灵芝酸对痫样放电海马神经元ERK1/2磷酸化水平的影响

目的：探讨灵芝酸对癫痫样放电海马神经元ERK1/2磷酸化水平的影响。方法：以24h内新生Wistar大鼠为细胞源,用Neurobasal培养液培养海马神经元。①应用激光共聚焦显微镜检测培养神经元的纯度及其鉴定。②应用MTT法测灵芝酸的最适无毒浓度。③在研究最大无毒浓度的灵芝酸对痫样放电海马神经元ERK1/2磷酸化水平影响的实验中,将细胞随机分为：①正常对照组：将培养至第9天的海马神经元全液换成正常细胞外液处理3h,然后恢复正常培养3h后取材;②模型组：将培养至第9天的海马神经元全液换成无镁细胞外液处理3h,然后恢复正常培养3h后取材;③治疗组：将培养至第9天的海马神经元根据灵芝酸浓度不同,分为低、中、高三个浓度组（浓度分别为20μg/mL、80μg/mL、320μg/mL）,将各组的维持培养液全液换成无镁细胞外液处理3h,然后全液换成维持培养液配制不同浓度灵芝酸混悬液处理3h后取材。ELISA方法检测ERK1/2磷酸化水平的表达。结果：成功离体培养海马神经元,并用酶联免疫分析ERK1/2磷酸化水平的表达。各实验组中均有ERK1/2的表达并且各治疗组均能降低ERK1/2磷酸化水平,浓度为80μg/mL时结果最明显。结论：海马神经元癫痫样放电后ERK1/2被激活,在有效浓度的灵芝酸能显著抑制此反应中ERK1/2的磷酸化水平。     

实验性2型糖尿病大鼠心肌线粒体的氧自由基损伤

目的:研究糖尿病大鼠心肌线粒体氧自由基异常的机制。方法:测定正常对照组和链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病大鼠心肌线粒体中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、细胞色素C(Cyt-C)和线粒体钙含量及超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)活性,并用透射电镜观察病理学改变。结果:模型组心肌线粒体NO、NOS、MDA、钙和胞浆细胞色素C均显著高于对照组(P0.05);线粒体细胞色素C和SOD均显著低于对照组(P0.05)。电镜下,模型组肌原纤维排列紊乱,部分融解消失,线粒体肿胀变性,数目增多。结论:氧自由基异常及脂质过氧化作用参与糖尿病心肌的线粒体损伤;Cyt-C和线粒体钙的改变也是糖尿病心肌线粒体损伤的因素。     

甜菜碱对戊四氮致痫大鼠海马GFAP、甘氨酸和甘氨酸受体表达的影响

 目的：研究甜菜碱对癫痫大鼠海马胶质细胞原纤维酸性蛋白（GFAP）、甘氨酸(Gly)及甘氨酸受体(GlyR)表达的影响。方法：将健康雄性Wistar大鼠随机分为：正常对照组（腹腔注射生理盐水,1.0 mL生理盐水灌胃);癫痫组（腹腔注射戊四氮,1.0 mL生理盐水灌胃）;甜菜碱高、中、低浓度组（腹腔注射戊四氮,甜菜碱灌胃）;丙戊酸钠组（腹腔注射戊四氮,丙戊酸钠灌胃）。实验结束后大鼠眼眶取血检测血清中同型半胱氨酸的含量;在低温条件下迅速取脑组织,分析Gly含量的变化,免疫荧光检测GFAP的水平,兔疫荧光和Western bloting检测海马区GlyR表达的变化。结果：各组大鼠大发作潜伏期无显著差异(P＞0.05),但是甜菜碱治疗组较癫痫组的首次大发作持续时间显著缩短(P<0.01)。癫痫组同型半胱氨酸的含量与正常组比较显著降低（P<0.01）,甜菜碱高、低浓度组同型半胱氨酸含量与癫痫组比较明显降低（P<0.05）。癫痫组甘氨酸的含量与正常对照组相比显著下降（P<0.01）。甜菜碱高、中、低浓度组甘氨酸的含量与癫痫组比较显著增高（P<0.01）。免疫荧光检测GFAP结果,癫痫组与正常组比较显著增高（P<0.01）,而甜菜碱高中低浓度与癫痫组相比显著降低（P<0.01）。免疫荧光与Western bloting检测GlyR结果,癫痫组GluR的表达与正常对照组相比显著降低（P<0.01）,甜菜碱高、中、浓度组较癫痫组显著升高（P<0.01）。结论：甜菜碱具有较好的抗癫痫作用。     

山楂叶总黄酮对糖尿病大鼠视网膜中muller细胞功能的影响

2型糖尿病亦称非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM),主要特征是胰岛素作用不足或胰岛素抵抗从而血糖升高.糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病患者微血管改变在眼部的表现.糖尿病造成眼部的改变体现在多方面,而视网膜病变对患者的影响最大,它也成为导致糖尿病患者失明的一个主要方面[1].Muller细胞是脊椎动物视网膜内最主要的神经胶质细胞.它贯穿整个视网膜,对视网膜起着支撑、营养等重要作用.Muller细胞的结构及功能发生变化在DR中起到重要作用[2].本研究通过激光共聚焦技术观察山楂叶总黄酮(Hawthorn Leaves Flavonoids,HLF)对Muller细胞以及谷氨酰胺合成酶活性的影响,希望为DR的治疗提供理论依据.     

