大鼠脊髓半切损伤模型的制备

目的 用一种新的方法建立简便易行,稳定可靠的脊髓半切损伤模型.方法 取45只SD大鼠随机分为3组：假手术组为A组5只,40只为手术组（其中20只用眼用手术尖刀通过T11～T12椎间隙切割脊髓一侧1/2制成hSCI模型为B组,另20只用有齿血管钳咬除T11-12棘突和1/2椎板,用显微剪在T13～L1节段脊髓剪断其一侧1/2制成hSCI模型为C组）.术后不同时间观察脊髓组织学变化,并记录脊髓神经功能综合评分（CBS）.结果 光镜下伤侧灰质缩小,脊髓远端侧索和灰质神经变性坏死,出现大量空泡而神经元减少且明显萎缩,Waller＇s溃变下节段较上节段严重,术后CBS评分两两比较q检验发现手术组与假手术组有显著意义（P＜0.01）,但B组与C组CBS评分无显著性差异（P＞0.05）.结论 用眼用手术尖刀切割和显微剪切割制成hSCI模型具有同样的模型效果,但前者制备的模型死亡率低,更简单易行、安全可靠等优点.     

软骨源形态发生蛋白基因转染自体骨髓间充质细胞修复关节软骨缺损

背景:以支架或干细胞在一定程度上能够修复软骨缺损,但是研究中发现较大块的缺损修复效果还达不到令人满意的程度.基因转染后的干细胞能够不断的释放生长因子有可能够为软骨缺损研究带来突破.目的:进一步验证软骨源形态发生蛋白转染的骨髓间充质干细胞是否会促进体内兔软骨修复.方法:从兔骨髓内分离获得骨髓间充质干细胞,脂质体感染的方法将软骨源形态发生蛋白基因转染到骨髓间充质干细胞中.实验组移植转染后的细胞;单纯骨髓间充质干细胞组移植未转染的骨髓间充质干细胞;空白对照组缺损区不移植细胞.术后行组织学检测及组织学评分分析修复情况.结果与结论:体内修复过程中,软骨源形态发生蛋白转染的骨髓间充质干细胞促进了软骨再生.透明软骨填充了软骨缺损区,并且深部区域显示了软骨下成骨.透明软骨的重建区域优于单纯骨髓间充质干细胞移植组.组织学评分实验组高于骨髓间充质干细胞对照组和空白组.提示转染软骨源形态发生蛋白基因的骨髓间充质干细胞能够促进和提高关节软骨的改建和修复.     

海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊内细胞浓度与胰岛素和C肽的释放

背景：微囊化已经普遍应用于各种实验研究,微囊包裹的干细胞治疗糖尿病问题也成为当今的热点,但是囊内包裹的细胞浓度与胰岛素释放量的关系成为目前需要解决的问题之一。 目的：运用海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊包裹胰岛素产生细胞,观察细胞浓度对胰岛素和C肽释放情况的影响。 方法：制备大鼠胰腺损伤提取物,将小鼠骨髓间充质干细胞诱导分化为胰岛素产生细胞。免疫荧光和双硫腙染色鉴定诱导后细胞内胰岛素的表达。然后将胰岛素产生细胞制成浓度分别为1×10⁷ L^-1,5×10⁷ L^-1,1×10⁸ L^-1,5×10⁸ L^-1,1×10⁹ L^-1,5× 10⁹ L^-1的细胞悬液,气体吹喷法制成微囊,用6-羧基乙二酸荧光素检测囊内细胞活力,用葡萄糖刺激微囊内细胞检查其胰岛素和C肽的分泌情况。 结果与结论：胰腺损伤提取物诱导后双硫腙染色和细胞免疫荧光鉴定出胰岛素产生细胞内有胰岛素的表达;胰岛素产生细胞制成的微囊直径约为400 µm,大小均一,6-羧基乙二酸荧光素检测到囊内细胞的活力很好。用葡萄糖刺激不同细胞浓度的微囊,发现细胞浓度为1×10⁸ L^-1时,胰岛素和C肽的分泌达到最高。     

陈旧肾脏HE染色切片退掉盖玻片后行免疫组化检测

<正>在临床和科研工作中切片大部分都是以HE染色树胶封片,这样可样将切片长期保存。但是往往因为原有组织块丢失而或其他原因需要在原有石蜡HE染色切片原位基础上行免疫组织化学检测。本文就上述问题做了尝试并得到了较好的效果。1材料与方法实验室中存放的陈旧HE染色小鼠肾脏组织切片     

互动教学系统在组胚实验课上的应用与教学效果分析

<正>由于显微镜成像系统及计算机价格的昂贵,只有在科研中才有使用。随着成像系统的普及和价格的降低,在实验课教学中应用该系统成为可能。近[1]年来,高校教学改革中不断提倡互动教学,那么在组织胚胎学实验课上开展互动教学无疑对学生学习和老师教学都是一种新的尝试和提高。所谓互动教学系统是指,学生的显微镜配备成像系统并与计算机相连,学生的每台计算机又与教师的主计算机相连,通过软件教师计算机和每台学生机相连。这样每个学生通过自己的显微镜或者计算机显示器可以