孔雀石绿对Fas/Fas-L诱导的小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的:探讨孔雀石绿对小鼠睾丸生精细胞由Fas/Fas-L所诱导凋亡的影响。方法:32只雄性成年BALB/c小鼠随机均分为4组,按照孔雀石绿浓度设为:对照组(A组,0mg/L)、低剂量组(B组,100mg/L)、中剂量组(C组,400mg/L)、高剂量组(D组,800mg/L)。实验组连续灌胃给药30d,对照组以等量生理盐水代替孔雀石绿。HE染色后观察睾丸组织结构的变化,免疫组化法检测Fas及Fas-L蛋白的表达及改变。结果:B组显示与对照组相似的组织学结构。C组和D组的生精上皮细胞层数减少,少数管腔内可见脱落生精细胞,病理变化随剂量增大而加重。Fas和Fas-L在间质细胞和精子的表达呈强阳性,Fas集中于精子细胞核及周围残余胞浆,管腔中的絮状精子尾明显见Fas-L表达。Fas和Fas-L在支持细胞表达较弱,在A、B组表达位于靠近基底膜处的胞浆,在C、D组还表达于伸向管腔的胞浆。Fas在C、D组精子及支持细胞的表达均比对照组显著增强,Fas-L在3个实验组支持细胞的表达均显著强于对照组(P<0.05),在精子表面的表达则无明显差异。结论:孔雀石绿可以导致小鼠睾丸生精上皮损伤和支持细胞的Fas/Fas-L表达上调,表明孔雀石绿可能通过Fas/Fas-L通路使生精细胞凋亡增加。     

幽门螺杆菌尿素酶C基因的克隆表达及其免疫原性的鉴定

目的　利用 PCR方法扩增 Hp ure C基因 ,将其克隆入表达载体 p BV2 2 0中以表达 Hp ure C重组蛋白 ,并验证其抗原性和免疫原性 .方法　用 PCR方法从 Hp临床株中扩增Hp ure C基因 ,经 Eco R 和 Bam H 双酶切后克隆入 p GEM-3Zf(- )中 ,用全自动测序仪进行双向测序 .然后将目的片段克隆入表达载体 p BV2 2 0中 ,温度诱导表达 Hp ure C重组蛋白 .用 Western Blot实验验证表达蛋白的抗原性 ,用免疫动物实验验证其免疫原性 .结果　用 PCR方法从 Hp临床株中扩增得到了一段 1173bp的 Hp ure C基因片段 ,对其进行测序 ,经BL AST分析证明所得 DNA序列与 Hp标准菌株 M6 0 398的同源性为 95 % .通过温度诱导 ,获得了 Mr为 4 4× 10 3的 Hpure C重组蛋白质 .经 Western Blot实验和免疫动物实验证实表达的蛋白质有较强的抗原性和免疫原性 .结论　成功地在E.coli中表达了 Hp ure C重组蛋白并证明其有较强的抗原性和免疫原性 .     

探讨中药外洗的技巧

中医治疗疾病的具体方法种类繁多,内容丰富,且各具特色。药物疗法：指通过口服药物,经由消化器官吸收,以达到扶正祛邪、调节机体气血阴阳,使机体康复的治法。本法是在临床各科应用范围最广的治疗方法。     

遗传学教学引入多媒体技术的几点思考

多媒体教学已是衡量现代教育水平的一个重要标志，是现代教学的必然发展趋势。结合多媒体教学经验，介绍分析了遗传学多媒体教学的优势与不足，提出了调整与改进措施。     

睾丸一氧化氮合酶的分布及其作用的研究概况

一氧化氮合酶 ( NOS)在还原型辅酶 II( NADPH)存在下催化 L -精氨酸分解生成一氧化氮 ( NO)。 NOS有以下几种形式 :神经型 NOS( n NOS)、诱导型 NOS( i NOS)和内皮型 NOS( e NOS)。 NO是目前研究最多的体内信息和效应分子 ,广泛存在于人体的心血管、神经、消化、免疫、生殖系统等。 NOS和 NO对生殖活动的作用已被广泛研究 ,如对睾丸微循环的调节 ,参与睾酮分泌 ,调节精子活动等。本文对睾丸 NOS的分布及其作用的研究概况作一概述     

