肠道菌群对肺癌影响的研究进展

人体肠道内寄生着约十万亿个由500～1000不同种类组成的细菌，影响着人体消化和吸收功能、抵御感染和自身免疫疾病的患病风险，还参与药物代谢过程。肺癌的发病率和死亡率快速增长，是对人类生命威胁较大的恶性肿瘤。肠道菌群可能通过代谢或免疫等途径影响肺癌的发生，同时影响肺癌对放化疗、免疫治疗等治疗方法的疗效，但不同患者获益不一。肠道菌群在恶性肿瘤的发生、发展、诊断、治疗中的作用已成为近年来的研究热点，本研究对肠道菌群和肺癌的相关性研究进展进行综述。      

肠癌SW-620肿瘤细胞SP亚群研究

目的 观察肠癌细胞株SW-620中肿瘤干细胞相关的SP(side population)亚群比例,分选出相关的SP和NSP细胞,并鉴别相关的SP是否具有干细胞某些生物学特性.方法 制备SW-620细胞悬液,经Hoechst33342和PI染色(其中对照组同时加入拮抗剂维拉帕米),流式细胞仪分析SP亚群.通过流式细胞仪分选出肠癌细胞株SW-620中SP细胞.克隆形成实验和噻唑蓝(MTT)实验检测SP和NSP细胞增殖能力的差异.裸鼠体内成瘤对比实验验证SP细胞和NSP细胞致瘤性.结果 SP亚群占SW-620细胞的1.0%左右,维拉帕米阻断后减少为0.01%左右.流式细胞仪分选出SP细胞7.5×105个,大部分为NSP细胞.克隆形成实验和MTT证实SP细胞和NSP细胞增殖能力有差异.裸鼠体内成瘤实验发现:1×105个SP细胞可以致裸鼠成瘤,1×105个NSP细胞及以下数量级别细胞不能致裸鼠成瘤.结论 人肠癌细胞株SW-620中存在SP亚群细胞,维拉帕米可抑制染料外排而明显减少SP细胞的比例.可以通过流式细胞仪分选出SP细胞,通过克隆形成实验和MTT实验检测SP和NSP细胞增殖能力有差异.裸鼠成瘤对比实验证实SP比NSP细胞更具致瘤性.     

构建RNA干扰真核表达载体抑制肝癌细胞IGF1R表达的研究

目的 构建胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)RNA干扰真核表达载体,探讨人肝癌细胞株MHCC-97H在IGF1R基因抑制前后黏附和侵袭能力的变化及相关信号分子的变化.方法 以pGCsi-U6-Neo-GFP为空白质粒载体,以IGF1R为靶基因,按GeneBank IGF1R基因核苷酸序列和Tusch1设计原则,选择5对2条互补的带发夹结构的核苷酸序列,连接到pGCsi-U6-Neo-GFP空载体中.转化大肠杆菌Stable3,扩增后提取质粒,进行酶切鉴定和测序分析.转染模型细胞(293T),进行RT-PCR及Western blotting检测,筛选出沉默效果最好的质粒载体.用脂质体转染MHCC-97H肝癌细胞,G418筛选并建立IGF1R基因沉默的MHCC-97H肝癌细胞株.检测MHCC-97H细胞株黏附和侵袭能力及FAK蛋白的表达变化.结果 构建的IGF1R pGCsi-U6-Neo-GFP shRNA,经酶切和DNA测序证实与设计完全一致;RT-PCR及Western blotting检测发现IGF1R沉默效率达88%.MHCC-97H细胞IGF1R被沉默后黏附和侵袭能力下降,FAK蛋白表达下降.结论 IGF1R pGCsi-U6-Neo-GFP shRNA能够降低MHCC-97H细胞黏附和侵袭能力并抑制FAK蛋白的表达.     

构建RNA干扰真核表达载体抑制肝癌细胞IGF1R表达的研究

目的 构建胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)RNA干扰真核表达载体,探讨人肝癌细胞株MHCC-97H在IGF1R基因抑制前后黏附和侵袭能力的变化及相关信号分子的变化。方法 以pGCsi-U6-Neo-GFP为空白质粒载体,以IGF1R为靶基因,按GeneBank IGF1R基因核苷酸序列和Tusch1设计原则,选择5对2条互补的带发夹结构的核苷酸序列,连接到pGCsi-U6-Neo-GFP空载体中。转化大肠杆菌Stable3,扩增后提取质粒,进行酶切鉴定和测序分析。转染模型细胞（293T）,进行RT-PCR及Western blotting检测,筛选出沉默效果最好的质粒载体。用脂质体转染MHCC-97H肝癌细胞,G418筛选并建立IGF1R基因沉默的MHCC-97H肝癌细胞株。检测MHCC-97H细胞株黏附和侵袭能力及FAK蛋白的表达变化。结果 构建的IGF1R pGCsi-U6-Neo-GFP shRNA,经酶切和DNA测序证实与设计完全一致;RT-PCR及Western blotting检测发现IGF1R沉默效率达88%。MHCC-97H细胞IGF1R被沉默后黏附和侵袭能力下降,FAK蛋白表达下降。结论 IGF1R pGCsi-U6-Neo-GFP shRNA能够降低MHCC-97H细胞黏附和侵袭能力并抑制FAK蛋白的表达。     

