海南岛按蚊的鉴定和迷走按蚊的进化研究

目的 阐明海南岛某些按蚊的分类地位,探讨迷走按蚊与其近缘种的亲缘关系. 方法 对采自海南岛8个地点的按蚊依据形态和分子特征进行鉴别研究,应用的分子特征包括核糖体DNA(ribosomal DNA,rDNA)第2内转录间隔区(second internal transcribed spacer,ITS2)和28S第3编码区(third domain,D3)序列,综合分析迷走按蚊及其近缘种的ITS2和D3序列,构建系统发育树. 结果 本研究共鉴定按蚊407只,其中84.9％的成蚊分子鉴定与依据形态鉴定的结果一致.在228条迷走按蚊的ITS2序列中,部分个体在2个位点存在单碱基套峰(G/A),出现的频率分别为57.9％、64.8％,同时有两个套峰的占样本数的57.0％,其他位点保守.迷走按蚊的D3序列,在种内无碱基差异.结合本研究和文献的迷走按蚊及其近缘种ITS2序列构建的ML树,显示迷走按蚊与浅色按蚊MC/D亲缘关系近,与另一支的浅色按蚊B、圣代克按蚊复合体的亲缘关系较远.关于未订名种NBC (Anophelessp.NBG)的分类地位,依据分子特征鉴定其为浅色按蚊B,可能是圣代克按蚊复合体新的成员种.结论 鉴定形态在个体间变异大的种类时,客观的分子特征更具重要性,迷走按蚊与浅色按蚊MC/D具较近的亲缘关系.     

我国微小按蚊A、C的形态和染色体核型研究

目的对微小按蚊A、C的形态和有丝分裂期染色体核型进行比较研究,观察并筛选具有鉴别意义的特征。方法将现场采集后经形态学鉴别初步认定为微小按蚊的样本带回实验室单管饲养,待其产卵后,经多重PCR方法鉴别为微小按蚊A或C。子代羽化后的成蚊标本使用解剖镜、光学显微镜和扫描电镜进行形态学观察和比较。取子一代四龄幼虫的脑神经节制作染色体核型,吉氏染色,显微镜下观察。结果微小按蚊A和C的形态学差异主要表现为是否存在膊白斑（HP）、V2．1白斑及喙腹面白斑,尤其是V2．1白斑和喙腹面白斑,微小按蚊A不出现或出现率极低,微小按蚊C则有很高的出现率,具有稳定差异。光学显微镜和扫描电镜下微小按蚊A、C翅前缘脉、V2．1及翅燧处鳞片及翅目上小钩均未见差异。微小按蚊A、C的常染色体着丝点指数和相对长度均无明显差异,性染色体均为近中着丝粒核型,但略有不同。结论我国微小按蚊A、C的形态和染色体核型均存在一定的差异。     

雷氏按蚊多态微卫星DNA位点的筛选和特征

本研究对雷氏按蚊的微卫星DNA序列进行了分离,并筛选了其中具有多态性的微卫星位点.应用雷氏按蚊基因组DNA的酶切片段与生物素标记的寡核苷酸探针杂交,亲合素富集和超滤离心浓缩目的片段,扩增放大后克隆并测序,获得雷氏按蚊微卫星DNA序列.在其中挑选合适的微卫星位点,建立扩增体系.应用雷氏按蚊现场样本对不同的微卫星DNA进行扩增,聚丙烯酰胺凝胶电泳筛选具有多态性的位点.本研究结果获得了雷氏按蚊微卫星DNA序列58条,GenBank注册登记号为EF620299～EF620356.其中,完整序列41条,占70.7%;非完整序列7条,占12.1%,复合序列9条,占15.7%;仅1条为非典型序列.电泳结果显示其中14个微卫星位点中有11个具有多态性.     

海南省三沙市永兴岛和赵述岛鼠形动物及其携带病原调查

目的 了解海南省三沙市所属南海重要岛屿永兴岛和赵述岛特殊环境中的鼠形动物带毒情况,对寨卡病毒、基孔肯雅病毒和肾综合征汉坦病毒流行的风险进行评估,为当地政府和卫生部门制定综合防控技术方案提供科学依据。方法 于2017年8月及2017年12月分两次利用鼠笼法和陷阱法捕捉三沙市永兴岛和赵述岛鼠形动物,解剖并采集肺、肾、肝、脾和心脏血标本,用实时荧光PCR的方法检测上述三种病毒的核酸。结果 共捕获鼠型动物76只,其中鼠笼法捕获60只,陷阱法捕获16只,隶属2科4种,鼩鼱居多占36.67%、黄胸鼠占35.00%、褐家鼠占26.67%及小家鼠占1.67%。采集肺、肾、肝和脾标本合计76份、心脏血标本52份,因其中10份溶血严重,故仅对其余42份血进行检测。用鼠脏器标本及心脏血标本提取的RNA为模板进行实时荧光PCR检测,均未检出寨卡病毒、基孔肯雅病毒和肾综合征汉坦病毒。结论 永兴岛和赵述岛上鼠形动物传播寨卡病毒、基孔肯雅病毒、和肾综合征汉坦病毒的风险不大。     