幽门螺杆菌cagA基因的克隆表达及其产物的应用

目的体外表达ＣａｇＡ蛋白，发展快速而简便的检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的免疫学方法．方法用ＰＣＲ技术克隆ｃａｇＡ基因５端片段（８５４ｂｐ）于ｐＢＶ２２０中，在ＤＨ５α中温度诱导表达Ｍｒ３８０００的单体ＦＣａｇＡ，复性后分别作阴离子交换及凝胶柱层析，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定ＦＣａｇＡ的抗原性．以重组ＦＣａｇＡ为抗原，通过制备胶体金及免疫胶体金，建立了斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）快速检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的方法．结果ＦＣａｇＡ具有抗原性．以该抗原所建立的斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）快速检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的方法仅需２ｍｉｎ～３ｍｉｎ可完成，无需特殊设备，并可单人份操作．经过与ＥＩＡ法对比检测２６２例患者血清，本方法的特异性为９８５％，敏感度为９６８％．结论具有抗原活性的ＦＣａｇＡ蛋白的表达及ＤＩＧＦＡ检测抗ＣａｇＡ抗体方法的建立，对ＣａｇＡ＋Ｈｐ感染的流行病学研究具有重要意义     

免疫金渗滤法检测人乳头瘤病毒抗体IgG

人乳头瘤病毒 (HPV)对人类健康有广泛及严重的影响 ,需引起医学界及全社会高度重视 ,尽可能做到早期、全面的诊断。该病毒感染可致多种增生性病变 :良性、癌前性及癌性病变 [1 ]。近年的统计表明 ,我国每年新增宫颈癌病人在 1 3～ 1 5万人 ,而且年轻宫颈癌患者的上升趋势明显。宫颈癌患者年轻化的原因 ,与人乳头瘤病毒感染的增加关系密切。人乳头瘤病毒感染在过去常被认为是性病的一种 ,研究已证实 ,HPV的感染 5 0 %是由于性接触传播 ,而另一半则是因为交叉感染。尖锐湿疣是目前最常见的由该病毒 6,1 1型所致性传播疾病 [2 ] ,由于该病发…     

针刺对中风病人免疫功能的影响

目的：观察针刺对中风病人免疫功能的影响。方法：选择中风病人作为观察对象,针刺百会、大椎、关元、肩禺、曲渚、环跳、风市、足三里、阳陵泉、太冲等穴,测定免疫球蛋白IgG、IgA、IgM、T和B淋巴细胞、淋巴细胞增殖功能、自钉杀伤细胞（NK）活性。结果：针刺后中风病人PBMC中CD^ 25细胞率趋于正常（P＜0.001）。淋转率和NK活性明显增高（P＜0.01）。结论：针刺对中风病人的细胞免疫功能有增强作用。     

用分级定量RT-PCR测定中国人血清中HCV RNA

基因的定量分析对分子生物的研究有着重要的作用，而采用ＰＣＲ方法进行基因定量已成为一种有效的方式．并且，目前已有多种利用ＰＣＲ进行基因定量的方法，其中以竞争ＰＣＲ定量和ＰＥ公司既时定量ＰＣＲ方法测定结果较为准确，应用较多既时定量ＰＣＲ方法采用了特殊设计的荧光－淬灭探针和精密的既时荧光检测设备进行定量．该方法简化的操作，提高的测定的灵敏性和准确性，但其试剂和仪器的价值目前相当昂贵，一般实验室难于承担［１］．而竞争ＰＣＲ方法虽然操作比较麻烦，但也能进行较准确的定量，适合一般实验室使用，为了进一步简化竞…