MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白的制备及其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用

目的：构建MDA-7/IL-24-HT7原核及真核表达质粒,制备MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白,研究该融合蛋白在肿瘤细胞内的定位及其对肿瘤细胞致凋亡作用。方法：PCR扩增MDA-7/IL-24基因,插入含有HaloTag (HT7)标签的载体中,构建MDA-7/IL-24-HT7原核及真核表达质粒;MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白经IPTG诱导表达后纯化。利用带有荧光标记的HT7配基观察MDA-7/IL-24-HT7在肿瘤细胞内的定位。MTT法及AnnexinV-PI染色法检测MDA-7/IL-24-HT7对肿瘤细胞生长和凋亡的影响。结果：成功构建了表达MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白的原核及真核表达质粒,MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白主要存在于E.coli BL21的包涵体内。MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白定位于肿瘤细胞的内质网上。MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白可抑制肿瘤细胞的生长,1 mg/ml MDA-7/IL-24-HT7 融合蛋白作用大肠癌HCT116细胞、肝癌SMMC7721细胞96 h后,细胞凋亡率分别为（34.7±1.3）% 和（22.1±0.9）%,显著高于未处理的肿瘤细胞（P<0.01）。结论：带有HaloTag标签的MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白可抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡。     

二氯化钴对腺病毒基因表达的影响

目的:研究二氯化钴(CoCl2)对缺氧反应元件调控E1AE1B表达的条件复制型腺病毒载体(Ad-5HRE-E1AE1B-RFP)和缺乏缺氧反应元件的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-EGFP)在肿瘤细胞内表达和复制的影响. 方法:肿瘤细胞经不同浓度的CoCl2 处理后,Western 印迹法检测缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达;倒置荧光显微镜、FCM法及空斑形成实验等观察经CoCl2处理后,感染条件复制型腺病毒和(或)复制缺陷型腺病毒的肿瘤细胞中外源基因的表达水平和病毒复制情况;小动物成像仪观察缺氧调控的条件复制型腺病毒在肿瘤内提高复制缺陷型腺病毒表达的效率. 结果:适当浓度的CoCl2 (0.4和0.08 μg/mL) 能使胃癌细胞株(SGC7901)中HIF-1α蛋白稳定表达并积聚,可较好地模拟缺氧状态;在0.4 μg/mL CoCl2作用下,Ad-5HRE-E1AE1B-RFP对肿瘤细胞的感染效率明显提高,表现为外源基因RFP阳性表达的百分率和荧光强度均明显提高,但空斑形成实验显示Ad-5HRE-E1AE1B-RFP并没有复制.0.4 μg/mL CoCl2也能提高其他非缺氧调控的复制缺陷型腺病毒如Ad-EGFP、Ad-Luc的感染效率和表达水平; Ad-5HRE-E1AE1B-RFP与复制缺陷型腺病毒Ad-Luc联合注射裸鼠肿瘤能显著提高Ad-Luc的表达.结论:CoCl2 能明显提高腺病毒的基因表达水平,其作用机制不仅与CoCl2诱导缺氧有关,也可能与影响基因转录有关.     

督导戒烟及肺康复对慢阻肺患者肺功能及戒烟效果的影响

目的研究督导戒烟及肺康复对吸烟慢阻肺患者的作用及临床价值。方法收集2018年6月至2019年8月在昆明市第一人民医院呼吸与危重症医学住院的有长期吸烟史,入组时未戒烟男性慢阻肺患者的年龄、身高等一般资料及肺功能指标。按照顺序原则随机分为对照组(自行意志力戒烟),督导组(督导戒烟,COPD及肺康复知识宣教)。比较两组患者一般资料及肺功能指标(出院1周,半年)的差异及吸烟支数变化。结果两组患者半年后随访,吸烟支数[督导组(11±11.995)支,对照组(17.1±11.784)支],均有下降,差异有统计学意义(P<0.05)。半年后,两组比较,督导组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。FEV1预计值(%)[督导组(71.14±14.077)%,对照组(65.20±14.028)%],督导组上升,差异有统计学意义(P<0.05),对照组下降,差异无统计学意义。半年后,2组比较,督导组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。FEV1[督导组(1.656±0.4708) L,对照组(1.462±0.4637) L],督导组上升,差异无统计学意义(P>0... 更多     

