺瘤5例，慢性炎症1例。30例中，3例EC诊断为结肠炎症，MSCTVC诊断为正常。4例EC失败，MSCTVC完成检查，诊断正常。结论:MSCTVC对结肠隆起性病变是一种有效的检查方法。     

肝硬化合并胆石症的围手术期治疗

目的探讨肝硬化合并胆石症的围手术期治疗。方法回顾性总结1994年～2004年收治的54例病人的手术方法、疗效及并发症的防治。结果术中大出血死亡1例；术后应激性溃疡出血2例，胆道出血2例，积极止血处理后痊愈；胆瘘2例，经引流治愈；胸腔积液5例，均随炎症消退消失；肝肾综合征2例，积极保肝治疗后痊愈；切口感染3例，积极换药后痊愈。53例恢复良好出院，随访1～5年无复发。结论严格掌握手术适应证，术前积极纠正肝功能，加强营养支持，简化手术方法，选择个体化手术方式，将提高治愈率、减少并发症及降低病死率。     

分子医学实验教学资源库的开发与应用

分子医学实验教学资源库的建设是保证和提高实验教学质量,有效利用时间和空间,提高教学效率的重要环节,而其网络特性和多媒体性质则赋予了实验教学更多的灵活性、主动性和形象性。文章介绍了分子医学实验教学资源库的开发过程和主要内容及其在实验教学中的作用。     

肾脏固有细胞自噬对肾纤维化作用的研究进展

肾纤维化是各种病因导致的慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）进展至终末期肾病的共同病理变化,其治疗研究一直受到广泛关注,改善肾纤维化所致的肾功能障碍被认为是治疗CKD的重要策略。自噬作为一种进化上高度保守的细胞内降解系统,已被证实与肾纤维化的发生发展密切相关。其中,肾脏固有细胞自噬变化对肾...     

试分析普外科临床常见问题

普外科即普通外科,而普通外科是外科系统中最大的专门学科。这种临床学科主要是以手术的形式和方法来对胆道、肝脏、胃肠、胰腺、肛肠、甲状腺、血管疾病、乳房肿瘤以及外伤等其它疾病进行治疗,本文主要在对相关学习和临床的经验进行概括总结的基础上,就普外科临床常见问题进行相关的探讨和分析。     

带有引导序列的抗-D抗体可变区基因的扩增和序列分析

目的:从引导区扩增获得高度特异性和亲和力的抗-D抗体的可变区基因, 并进行序列分析。方法:提取1株分泌抗-D抗体的人B淋巴细胞株的总RNA, 从引导区设计引物, RT-PCR扩增抗-D抗体的可变区基因, 分别对扩增产物进行分子克隆和测序。结果:用重链引物和轻链引物分别扩增出440bp和410bp的特异带。序列分析表明, 其核苷酸及其所推导的氨基酸(AA)序列符合人Ig可变区基因的序列特征。结论:获得了抗-D抗体可变区基因, 为基因工程抗-D的研制及Rh新生儿溶血病的预防提供物质基础。     

前列腺特异膜抗原剪接变异体的基因结构和多态性分析

目的:了解PSMA剪接变异体的结构及其多样性，探讨前列腺癌的发生机制。 方法:应用cDNA末端快速扩增（RACE）的方法扩增剪接变异体5和3末端，并进行序列测定，分析前列腺癌组织PSMA剪接变异体的结构及其多样性。 结果:从前列腺癌组织中发现4种新的PSMA剪接变异体，与已往报道的PSMA剪接变异体相比，新发现的变异体在不同位点存在不同程度的插入及缺失。 结论:本研究所发现的新PSMA剪接变异体证实和丰富了PSMA剪接变异体的多样性，为寻求前列腺癌特异性的诊断标志物和治疗靶点提供了新的线索和思路。     

乳果糖加莫沙必利治疗老年便秘90例疗效分析

目的：了解乳果糖加莫沙必利治疗老年便秘的疗效。方法：90例病人分为三组，A组单用乳果糖，B组单用莫沙必利，C组乳果糖加莫沙必利口服，疗程2周。结果：A组与C组在总有效率有显著差异（P＜0．01），B组与C组在排便率有显著差异（P＜0．05），结论：乳果糖与莫沙必利合用，可显著提高疗效。     

哌仑西平治疗十二指肠球部溃疡远期疗效及复发的观察

目的　观察哌仑西平治疗十二指肠球部溃疡的远期疗效及复发情况。方法　 63例经胃镜明确诊断十二指肠球部溃疡的患者随机分为A、B、C 3组 ,分别以哌仑西平、雷尼替丁及哌仑西平加雷尼替丁进行为期 4周的短期治疗 ,然后对各组经胃镜检查确定为治愈的患者定期随访一年 ,最后由胃镜检查了解溃疡复发情况。结果　A组 (哌仑西平 )和C组 (哌仑西平加雷尼替丁 )复发率分别为 3 6 4%和 3 3 3 % ,明显低于B组 (雷尼替丁的 81 8% ) ,统计学上有显著差异 (P <0 0 5 )。结论　用哌仑西平治疗十二指肠球部溃疡能降低停药后的溃疡复发率。