慢性髓细胞白血病异基因外周血联合骨髓造血干细胞移植后NK细胞及受体谱重建的研究

目的 观察慢性髓细胞白血病(CML)患者进行异基因外周血联合骨髓造血干细胞移植(allo-PBSCT+BMT)后NK细胞及其受体谱重建的规律.方法 11例CML患者采用同胞异基因HLA6/6位点相合的allo-PBSCT+BMT,使用流式细胞术检测移植后受者不同时问的NK细胞及其受体谱的变化和重建的规律.结果 NK细胞在早期造血重建时就开始重建并很快达到正常值水平,移植30 d NK细胞绝对值达到高峰.约占淋巴细胞的(37.1±7.06)%,后逐渐下降,移植120 d比例基本正常.植入时CD3-CD56bright细胞占淋巴细胞的(3.6±1.25)%,移植30 d时CD3-CD56bright细胞短暂上升,占淋巴细胞的(8.3±4.13)%左右.移植60 d CD3- CD56bright细胞基本稳定在正常水平.CD94在移植后1年始终处于高水平,NKG2A在植入时占淋巴细胞的(90.3±5.35)%,移植60 d后下降到(45.8±12.36)%,而NKG2D迅速由植入时的(36.7±14.33)%上升到移植60 d的(82.3±8.64)%,NKP46在移植30-90 d下降较快.CD158a、CD158b植入时表达较低,CD158b逐渐上升,移植60 d达到淋巴细胞的(58.5±6.58)%.CD158a始终在低水平.结论 相对于其他移植方式,allo-PBSCT+BMT后NK细胞比例可能略少,但是成熟较早,可能发挥重要的移植物抗白血病效应及诱导免疫耐受作用.     

人类肿瘤表达细胞因子基因的临床意义

目的:探讨IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-13和IFNγ在肿瘤发生发展及治疗诊断中作用。方法:用RTPCR技术或RNA点杂交技术检测183份肿瘤细胞或肿瘤组织中上述6种细胞因子的基因表达状况。结果:在183份不同的肿瘤细胞或组织中Th2类细胞因子的表达显著增加,其中IL-4,IL-6,IL-10和IL-13的表达率达65％,70.5％,83.6％和61.7％,而Th1类细胞因子IFNγ和IL-2的表达率仅达12.6％和22.9％。结论:Th1/Th2漂移与肿瘤的发生发展密切相关,有可能造成机体的免疫抑制,有利于肿瘤细胞的免疫逃逸。     

实时、动态和四维化的免疫学――评2006年全美免疫学家大会

2006年全美免疫学家年会于5月12～16日在波士顿举行，来自全美及世界各地的数千名免疫学工作者参加了会议。会议以主席报告、重要演讲、主要论坛、获奖演说等多种形式向与会者展示了近1年来免疫学的研究成果，加拿大和墨西哥的国家免疫学会分别举办和主持了自己的分会场。与往届会议一样，本次会议分会场较多，壁报内容丰富，很难把握会议的全部内容。总体感觉是通过各种电子媒介能实时了解研究进展，通过各种成像技术能动态观察免疫细胞的变化，通过各种生物定量技术能精确得到数字化的实验结果。笔者3人作为唯一参会的中方小组有幸与会，感触颇多，选择以下几个侧面反映近1年来免疫学的某些主要进展。     

人喉癌下咽癌组织中转化生长因子β1基因的检测

目的 :检测喉癌下咽癌组织中转化生长因子 β1(TGF β1)mRNA的表达 ,探讨其在喉癌、下咽癌发生发展中的可能作用。方法 :取 2 0例喉癌、下咽癌患者术后新鲜组织标本 ,用半定量的逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测TGF β1的mRNA表达。结果 :检测 2 0例标本 ,其中 17例TGF β1表达阳性 ,且Ⅲ～Ⅳ期表达较Ⅰ～Ⅱ期强。结论 :TGF β1在喉癌、下咽癌中的表达可能是导致喉癌、下咽癌患者免疫功能低下 ,促进肿瘤生长的原因之一     

人白细胞介素-18基因克隆、重组表达及活性测定

白细胞介素 18（ Interleukin 18, IL-18）是单核巨噬细胞系统分泌的重要的 Th1类细胞因子,对 NK细胞的成熟、活化起到重要的调节作用,可以与 IL-12协同增强 NK细胞及 Th1细胞的细胞毒活性,并在细胞免疫的启动过程中起到重要作用。 IL-18基因缺陷鼠的细胞免疫不能被启动, NK细胞的体外活化能力明显下降。小鼠体内外实验显示 IL-18具有较显著的抗肿瘤效应。 IL-18为相对分子质量 18 500的单链活性蛋白,没有 N-糖基化位点,不形成链内二硫键,适于在大肠杆菌（ E.coli）中表达。本实验根据 IL-18成熟蛋白的 cDNA序列,设计引…     