利用鱼刺图分析某院整形美容科合并关闭的原因

整形美容是具有强大生命力的新兴专科，医院在这一市场中应该有很强的竞争力，持续保有稳定的市场占有率不成问题。然而某院却在短短的两三年时间内从开设到被合并关停，与社会上雨后春笋般开放的美容整形机构的发展形成鲜明对比，该专业夭折现象折射出的问题值得深思。     

视网膜母细胞瘤形成机理的研究进展

视网膜母细胞瘤(RB)系婴幼儿最常见的眼内恶性肿瘤,因其发病与遗传和环境因素有关,故一直被视为研究肿瘤遗传学及肿瘤形成机理的理想模式。近年来,不少遗传学和肿瘤学工作者对这方面进行了深入的研究,取得了一些新进展。本文从RB基因的研究进展、酯酶D的研究进展及其与RB的关系、限制性片断长度多态性技术在RB研究中的应用、RB基因及其基因产物的揭示、与RB有关的非随机染色体改变,以及RB形成理论及其实验证据等方面,简要进行综述。     

河南省华枝睾吸虫病流行病学调查

目的了解河南省华枝睾吸虫病流行现状及相关的流行因素. 方法采用改良加藤粪检法检查,并以病例对照匹配问卷对相关性流行因素进行调查. 结果 2000年河南省共在17个县（市）51个调查点,调查25 894人,检出华枝睾吸虫卵阳性者23人,阳性率为0.09%,华枝睾吸虫卵计数平均为35个/g.以县为单位阳性率最高为平舆0.86%（13/1 513）,年龄35～39岁组阳性率0.42%和家庭妇女组阳性率1.64%为各分组最高. 结论河南省华枝睾吸虫病防治效果非常明显,感染率和感染度均控制在较低水平.但流行区扩大和感染方式改变,对预防控制华枝睾吸虫病的流行提出了新的挑战.     

运用团队资源管理模式提升新型布尼亚病毒感染患者急救品质

目的 探讨团队资源管理模式在新型布尼亚病毒感染患者救护中的应用效果。方法 选取2017年1—12月采用传统救治模式救护的23例发热伴血小板减少综合征患者为对照组,2018年1—12月运用团队资源管理模式救护的39例发热伴血小板减少综合征患者为观察组。比较2组患者的预检分诊准确率、急诊滞留时间、抢救成功率以及干预前后急诊医护人员安全态度。结果 观察组预检分诊准确率及抢救成功率明显高于对照组,急诊滞留时间显著低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;干预后急诊医护人员安全态度6个维度的得分及总分高于干预前,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 基于团队资源管理模式对发热伴血小板减少综合征患者进行救护的实践,缩短了急诊滞留时间,提高了预检分诊准确率及抢救成功率,同时提升了急诊医护人员安全态度,保障了患者安全。     

河南省基本消除丝虫病后残存微丝蚴血症者传播作用的研究

目的探讨基本消除丝虫病后残存微丝蚴血症者在不采取任何病原防治措施下的传播作用. 方法选择柘城县张庄村为观察点,病原学监测和蚊媒监测采取常规方法,血清学检测采用IFAT、ELISA、Dot-ELISA（查抗体）和ICT（查循环抗原）方法,同时进行居民防蚊情况调查. 结果 1990年残存微丝蚴血症者39人,人群微丝蚴率2.01%（39/2040）,2000年微丝蚴血症者全部转阴,人群微丝蚴率降为0;1990、1991和1994年检测人群丝虫抗体阳性率和抗体阳性者的几何平均滴度均逐渐下降,1998年检测92名12岁以下儿童血中丝虫循环抗原均为阴性;淡色库蚊幼丝虫自然感染率逐年下降,自1997年未再发现感染蚊;1990～2002年当地居民经济收人逐渐增加,普遍采取防蚊措施. 结论基本消除丝虫病后,随居民经济和文化水平的逐渐提高,防病意识的不断增强以及防蚊措施的加强,即使未采取任何干预措施,残存微丝蚴血症者也不能引发丝虫病流行,丝虫病传播已经被阻断.