肝缺血模型大鼠热休克蛋白70与γδ-TCR阳性细胞群的变化

通过建立大鼠肝缺血再灌注模型,应用抗热休克蛋白70(HSP70)抗体,采用Westernblotting方法观察缺血-灌注前后HSP70变化;同时用抗γδ-TCR阳性细胞单克隆抗体,应用流式分析γδ-TCR阳性细胞群的变化。结果发现:①在缺血-灌注实验组、假手术模型组、阳性对照组和阴性对照四组中均观察到HSP70蛋白的存在;②肝脏缺血5～15 min再灌注2 h后,Western blotting检测有HSP70蛋白存在;肝缺血45 min再灌注2 h后,HSP70蛋白明显增多,而γδ-TCR阳性性细胞在肝缺血45 min再灌注2 h后明显高于其它各组别。结果提示,肝缺血-灌注可诱导HSP70蛋白合成,并随缺血时间的延长而增多。     

人卵巢癌细胞特异CTL系的免疫学特性初步研究

目的 探讨人卵巢癌细胞体外刺激、诱导的肿瘤特异细胞毒性T淋巴细胞（CTL）对靶细胞的杀伤活性。方法 应用建株的人卵巢癌细胞（OVA－319），在体外定期刺激、诱导肿瘤患者外周血淋巴细胞，经微量淋巴细胞毒试验和流式细胞术分别测定扩增的淋巴细胞组织相容性白细胞抗原（HLA）Ⅰ类分子表型和膜表面免疫标志物，并通过4－甲基偶氮唑盐（MTT）法分析其对肿瘤细胞的杀伤活性。结果 经卵巢癌细胞刺激、诱导3周后扩增的淋巴细胞主要为T细胞抗原受体（TCR）－α、β及CD8阳性的CTL，具有明显特异性杀伤肿瘤细胞的作用，并发现经OVA－319细胞刺激、诱导后不同个体的卵巢癌患者CTL的杀伤活性与效靶细胞的HLA－A、B位点相同数成正比。结论 肿瘤细胞体外激活的CTL具有特异杀伤靶细胞作用，提示CTL特异杀伤作用与刺激细胞、靶细胞及本身CTL表型的HLA－A、B位点密切联系。     

槲寄生凝集素的制备与免疫学功能研究

目的:分析从中国槲寄生中提取的55 KD凝集素诱导T淋巴细胞增殖和肿瘤细胞凋亡的免疫学活性.方法:通过CM-Sepharose和ConA柱分离和纯化了分子量为55 kD的槲寄生凝集素.用流式细胞术和ELlSA检测纯化的槲寄生凝集素诱导T淋巴细胞表型和细胞因子分泌格局.并经Annexin V染色法研究其诱导肿瘤细胞凋亡的免疫学机制.结果:从中国槲寄生中分离纯化了由两个30 kD亚基组成的55 kD槲寄生凝集素蛋白,其具有特异诱导人γδT趼细胞扩增和以Caspase依赖途径诱导Jurkat细胞凋亡,并能促进TNF-α释放和抑制IL-10的释放的作用.结论:中国槲寄生凝集素具有免疫学调节作用和诱导肿瘤细胞凋亡作用.在研究抗肿瘤和免疫学机制中具有应用价值.     

人Fas配体蛋白在大肠杆菌中的融合表达与应用

目的：在大肠杆菌中融合表达人Fas配体蛋白。方法：应用RT-PCR技术，从激活的人外周血淋巴细胞中提取总RNA，扩增Fas配体cDNA，克隆入PCR2.1载体，测序验证后，克隆入带有组氨酸盒的表达载体pQE-31，在大肠杆菌中表达，经亲和层析柱纯化后，用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。结果：表达的融合蛋白为人Fas配体，其相对分子质量（Mr)为40000。；经透析复性后，具有诱导Jurkat细胞凋亡的作用，用该蛋白分子免疫BALB/c小鼠制备抗血清，以间接ELISA检测了部分自身免疫病与肿瘤患者血清中可溶性的F 苛的含量。结果与进口试剂盒的灵敏性相似。结论：获得FasL单克隆抗体，深入研究FasL的应用提供了材料。     