拓扑特肯治疗成人原发恶性胶质瘤

尽管对恶性胶质瘤采取了手术＋放疗＋化疗等综合治疗措施,但效果不佳,总的平均生存时间只有８～１２个月,过去常用的ＢＣＮＵ或ＰＣＶ三联药物（丙卡巴肼＋ＣＣＮＵ＋长春新碱）化疗效果也难以令人满意。作者报告了使用拓扑特肯治疗成人原发或复发恶性胶质瘤的Ⅱ期临床试验结果。拓扑特肯是一种半合成的喜树碱类似物,为特异性拓扑异构酶Ⅰ抑制剂,包装剂型为冻干淡黄色粉剂,包括拓扑特肯４ｍｇ、甘露醇４８ｍｇ、酒石酸２０ｍｇ,使用时溶于４ｍｌ无菌注射用水。实验选择了３８例复发病人,其中多形性胶质母细胞瘤（ＧＢＭ）２８例,星…     

IL-2促进PBMC来源的NK、NKT、CD8+T细胞高表达NKG2D

目的 观察大剂量IL-2活化的人外周血单个核细胞（PBMC）中，NKG2D在NK细胞、T细胞和NKT细胞表面的表达规律。方法 使用三重免疫荧光标记的流式细胞术检测NKG2D的表达情况。使用sMICA蛋白与人PBMC共同培养，之后使用流式细胞术分析NKG2D在NK细胞中的表达情况。使用半定量RT-PCR方法检测大剂量IL-2活化的人PBMC中NKG2D及其锚定蛋白DAP10 mRNA的表达变化。结果 使用大剂量IL-2活化人PBMC细胞后，NKG2D在NK细胞、CD^＋T细胞和NKT细胞表面的表达均增加，但是在CD4^＋T细胞表面始终不表达。同时IL-2可以拮抗sMICA对NKG2D的下调作用。半定量RT-PCR结果显示，使用大剂量IL-2活化人PBMC之后，NKG2D及其锚定蛋白DAP10的mRNA水平并不发生明显变化。结论 大剂量IL-2培养人PBMC之后，NKG2D在NK细胞、CD8^＋T细胞和NKT细胞表面的表达均增加，可能是PBMC活化并获得广谱抗肿瘤效应的机制之一．     

H CM V 兔胚肺细胞体外感染模型的建立

为探讨人巨细胞病毒（ＨｕｍａｎＣｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ,ＨＣＭＷ）ＡＤ１６９毒株体外感染兔胚肺细胞（ＲａｂｂｉｔＥｍｂｒｙｏＬｕｎｇｃｅｌ,ＲＥＬ）的敏感性,建立ＨＣＭＶＡＤ１６９毒株感染模型,将ＨＣＭＶＡＤ１６９毒株定量接种于ＲＥＬ,观察细胞病理变化;用单克隆抗体－免疫组化方法检测细胞内ＨＣＭＶ抗原;电镜检测细胞内病毒颗粒,用ＥＬＩＳＡ方法检测经ＲＥＬ增殖病毒培养物ＨＣＭＶ抗原滴度,用人胚肺细胞（ＨｕｍａｎＥｍｂｒｙｏＬｕｎｇｃｅｌ,ＨＥＬ）滴定病毒毒力变化。结果表明,接种病毒后,ＲＥＬ于４８ｈ出现细胞肿胀,胞浆内出现折光性颗粒,逐渐变圆、脱落,其病变特征与该病毒在ＨＥＬ增殖出现的病变一致;用免疫组化法在胞浆及其核内查到ＨＣＭＶ抗原;用透射电镜观察,在细胞核内查到大量病毒颗粒;用ＥＬＩＳＡ方法在ＲＥＬ病毒培养物中查到ＨＣＭＶ抗原,抗原滴度与ＨＥＬ增殖的病毒一致;与ＨＥＬ增殖物比较,经ＲＥＬ增殖的病毒培养物毒力降低１００ＴＣＩＤ５０。表明ＲＥＬ是ＨＣＭＶＡＤ１６９毒株的敏感宿主细胞。