细胞凋亡与白血病

细胞凋亡与白血病马东初，方军捷，张素芬细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）又称程序性细胞死亡不仅存在于正常组织与器官，调节着机体细胞生长与更新间的平衡稳定，也存在于各种肿瘤组织，与肿瘤的发生有密切的联系。它与白血病的关系也越来越引起人们的重视，我们就此问题...     

狼疮性肾炎患者CD4+淋巴细胞减少机制的初步探讨

目的 :探讨CD95表达在狼疮性肾炎 (LN)患者CD4 淋巴细胞减少中所起的作用。　 方法 :采用CD4 CD95和CD8 CD95双荧光标记及CD4 细胞的原位杂交DNA链断端标记 ,结合流式细胞术和DNA琼脂糖电泳对LN患者外周血单个核细胞的免疫分型及凋亡特征进行分析。　 结果 :①LN患者较正常人CD4 细胞比例明显减少 (P <0 0 1) ,CD8 细胞比例明显升高 (P <0 0 1)。②LN患者的CD4 细胞有 5 2 1%表达CD95 ,较正常人 ( 2 4 8± 7 6% )表达明显升高 (P <0 0 1) ;而LN患者CD8 细胞表达CD95的比例 ( 2 6 1± 5 5 % )较正常人( 2 1 5± 5 9% )略有升高 (P >0 0 5 )。③DNA琼脂糖电泳显示 ,5 0 μg/L的抗 CD95IgM可以引起LN患者CD4 细胞的凋亡 ,而在正常人DNA电泳带上无DNA“Ladder”出现。采用dUTP FITC标记显示 ,经 5 0 μg/L抗 CD95IgM作用后 ,正常人CD4 细胞的标记率为 5 1± 1 4 % ,而LN患者则为 3 2 0± 5 0 % ;浓度增加到 10 0 μg/L时 ,分别增加到 17 8± 5 8%和 5 9 1± 3 4 %。　 结论 :Fas受体在LN患者CD4 细胞上的表达比例增加 ,表达Fas受体的CD4 细胞对其受体的敏感性增加 ,这可能在LN患者CD4 细胞减少的病理过程中起重要作用     

狼疮性肾炎患者CD^＋淋巴细胞减少机制的初步探讨

目的：探讨ＣＤ９５表达在狼疮性肾炎（ＬＮ）患者ＣＤ４＾＋淋巴细胞和中所起的作用。方法：采用ＣＤ４＋ＣＤ９５双荧光标记及ＣＤ４＾＋细胞的原位杂交ＤＮＡ链断端标记,结合流式细胞术和ＤＮＡ琼脂糖电泳对ＬＮ患者中血单个核的免疫分型及凋亡特征进行分析。结果：（１）ＬＮ虱较正常人ＣＤ４＾＋细胞比例明显减少（Ｐ〈０．０１）,ＣＤ８＾＋细胞比例明显升高（Ｐ〈０．０１）。（２）ＬＮ患者ＣＤ４＾＋细胞有５１．２％表达     

形态学分型困难的白血病24例免疫分型

目的: 应用流式细胞仪对24例临床形态学诊断困难的急慢性白血病进行快速、有效地免疫分型,以指导临床化疗. 方法: 采用单克隆抗体双色直接免疫荧光标记法及多参数流式细胞术(FCM),分型根据抗体积分系统,并与FAB分型进行比较. 结果: ① 9例临床诊断慢性淋巴细胞白血病经FCM免疫分型确诊为B淋巴细胞性白血病;② 5例临床诊断急性淋巴细胞白血病(L2)的患者经FCM免疫分型确诊1例为B淋巴细胞性白血病;2例为T淋巴细胞性白血病,且1例伴红系异常改变; 1例为未分化型白血病;1例为淋巴细胞白血病B,T双表达;③ 5例急性非淋巴细胞性白血病经FCM免疫分型确诊2例为髓系白血病;3例为红白血病(M6);④ 1例MDS伴骨髓纤维化经FCM免疫分型确诊为M6;⑤ 4例疑似粒-淋双表型白血病经FCM免疫分型确诊为粒-淋双表型白血病. 免疫分型与FAB分型的符合率为79.2%. 结论: 流式细胞仪多参数白血病免疫表型分析,可以弥补FAB分型的不足,为临床诊断提供重要依据,并为白血病治疗措施的个体化提供依据.     

自体CIK细胞治疗联合DP方案一线化疗治疗晚期肺腺癌临床研究

目的:观察自体CIK细胞联合多西他赛+顺铂(DP)方案一线化疗治疗晚期肺腺癌的临床疗效。方法:病理明确诊断的100例ⅢB期和Ⅳ期的肺腺癌患者,按照随机数字表法1:1随机分成实验组(DP联合CIK)和对照组(单纯DP化疗)。对两组T细胞亚群、疾病控制率(IDCR)、中位总生存期(MST)、疾病无进展生存期(PFS)进行比较。结果:实验组的疾病控制率(DCR)为86%(43/50),化疗组的DCR为60%(30/50),P<0.005。实验组T细胞亚群CD3~+,CD3~+CD8~+,CD3~+CD56~+在治疗后较治疗前明显升高(P<0.05);对照组CD3~+,CD3~+CD56~+在治疗后较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。两组的MST分别为15.20个月(95%CI,11.82个月~18.58个月)和10.50个月(95%CI,8.08个月~12.92个月),差异有统计学意义(P=0.02);PFS分别为6.30个月(95%CI,4.45个月~8.15个月)和5.6个月(95%cI,4.91个月~6.29个月),差异有统计学意义(P=0.013)。结论:CIK联合DP方案治疗晚期肺腺癌,可以调节患者的免疫功能,延长患者的疾病无进展生存期和总生存期,同时未见明显不良反应。     