分子生物学技术在蚊虫近缘种鉴别中的研究进展

长期以来，蚊虫的分类鉴定工作主要是以蚊成虫、幼虫、卵及蛹等外部形态为依据进行的，已形成其传统分类体系。但随着研究工作的深入，现用形态分类方法已不能适应蚊虫复合体近缘种等鉴别的需要。近年来，遗传杂交技术、酶谱技术、化学仪器分析技术以及分子生物学技术的不...     

中华白蛉微卫星DNA序列的分离和多态位点筛选的初步研究

目的 分离中华白蛉的微卫星DNA序列,并筛选其中具有多态性的位点。 方法 应用中华白蛉基因组DNA的酶切片段与生物素标记的寡核苷酸探针（AAT）₁₇、（GA）₂₅、（CCT）₁₇和（TG）₁₈杂交,亲合素富集和超滤离心浓缩目的片段,扩增放大后克隆并测序,构建中华白蛉微卫星DNA库。挑选合适的微卫星位点,建立PCR扩增体系。应用中华白蛉现场标本对不同的微卫星DNA进行扩增,聚丙烯酰胺凝胶电泳筛选具有多态性的位点。 结果 本研究分离中华白蛉微卫星DNA的方法效率高,重组克隆阳性率为78.6%。构建的微卫星DNA库含有118条序列,GenBank登录号为FJ919812～FJ919932（登录号为FJ919833、FJ919836和FJ919869除外）,其中典型微卫星DNA序列72条（占61.0%）,非典型序列46条。在构建的中华白蛉微卫星DNA库中选择22个位点进行多态性筛选,电泳结果显示14个为多态位点,双核苷酸重复的位点比三核苷酸和多核苷酸重复位点的多态性高。 结论 首次构建了含有118条序列的中华白蛉微卫星DNA库,共获得14个新的多态微卫星位点。     

利用ssr标记浅析云南登革热重点地区埃及伊蚊种群遗传特征

目的 通过研究云南省不同地理来源的埃及伊蚊自然种群遗传结构,探究不同群体间的遗传特征与联系.方法 捕获景洪、勐腊、勐海、耿马、瑞丽的埃及伊蚊,提取DNA并采用12对荧光标记的微卫星引物进行PCR扩增,用毛细管电泳检测扩增片段,分析5个埃及伊蚊自然种群的遗传相关指标.结果 在5个采集点共采集234个有伊蚊幼虫的容器,采集...     

树立“脑心同治”观念 助力脑心共病诊断与治疗发展

脑心共病是我国重大公共卫生问题之一,严重威胁国民健康。历经多年探索,“脑心同治”理论越来越丰富,“脑心同治”观念越来越深入人心。本文概述脑与心脏相互作用的病理生理学机制、“脑心同治”理论的临床实践和研究及其未来发展方向,有助于临床医师树立“脑心同治”观念,共同助力脑心共病诊断与治疗发展。     

应用PCR-RFLP鉴别非洲和亚洲的主要传疟媒介催命按蚊种团和微小按蚊种团[英]／Garros C，Koekemoer LL，Kamau L，etal／／Am J Trop Med Hyg

所有生物学特性的研究必须在其相应物种精确鉴定的基础上进行，尤其是在虫媒病研究中，正确和精确的物种鉴别具有重要的医学和现实意义。非洲的催命按蚊(A．funestus)和亚洲的微小按蚊亲缘关系很近，但地理分布存在隔离。催命按蚊种团由8种组成，除催命按蚊嗜吸人血、家栖，为高效的传疟媒介外，其他种类均嗜吸动物血；同样在亚洲，微小按蚊种团由9种组成，其中微小按蚊(广义)是当地主要的传疟媒介之一。     

山东省赫坎按蚊复合体成员种的分子鉴别研究

目的 进一步确认山东省赫坎按蚊复合体成员种。方法 采用鉴别PCR方法,对采自山东省8个地点经形态学初步鉴定的645只蚊虫进行检测,并对已检测的标本随机抽取数个样本,进行rDNA-ITS2序列测定。结果 645份样本中,中华按蚊占90.85％(586/645)、雷氏按蚊占5.27％(34/645),无扩增条带的标本占3.88％(25/645)。测定已鉴别的山东省中华按蚊、雷氏按蚊的ITS2序列长度分别为469bp和451hp,经Blast比对分析,显示与已公布的序列完全相同;3份无扩增条带标本的序列经核对为库蚊。结论 山东省分布的赫坎按蚊复合体成员种主要为中华按蚊、雷氏按蚊,其它成员种有待进一步证实。