灵芝酸对锂-匹鲁卡品致痫大鼠海马神经元的保护作用

目的观察灵芝酸对氯化锂-匹鲁卡品致痫大鼠海马神经元p-Akt、Akt蛋白表达的影响,并通过应用wortmannin阻断PI3K/Akt通路,探讨灵芝酸是否具有抗癫痫作用及其作用机制。方法选取雄性SD大鼠50只,随机分为5组(n=10),A组:生理盐水对照组,B组:癫痫模型组,C组:灵芝酸干预组,D组:wortmannin抑制剂组,E组:二甲基亚砜(DMSO)对照组。每组给予相应药后,对大鼠进行行为学观察、HE染色法检测海马神经元细胞形态学变化,免疫组化法检测各组大鼠海马区p-Akt、Akt蛋白表达。结果与A组相比,B、C、D、E组p-Akt、Akt的表达量相对较高(P0.01);灵芝酸干预后,C、D、E组p-Akt、Akt的表达量明显比B组增高(P0.05);PI3K/Akt通路被阻断后,C、E两组p-Akt、Akt的表达量明显比D组增高(P0.05)。结论灵芝酸对海马神经元具有一定的保护作用,并且其机制与PI3K/Akt通路的活化并影响其下游蛋白的表达有关。     

中远红外线对荷瘤鼠免疫功能的影响

近年来,各国医学家们在实验和临床研究做的大量工作证明,中远红外线可治愈或延长癌症病人的生命。本实验通过中远红外线对荷瘤（S-180和H-22肝癌）小鼠的照射,测定小鼠的非特异性与特异性免疫的功能状态,探讨中远红外线具有提高机体免疫功能作用的程度。     

戊四氮致癫痫大鼠肝损伤的电镜观察

戊四氮慢性点燃模型适合于对癫痫病理、传播机制和癫痫灶形成机制以及筛选抗癫痫药物的研究，但是在致癫痫的过程中，是否对其它脏器有损害，人们对这点关注不多，有人在光镜下观察了戊四氮致痫后大鼠的肝肾损伤，本研究拟在电镜下观察戊四氮致痫后大鼠肝脏超微结构的变化。     

实验性精索静脉曲张诱导青春期大鼠附睾细胞凋亡的研究

目的：研究实验性精索静脉曲张（EVC）大鼠附睾细胞凋亡及其显微、超微结构的变化。 方法： 采用青春期雄性Wistar大鼠复制左精索静脉曲张模型，以末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡,常规制作附睾体部光镜、电镜标本，观察附睾组织细胞形态变化。 结果： 实验组（VG）细胞凋亡率显著高于假手术组（SOG）（P<0.01），实验组左、右侧细胞凋亡率有差别，但无显著意义（P>0.05）。光镜下主要改变有附睾管萎缩，上皮细胞出现空泡化，上皮内晕、亮细胞数明显增多。电镜下主要表现为主细胞内溶酶体增多、变大，残余小体增加，内质网扩张，线粒体嵴模糊，高尔基复合体空泡化；核染色质致密，形成大小不等的团块，边集于核膜处；上皮细胞游离面微绒毛稀少，可见局灶性断裂和破坏。 结论： 青春期大鼠实验性精索静脉曲张可致附睾组织细胞凋亡过度，使其显微及超微结构明显改变，这些变化可能是影响精索静脉曲张患者生育能力的机制之一。     

灵芝孢子对2型糖尿病大鼠附睾组织形态影响的研究

糖尿病（DM）是一种多器官、多组织受累的代谢性疾病。其勃起功能障碍的发病率可达35％～50％，病程超过5年的患者可高达75％，但其发病机制并不完全清楚。同时，临床研究表明．DM不仅可以影响勃起功能，还可以涉及到射精和生殖系统．引起逆行射精和男性不育。附睾是精于运输、储存和成熟的场所．它在男性生殖活动中具有十分重要的作用。本实验通过建立糖尿病大鼠模型，检测青春期糖尿病大鼠附睾细胞重量、形态变化及灵芝孢子对其影响。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠海马区TNF-α、ET-1影响的研究

目的：观察和探讨灵芝孢子粉对戊四氮（PTZ）致痫大鼠海马区肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、内皮素-1（ET-1）含量变化的影响。方法：用亚惊厥刑量的戊四氮（PTZ）复制慢性癫痫模型,用药组以灵芝孢子粉灌胃,记录癫痫发作的级别及潜伏期,并采用放射免疫法检测各组海马区TNF—α、ET-1的含量。结果：癫痫模型组与正常对照组相比,TNF—α、ET-1的含量明显增高（P〈0．01）;灵芝孢子粉组与癫痫模型组相比,造模第17、21、25天时癫痫发作的潜伏期二者差异有显著性（分别为P〈0．05;P〈0．05;P〈0．01）,TNF—α、ET-1的含量明显降低（P〈0．05）。结论：TNF—α、ET-1可能参与了PTZ致痫的发生发展过程,灵芝孢子粉能明显减弱TNF—α、ET-1过度表达对癫痫大鼠中枢神经系统的毒性损害,可能是通过调节神经系统免疫炎症反应而实现的,对癫痫发作导致的神经细胞损伤具有保护作用。