转录因子E12F-4在中低位直肠癌组织中的表达及意义

目的 检测中低位直肠癌组织中转录因子E2F-4的表达,并分析其与临床病理学参数和预后的关系.方法 选取临床资料与肿瘤病理标本完整的60例中低位直肠癌患者,所有患者均行直肠癌根治术,另以肠镜活检30例慢性结肠炎的直肠黏膜组织作为对照.免疫组织化学法检测直肠癌组织、癌旁组织及对照直肠黏膜的E2F-4表达,分析其与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤分化程度、淋巴结转移、TNM分期和术后转移复发等临床病理参数以及预后的关系.结果 直肠癌组织E2F-4表达显著高于癌旁组织和对照直肠黏膜（P〈0.05）;直肠癌组织E2F-4表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移和术后转移复发有关;直肠癌组织E2F-4表达阴性者术后平均无瘤生存时间显著大于阳性者（P〈0.05）.结论 转录因子E2F-4与直肠癌生物学行为密切相关,在中低位直肠癌的发生发展中可能发挥癌基因的作用.     

人脱细胞真皮在腹壁缺损修复中的应用

目的:探讨人脱细胞真皮(human acellular dermal marx,HADM)在腹壁缺损修复中的应用.方法:回顾我院外科自2007年5月至2008年9月14例使用HADM修复腹壁缺损病人的临床资料,分析手术效果及并发症的发生率.结果:14例均顺利重建腹壁,无感染及肠梗阻、肠瘘等并发症发生;随访1～16月,无疝复发和其他类型腹壁疝出现.结论:HADM在腹壁缺损的修复上具有一定优势,尤其是在处理感染或污染创面时,是一种值得在临床上推广应用的理想补片材料.     

联合应用生长激素和谷氨酰胺对短肠大鼠小肠粘膜上皮细胞基因表达的影响

目的　探讨联合应用生长激素和谷氨酰胺防止小肠粘膜萎缩的分子学机制。方法　选用 40只手术成功的SD短肠大鼠 ,随机均分为 4组 ,分别给予常规全肠外营养 (TPN组 )、附加谷氨酰胺 (TPN +Gln组 )、附加生长激素 (TPN +GH组 )及附加谷氨酰胺和生长激素全肠外营养(TPN +GH +Gln组 ) ,持续 6d。另取 8只正常大鼠模拟手术后第 1天处死 ,作为基础对照组 (Con trol组 )。应用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)技术检测残留小肠粘膜上皮细胞c fos和c junmRNA的表达。结果　小肠粘膜上皮细胞c fos和c junmRNA表达值中 ,TPN组 (0 .1 1± 0 .0 7、0 .2 9± 0 .1 0 )明显低于对照组 (0 .48± 0 .1 5、0 .57± 0 .2 2 ,P <0 .0 5) ;TPN +Gln和TPN +GH组 (分别为 0 .32± 0 .1 5和 0 .48± 0 .2 1 ,0 .36± 0 .1 3和 0 .46± 0 .1 7) ,较TPN组显著增高 (P <0 .0 5) ;TPN +GH +Gln组 (0 .35± 0 .1 6、0 .61± 0 .1 3)明显高于TPN组 (P <0 .0 5) ,与对照组差异无显著性。结论　生长激素或谷氨酰胺单独应用均可通过上调小肠粘膜上皮细胞c fos和c jun基因的表达 ,促进细胞分裂增殖 ,从而防止小肠粘膜萎缩的发生 ,且两者联合应用具有协同增效作用     

硬膜外麻醉下免气腹腹腔镜胆囊切除术的临床对照研究

目的探讨硬膜外麻醉下免气腹腹腔镜胆囊切除术(LC)的临床治疗效果。方法选取2012年3月至2014年6月在我院治疗的胆囊结石患者,将患者随机分为研究组(给予硬膜外麻醉免气腹LC)和对照组(给予全麻有气腹LC),观察两组患者手术中出血量、手术时间、术前麻醉时间、肛门恢复排气时间、切口感染、住院天数、住院费用等指标。结果研究组术前麻醉时间为(4.44±0.45)min,长于对照组的(3.42±0.72)min,而排气时间为(20.35±7.02)h,短于对照组的(31.52±6.38)h,差异有统计学意义(P0.05);研究组术后下床时间和住院费用分别为(18.12±7.05)h和(8 135.45±1 159.48)元,均优于对照组的(23.47±6.82)h和(9 563.64±1 532.04)元,差异有统计学意义(P0.05);研究组术后并发症发生率为3.28%,而对照组的5.29%,两组差异无统计学意义(P0.05)。结论硬膜外麻醉下免气腹LC,相对于全麻下LC,手术组患者创伤相当,免去了全麻及其苏醒过程,恢复快,费用明显减少,经济效益明显,是一种值得推广的术式。     

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如何对腹壁巨大缺损,特别是腹壁肿瘤扩大切除术后形成的腹壁缺损进行有效修复重建至今仍是困扰外科医师的一大难题。在腹壁缺损修复前对其进行准确的分型是选择恰当手术方案的基础,也是术后比较与判断其疗效的前提。对术前病人状况进行认真评估及针对性的准备是进行手术的必要条件。了解并正确掌握植入材料修复技术、组织结构分离技术及自体组织移植技术并根据腹壁缺损的类型、大小及周围组织状况选择合理的术式是腹壁巨大缺损修复重建成功的保证。