红斑狼疮患者NK细胞的变化

本文报道了126例红斑狼疮(SLE)患者及19例其它胶原疾病患者的NK活性,用LDH释放测定法发现SLE患者NK活性为12.01±8.03%,对照组为32.45±8.17%(P<0.001)。9例类风关的NK活性也低(P<0.001),绝大多数SLE患者的NK活性比正常人的NK活性均值低,仅2例轻型患者(1.59%)的NK活性超过正常人均值。16例具有肾脏损害的SLE患者NK活性更低(7.11±5.11%),20例未用激素治疗的NK活性同样受到损害(13.43±10.99%)。说明SLE患者的NK功能受损,也反映了NK活性与疾病的严重与否有关。     

兔胎盘源性间充质干祖细胞的分离方法比较

目的探讨几种酶消化方法对兔胎盘源性间充质干细胞（rPDMSCs）的分离效果。方法采用孕兔剖宫产取其胎盘，用Ⅱ型和Ⅳ型胶原酶、分散酶、DNaseⅠ组合成3组混合消化液：Ⅳ型胶原酶、DNaseⅠ与分散酶组（A组）；Ⅳ型胶原酶与DNaseⅠ组fB组）；Ⅱ型胶原酶与DNaseⅠ组（C组），分别对兔胎盘进行消化。分离间充质干细胞（MSCs）后经原代及传代培养．倒置显微镜逐日观察、HE及碱性磷酸酶染色、苔盼蓝拒染法计数胎盘源性细胞数目及倍增时间，流式细胞仪检测细胞表面标志。结果分步分离法对细胞的活力影响较小。C组分离的MSCs较其他两组细胞的数量多、活力好。细胞倍增时间约28～56h，组间差异有统计学意义（P＜0．05）；C组细胞形态规则，不表达碱性磷酸酶，诱导培养后可形成钙结节．流式细胞仪示CD105阳性率为91．9％，CD29阳性率89．1％，CD44阳性率93．6％，CD45阳性率3．2％。结论Ⅱ型胶原酶与DNaseⅠ混合消化液、分步分离法可以较好地从兔胎盘中提取MSCs。     

用荧光定量法检测Caspase—3的活性

目的,通过检测Caspase-3的活性反映Jurkat细胞凋亡。方法,用放线菌素D诱导Jurkat细胞8h,裂解细胞,荧光分光光度计测定Caspase-3的活性。同时,用Hoechst法进行检测,并进行闰行的方法学比较。结果Jurkat细胞经不同浓度（50μmol/L和100μmol/L)有放线菌素D诱导后,Caspase-3的活性显著增高,倍增值分别为10．091和10．818,相应的Caspase-3活性单位为0．641和0．659,而未经诱导的Jurkat细胞仅为0．061,加入Caspase-3抑制剂后,倍增值分别为0．101和0．119,Caspase-3的活性单位为0．006和0．007。而且Hoechst法染色时,可见Jurkat细胞仅出现早期凋亡的形态学改变。结论荧光定量法是一种良好的定量检测Caspase-3的方法,可用于检测早期的细胞凋亡。     

日本血吸虫尾蚴及童虫可溶性抗原蛋白质组研究

应用免疫蛋白质组研究方法筛选、鉴定日本血吸虫尾蚴、童虫可溶性抗原蛋白质。方法日本血吸虫尾蚴可溶性粗抗原(SCAP)、童虫可溶性粗抗原(SLAP)分别用双向凝胶电泳(2-DE)分离蛋白质，每样本同时制3块胶，1块胶进行银染，2块胶通过电转印后再分别用感染兔和正常兔血清作Western印迹分析，确定特异性阳性反应点，再从相...     

自体骨髓及纤维蛋白胶在骨组织工程中的应用现状

因创伤、肿瘤所致的骨缺损、骨不连的治疗一直是骨科研究的重要内容。传统的自体骨移植由于其来源有限且增加创伤使其应用受到一定的局限,单纯使用同种异体骨及人工骨则有成骨能力受限、费用高等缺点。     

两乡村小学水痘暴发疫情报告

2002年11月1日和4日，分别在西堡和郑店小学发生首例水痘病人，随后病例逐渐增多，11月18日达高峰，12月5日流行终止，西堡小学在校学生308名，水痘患者54例，占17．5％；郑店小学在校学生360名，患病者86例，占23．9％，两校共发生病例140例。男生66例，女生74例，男女发病