狼疮性肾炎患者外周血淋巴细胞亚群的变化及其相互关系

为探讨狼疮性肾炎（LN）患外周血淋巴细胞亚群、活化状态和免疫球蛋白的变化其相互关系,应用流式细胞仪和酶联检测仪,对21例LN进行了研究。结果发现：（1）患CD3^ ＋CD4^ 、CD45RA^ 、CD45RO^ 、CD4^ ＋CD45RA^ 、CD4^ ＋CD45RO^ 细胞比例明显减少（与对照组比较,P＜0．05、P＜0．01或P＜0．001）。（2）HLA－DR^ 、CD19^ 、＋HLA－DR^ 、CD19^ ＋CD43^ ＋CD5^ 细胞比例明显增高（与对照组比较,P＜0．05、P＜0．01或P＜0．001）。（3）LN患IgE水平明显升高（与对照组相比,肾病综合征（NS）组P＜0．001,非NS组P＜0．05,NS组与非NS组比较,P＜0．05）;IgM,IgAI水平也升高（P＜0．05）,NS组与非NS组比较,P＞0．05;IgGNS组明显降低,而非NS组明显升高,P均＜0．001,NS组与非NS组比较P＜0．001。结论：LN患外周血T淋巴细胞亚群及免疫蛋白的变化与系统性红斑狼疮患并不完全相同,甚至出现截然相反的结果;LN患免疫功能的紊乱与淋巴细胞活化及其亚群之间的协调与失调密切相关;LN患存在B细胞过度活化,由此而产生的自身多克隆抗体是引发本病的根本原因。     

自体CIK治疗技术细胞制品制备面临的问题与持续改进的思考

细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)过继免疫细胞治疗技术已经成为肿瘤治疗的重要手段之一。在我国该技术已经进行临床应用,部分省份已经将其纳入医疗保险。然而,该技术在一些方面存在着很多问题,亟待改进。本文主要讨论了在cGMP生产设施设计、建设和管理,CIK制备质量控制和无菌试验等三方面存在的问题,并提出改进意见。     

肿瘤患者自体CIK细胞输注增强再次制备时CD3~+CD56~+细胞的体外扩增能力

目的探讨自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)输注治疗对再次制备CIK细胞亚群的构成和活性的影响。方法选取经2个疗程CIK细胞治疗的患者201例,分为CIK治疗后90 d内(含90 d)制备检测组和大于90 d制备检测组。台盼蓝拒染法检测细胞增殖;流式细胞术分析CD3、CD4、CD8,CD56和NKG2D受体表达情况的变化;乳酸脱氢酶释放法检测细胞毒活性。结果 CIK细胞输注治疗后90 d内再次制备CIK细胞的CD3+CD56+细胞百分率(16.7±9.1)%,与CIK细胞输注治疗前相比(13.5±8.6)%,显著增加(P0.01),而且,表面受体NKG2D表达水平((84.1±10.8)%,也比CIK细胞输注治疗前明显增高((81.1±14.8)%)(P0.05)。与此相反,CIK细胞输注治疗后导致再次制备时,CIK细胞群体中CD3+CD4+百分率(15.2±9.7)%,与CIK输注治疗前(17.6±12.5)%相比,显著下降(P0.01)。值得注意的是,CIK细胞输注治疗后超过90 d再次制备CIK细胞的CD3+CD56+细胞分布和NKG2D受体表达,与CIK细胞输注治疗前相比均无明显变化,但CIK细胞输注治疗后仍可导致再次制备时,CIK细胞群体中CD3+CD4+百分率(14.5±9.4)%,与CIK细胞输注治疗前相比(18.2±12.9)%,明显下降(P0.01)。另外,2组再次制备CIK细胞的总数和体外细胞杀伤活性无明显差异。结论 CIK细胞输注治疗有助于提高肿瘤患者CD3+CD56+细胞前体细胞,在相同CIK细胞培养制备体系中增殖、定向分化和活化的能力,该作用持续时间不超过90 d,因此,CIK细胞治疗疗程间隔时间不应超过90 d。     

p21WAF1蛋白的表达与非小细胞肺癌增殖和预后的关系

目的检测人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的p21WAF1/CIP1表达水平,探讨NSCLC中p21WAF1/CIP1的表达与细胞增殖活性和预后的关系.方法采用流式细胞术检测60例NSCLC中p21WAF1/CIP1的表达量及DNA含量;分析p21WAF1/CIP1表达水平与S期细胞比例、预后的关系.结果正常肺组织中未见p21WAF1/CIP1的表达,60例NSCLC组织中p21WAF1/CIP1阳性率为60%(36/60),p21WAF1/CIP1阳性表达者的S期细胞比例(10.87±0.69)%低于阴性表达者(13.30±0.93)%,t=3.232,P= 0.001.p21WAF1/CIP1的表达与患者的术后累积生存月数和5年生存率有关,p21WAF1/CIP1 阳性表达者的术后平均生存月数(40个月)明显高于阴性表达者(25个月),t=2.885,P=0.003;5年生存率(29%)也高于阴性表达者(9%),t=2.712,P=0.004.结论 p21WAF1/CIP1表达是判断NSCLC预后的一个可参考指标.