微小RNA-1慢病毒载体介导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的研究

目的通过微小RNA-1(microRNA-1,miR-1)慢病毒载体转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSC),探讨miR-1对MSC向心肌细胞分化的影响。方法采用全骨髓贴壁培养法分离培养大鼠MSC并进行流式细胞学鉴定;构建表达miR-1慢病毒载体;将miR-1慢病毒载体转染大鼠MSC(MSCmiR-1)连续培养15d,光镜下观察转染后细胞形态,分别于0、4、6、15dqRT-PCR检测miR-1、心肌相关基因锌指结构蛋白(GATA-4)、肌钙蛋白I(cTnI)、α肌动蛋白(α-actin)的表达;免疫荧光观察cTnI的表达;Western blot检测α-actin的表达。结果原代大鼠MSC呈长梭形、漩涡状生长,流式细胞学检测显示,98%以上细胞表达CD44和CD29,不足1%细胞表达CD45;成功构建miR-1重组慢病毒载体,病毒滴度为3×108 TU/μl;转导miR-1后,MSCmiR-1高表达心肌特异性相关基因GATA-4、α-actin、cTnI,并随时间逐渐增强,转染4d免疫荧光检测可见cTnI在部分MSCmiR-1中表达,于15d时表达最强,Westernblot进一步证实了α-actin在MSCmiR-1中表达。结论转导miR-1至大鼠MSC中可促使其向心肌样细胞的分化。     

下腔静脉滤器置放、保留导管内溶栓治疗下腔静脉并下肢深静脉血栓形成

患者,4d前女性,43岁,外伤后右股骨骨折卧床1月,逐渐出现下肢、外阴肿胀,进行性加重.B超示左股静脉、左骼静脉血栓形成.人院时左下肢皮肤瘀紫,凹陷性水肿,活动受限,外阴部水肿.人院后行左下肢静脉顺行造影及右股静脉穿刺送入5FCobra导管行左股静脉、左髂静脉及下腔静脉逆行造影.确认双肾静脉开口,肝静脉开口位置,及下腔血栓静脉近心端,放置下腔静脉滤器于血栓近心端上方.导管分段逐部向血栓远端送人,保留导管内溶栓72h,造影.溶栓前造影显示患者左下肢静脉完全闭塞,左股静脉、左骼静脉严重狭窄内有大量血栓,下腔静脉血流滞缓,管腔内充满大量血栓一直延续至L1水平.肾静脉开口于L1水平以下0.5cm,肝静脉开口于T9水平.     

骨髓间充质干细胞与细胞心肌成形术的研究进展

通常认为哺乳动物心肌细胞是终末分化细胞，不能再生。心肌细胞坏死后．心脏纤维组织增生，心室重塑，心功能下降，最终发展成慢性心力衰竭。再灌注治疗，不能修复及逆转已坏死的心肌细胞，慢性心衰患的远期生存率低，预后差。     

诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化及相关信号通路的研究进展

骨髓间充质干细胞具有自我更新、增殖及多向分化的特点,在体外可通过5-氮胞苷、共培养等多种途径诱导分化为心肌样细胞。相关研究表明,Notch、W nt等信号通路在这一过程中发挥着重要作用。     

血管内反推力牵引法取出起搏器电极导管治疗起搏器系统感染的评价

随着置入性起搏器和埋藏式心律转复除颤器在临床广泛应用,导线感染、断裂等严重并发症的根本处理方法是将整根导线取出体外.     

人类心肌匀浆上清液对骨髓间充质干细胞诱导分化及相关基因时序表达的影响

背景：大量有关动物的体内外研究表明，骨髓间充质干细胞在心肌微环境或模拟心肌微环境的作用下可分化为心肌细胞。然而，类似的人类研究报道较少，同时相关的分化机制也不甚清楚。 目的：探讨人类心肌匀浆上清液对骨髓间充质干细胞诱导分化的影响及相关基因的时序表达。 方法：体外分离培养人类骨髓间充质干细胞，传至第4代加入自体心肌匀浆上清液诱导骨髓间充质干细胞，持续作用2周。相差显微镜下观察骨髓间充质干细胞形态变化，免疫荧光方法鉴定心肌特征性肌动蛋白α和肌钙蛋白的表达，应用半定量RT-PCR技术分析Nkx-2.5、GATA-4、MEF-2C、α-MHC、肌钙蛋白等相关基因在分化过程中的动态时序表达。 结果与结论：经心肌匀浆上清液诱导后，骨髓间充质干细胞体积变大，立体感增强，形态近似棒状。诱导2周时肌动蛋白α及肌钙蛋白阳性细胞比例分别为25.53%和23.48%。Nkx-2.5、GATA-4、MEF-2C基因在诱导后3 d表达开始增强, 其中GATA-4、MEF-2C诱导后5 d达高峰,以后维持在较高水平，Nkx-2.5则随诱导时间逐渐增强；α-MHC、肌钙蛋白基因诱导前无表达，于诱导第3天出现表达，以后维持在高水平。结果提示，心肌匀浆上清液对骨髓间充质干细胞具有定向诱导作用，在此过程中，伴随着Nkx-2.5、GATA-4、MEF-2C、α-MHC和肌钙蛋白基因的时序表达变化。     

脂蛋白a与冠状动脉支架术后再狭窄的相关性研究

目的:探讨血清脂蛋白(a)[Lp(a)]水平与冠状动脉支架置入术后支架内再狭窄的关系. 方法:检测152例行经皮球囊冠状动脉成形术加支架置入术的患者Lp(a)水平并调查其一般临床资料,术后行冠状动脉造影随访.采用Logistic多因素逐步回归分析.结果:Logistic多因素逐步回归分析显示,Lp(a)升高是支架术后支架内再狭窄发生的独立危险因素,P=0.036,其RR为2.648,95%可信区间为1.066～6.575.其他因素如吸烟、糖尿病、支架类型在再狭窄与正常组间也存在明显区别,差异有统计学意义,与支架内再狭窄发生有关. 结论:Lp(a)水平升高是发生冠状动脉支架术后再狭窄的独立危险预测因素.     

室上性心动过速的射频消融术和自制鞘的应用效果

目的　探讨射频消融术治疗室上性心动过速 (SVT)及术中加用自制鞘的临床效果。方法　 82例SVT患者 ,其中房室旁路折返性心动过速 6 8例 ,房室结折返性心动过速 14例。有 8例房室旁路和 1例房室结双径路术中应用了自制鞘 ,11例显性预激加用了单极电图。结果　 (1) 82例患者中 ,81例成功 ,其中 6 7例房室旁路 ,14例房室结双经路 ,1例房室结双经路出现三度房室传导阻滞 ,成功率为 98 8%。 (2 ) 9例应用自制鞘患者中 ,5例用于左侧旁路与常规射频消融术方法相比 ,3例用于右侧旁路 ,1例用于房室结双经路。与常规RFCA方法相比 ,术中应用自制鞘可显著缩短操作过程、X线投照时间明显缩短 ,减少无效放电次数。 (3)术中应用单极电图可使靶点更清楚。结论　射频消融术治疗SVT确有很高的成功率 ,术中加用自制鞘使大头电极与组织贴靠更稳定、更紧密 ,使成功率进一步提高 ,减少并发症 ,缩短操作及X线曝光时间 ,单数电图的应用使靶点更明确。