墨旱莲对香烟提取物杀伤NHBE细胞的保护作用及机制

目的:研究墨旱莲提取物对香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)作用的正常肺细胞NHBE细胞的保护作用及其机制。方法:MTT法检测墨旱莲提取物对CSE诱导的NHBE细胞增殖的影响,DTNB比色法测定GSH含量,CDNB比色法检测GST活力,NADPH与2,6-二氯靛酚钠(DCIP)测试NQO1活力,Western blot测定蛋白的表达。结果:墨旱莲提取物可以降低CSE对NHBE细胞增殖的抑制作用;恢复由CSE引起的细胞内GSH水平下降,降低诱导细胞中GST与NQO1活力及NQO1蛋白表达。结论:墨旱莲能够减少CSE对NHBE细胞的损伤,其机制可能与II相解毒酶相关。     

兔对电刺激的反应性及体温的昼夜变化

将一天24h划分为12个等分时间点，在各时间点电刺激兔（n＝6）后腿肌肉，记录其发生抽动反应的阈电压．结果发现该阈电压经余弦法分析呈显著余弦振荡（P＜0．05），其中值为15．79V，振幅为0．44v，18：51达到峰值。结果表明兔对电刺激的反应性呈明显余弦昼夜节律性变化，下午18：51反应性最低，上午06：51反应性最高。炎夏室温下测定兔（n＝9）直肠温度，其变化在39．50～40．07℃，来呈余弦规律，最高体温在夜间02：30，最低体温在下午16:30，在00：30～14：30间保持较高体温。     

鼻疗法喷剂治疗偏头痛在中脑导水管周围灰质c-fos蛋白的表达

目的观察鼻疗法喷剂对偏头痛大鼠模型c-fos蛋白表达的影响,探讨其神经生物学作用机制。方法大鼠随机分成6组：空白对照组、模型对照组、阳性药组、鼻疗法喷雾剂大、中、小剂量组;除空白对照组以外的其他5组SD大鼠皮下注射硝酸甘油注射液10mg/kg进行造模;造模后,阳性药组每天灌胃天舒胶囊溶液1ml/100g;鼻疗法喷雾剂大、中、低剂量组分别每天滴0.1ml/100g、0.05ml/100g、0.025ml/100g体质量;空白对照组和模型对照组每天灌胃生理盐水1ml/100g体质量,连续4d。末次给药后1h后取脑,测定中脑导水管周围灰质c-fos蛋白含量。结果大剂量鼻疗法喷剂组中脑导水管周围灰质中c-fos的蛋白表达明显低于模型对照组。结论鼻疗法喷剂能降低中脑导水管周围灰质的c-fos基因的异常表达。     

钩藤散含药血清对PC12细胞损伤的保护作用

目的:探讨钩藤散含药血清对PC12细胞损伤的保护作用。方法:分别采用谷氨酸及过氧化氢造成PC12细胞损伤模型,以MTT法及LDH活性观察钩藤散含药血清对PC12细胞损伤模型的影响。结果:发现钩藤散含药血清对PC12细胞损伤所致的细胞形态改变有明显的保护作用,可增强细胞活力,降低LDH活性。结论:钩藤散含药血清可对抗谷氨酸及过氧化氢造成的PC12细胞损伤,对细胞有明显的保护作用。     

清气凉营注射液的解热作用

目的:研究清气凉营注射液(大青叶、大黄、金银花、知母、野菊花、淡竹叶)对酵母致热大鼠体温的影响及对下丘脑中前列腺素E2(PGE2)和环磷酸腺苷(cAMP)含量的影响。方法:用10%酵母混悬液复制大鼠发热模型,观察清气凉营注射液对大鼠体温的影响,并采用放免法测定下丘脑中PGE2和cAMP含量。结果:清气凉营注射液具有明显的退热作用;清气凉营注射液能明显减少致热大鼠下丘脑中PGE2及cAMP的含量,与模型组比较具有明显差异。结论:清气凉营注射液能降低致热大鼠体温及下丘脑中PGE2和cAMP的含量,通过对下丘脑中分泌的这两个重要的内源性介质的调节,起到良好的退热作用。     

潜在肝毒性中药的成分研究进展

近年来,中药在科研中所占的比例及其临床上的使用量逐渐增高。其研究价值也越来越大,然而中药在使用过程中随之而来的毒副作用也引起人们越来越多的关注。随着中药毒性研究逐渐深入,一些传统性的无毒中药也被发现有潜在的毒性。除了中草药的本身对肝脏有损伤作用之外。还包括以下原因:1中药在生长、加工、炮制、运输等环节上受到污染或变质也会引起对机体的副作用;2临床上应该以中医理论为指导合理用药,应当遵循对症用药,配伍得当的原则;3患者体质皆不相同,除了少部分品种中药是固有型肝毒性中药外,大部分中药的潜在肝毒性具有特异质型的特征。肝脏在药物代谢中发挥重要的作用,容易受到药物的损伤作用,因此中药潜在肝毒性及其毒性成分研究成为中药研究的基本领域之一。该文在查阅肝毒性文献的基础上,归纳了肝毒性的临床分型,靶细胞损伤发病机制,并且系统的对中药潜在肝毒性成分及其毒性机制进行了一定的总结。以期为中药肝毒性研究提供思路,为中药临床安全用药提供保障。     

一种感染后咳嗽动物模型制作方法的建立及评价

目的：评价用小剂量内毒素（LPS）滴鼻诱导慢性吸入纸烟烟雾的大鼠,建立感染后咳嗽（PIC）动物模型的方法。方法：采用随机数字表法将50只SPF级雄性纯白SD大鼠分为空白组、感染后咳嗽模型A组、模型B组、模型C组、模型D组。首先迫使各模型组大鼠慢性吸入纸烟烟雾造成其气道高反应,然后分别用浓度为0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、1mg/mL的LPS溶液滴鼻诱导大鼠气道炎症,最后用辣椒素刺激法创建PIC动物模型。观察大鼠行为变化及咳嗽性质,检测BALF中细胞分类计数,经TP-603T型传感器测定咳嗽反应性;HE染色观察肺组织病理变化。结果：①模型A组与B组大鼠咳嗽频发,且咳嗽动作较典型,其中模型B组更明显。②咳嗽反应性测定：各模型组与空白组相比5min内咳嗽次数均有明显增加（P〈0.001）,但数据分析显示A组、B组更具有统计学差异。③模型A组与B组BALF中白细胞总数、巨噬细胞、中性粒细胞及淋巴细胞比率与空白组相比均有明显差异（P〈0.05）,其中B组差异更显著（P〈0.01）。④病理结果显示模型A组与B组大鼠均出现气道炎症表现,尤以模型B组更为明显,而均未见明显的肺间质炎症和肺泡的融合。结论：用小剂量LPS滴鼻诱导慢性吸入纸烟烟雾的大鼠建立PIC动物模型的方法可使大鼠咳嗽反应性增高,并产生显著的气道炎症改变,而肺实质则无明显炎症表现。     

HPLC-MS-MS法测定大鼠血浆中6种CYP450探针药物及甘草对CYP450酶活性的影响

目的: 建立高效液相色谱-二级质谱联用(HPLC-MS-MS)法同时测定大鼠血浆中6种细胞色素P450(CYP450)探针药物,即非那西丁、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、酒石酸美托洛尔、氯唑沙宗和睾酮,并用于体内评价甘草对CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1,CYP3A4酶活性的影响. 方法: 采用汉邦C₁₈柱(2.0 mm×150 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液(70:30),流速为0.2 mL·min^-1,柱温35℃.电喷雾离子化,检测方式为多反应离子监测.大鼠分为2组,分别ig生理盐水和甘草提取液,连续10 d,于第11天给予大鼠探针药物,用HPLC-MS-MS法测定6种探针药物的血药浓度,并分析比较其药动学参数. 结果: HPLC-MS-MS方法的灵敏度、精密度、回收率及稳定性良好.甘草能明显诱导大鼠体内CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1的活性,抑制 CYP3A4的活性. 结论: 本法简便、准确,适用于甘草或其他药物对CYP450同工酶活性的研究.     

LC-MS/MS分析大鼠口服清清颗粒后血浆中9种成分的药代动力学

目的:建立同时测定大鼠血中9个成分(白芍苷、芍药苷、甘草苷、黄芩苷、盐酸小檗碱、汉黄芩苷、甘草酸、黄芩素、汉黄芩素)含量的方法,并将该方法用于清清颗粒的药代动力学研究。方法:采用Promosil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,流速0.3 m L·min~(-1),柱温35℃;采用正离子模式;分为两段时间检测,前7min只检测白芍苷、芍药苷和甘草苷,8~17 min检测其余化合物。结果:各成分的线性关系良好(r0.998);日间和日内精密度RSD均15%;准确度的相对回收率90.58%~108.67%。9种成分的达峰时间(tmax)依次为(0.25±0),(0.25±0),(0.25±0),(0.25±0),(1.00±0.10),(6.33±0.82),(1.00±0.11),(0.25±0),(3.12±1.15)h,半衰期(t1/2)依次为(0.21±0.02),(6.72±2.10),(2.70±0.36),(6.90±1.55),(5.16±0.95),(4.34±1.02),(4.74±2.52),(4.79±1.48),(5.78±2.41)h,药峰浓度(Cmax)依次为(3.08±0.94),(10.01±2.17),(18.73±2.84),(36.18±7.57),(50.76±10.61),(793.70±214.08),(54.73±18.01),(207.35±27.58),(50.79±5.95)μg·L~(-1)。结论:该方法简便、准确、重复性好,专属性强,可用于清清颗粒的药代动力学研究。     

钩藤散对NIH-3T3细胞衰老模型增殖与凋亡的影响

目的: 观察钩藤散对NIH-3T3细胞衰老模型增殖与凋亡的影响。方法: NIH-3T3细胞接种在含10%胎牛血清的DMEM培养至20代,然后分为年轻、空白、模型3个组,传至30代时, 用H₂O₂处理,β-半乳糖苷酶染色试剂盒染色,观察衰老细胞形态、衰老指征,确认衰老模型是否成功建立;用钩藤散(17,8.5,4.25,2.15 g ·kg^-1)ig SD大鼠,每天2次,连续给药3 d, 于末次ig 1 h后麻醉、腹主动脉采血,制备含药血清;用钩藤散含药血清处理衰老模型,观察衰老细胞形态、衰老指征、增殖与凋亡等指标。结果: 模型组细胞较对照组形态有显著改变,细胞衰老比例明显增加(P<0.05),因此H₂O₂氧化应激方法可成功建立细胞衰老模型;钩藤散含药血清能明显减少细胞形态的改变、改善衰老指征、促进细胞增殖(P<0.01)、降低细胞凋亡(P<0.01),尤其10倍剂量组最为明显。结论: 钩藤散能有效促进细胞增殖,降低细胞凋亡,从而防止衰老。