造血干细胞移植技术及其应用

造血干细胞（ＨＳＣ）移植技术主要包括干细胞的鉴别，活性测定，干细胞的采集，分离纯化，动员，扩增，干细胞保存，肿瘤细胞的净化，干细胞改造以及干细胞操作专用仪器、材料和试剂的开发生产等。１ＨＳＣ特征ＨＳＣ在体内多数处于Ｇ０期或休眠期，而祖细胞则比较活跃，...     

核转录因子κB配体受体激动因子对脑缺血后骨髓间充质干细胞移植神经分化的影响

目的 观察核转录因子(NF)-κB配体受体激动因子(RANKL)在大鼠局灶性脑缺血后人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)移植中对神经功能恢复以及向神经细胞分化的影响.方法 制备SD大鼠左侧大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,24 h后行BrdU标记hBMSCs和RANKL协同移植,移植后1、7、14、21、28 d观察大鼠神经功能恢复情况,检测移植细胞在体内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达情况.结果 移植7～21 d,RANKL和hBMSCs协同移植组神经功能恢复明显好于单纯hBMSCs组;21 d时,协同移植组中NSE(4.39%)和GFAP(9.06%)阳性率明显高于单纯hBMSCs组(2.93%和8.03%).结论 RANKL和人骨髓间充质干细胞协同移植可提高大鼠局灶性脑缺血后神经病学预后,提高hBMSCs在宿主体内向神经细胞的分化.     

不同类型干细胞移植治疗神经损伤的新进展

近年来细胞疗法已成为治疗各种疾病的新方法,本文就神经干细胞,骨髓基质干细胞和造血干细胞及胚胎干细胞移植在治疗神经损伤中的研究进展进行综述。     

伊马替尼调控Survivin基因表达的分子机制

 【摘要】　  目的　探讨伊马替尼对bcr-abl转化细胞中的抗凋亡基因Survivin表达的影响。方法　应用PCR和Western blot法检测伊马替尼作用后32Dcl3和32D-bcr-abl细胞Survivin表达变化。克隆和构建Survivin启动子与荧光素酶基因融合的报告载体,采用缺失突变和点突变方法鉴定Survivin启动子上伊马替尼相关的作用元件。应用染色质免疫共沉淀技术检测c-myc和Surivinv启动子的结合作用。应用10058-F4抑制c-myc活性,观察其联合伊马替尼对白血病细胞的杀伤作用。结果　伊马替尼显著抑制bcr-abl转化的32D-bcr-abl细胞中Survivin mRNA和蛋白的表达,染色质免疫共沉淀技术证实c-myc与Survivin启动子上E-box元件结合。10058-F4能够增强耐药细胞系K562／G01对伊马替尼的敏感性。结论　伊马替尼可能通过c-myc调控Survivin的转录表达,干预c-myc活性有望成为白血病耐药治疗的一种新策略。     

人脐带间充质干细胞分化为心肌细胞的实验研究

目的 探讨人脐带间充质干细胞(MSCs)在体外向心肌细胞分化的能力及移植后对急性心肌梗死大鼠心功能恢复的影响.方法 胶原酶胰酶消化法分离脐带MSCs.取第4-6代脐带干细胞,采用5-氮胞苷诱导,免疫组织化学和免疫荧光法对诱导后细胞进行鉴定.建立大鼠心肌梗死模型,并按完全随机法将其分为2组(n=10):细胞移植组和空白对照组.将培养脐带MSCs移植到大鼠梗死心肌周围,4周后,免疫荧光法鉴定移植细胞,并超声检测心功能改变.结果 体外诱导后,细胞的形态不断发生变化,诱导后的细胞表达心肌特异性α-肌动蛋白、肌球蛋白和肌钙蛋白T,阳性率在50%以上.细胞移植4周后,脐带MSCs在缺血心肌内存活并分化为心肌样细胞,心功能检测显示脐带MSCs移植组大鼠在移植后4周的左心室射血分数[(68.4±15.2)%]比对照组大鼠明显增加[(53.2±13.4)%,P＜0.05].结论 人脐带MSCs能够在体内外分化为心肌样细胞,并能促进心脏功能的恢复.     

脐带间充质干细胞分化为内皮细胞的实验研究

我们采用酶消化法,成功从脐带组织中分离出间充质干细胞1,2.在本实验中,我们研究在VEGF和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的作用下,脐带间充质干细胞能否向内皮细胞分化,为组织修复和组织工程移植物再血管化提供一个新的细胞来源.     

脐带源间充质干细胞向神经细胞分化的潜能分析

应用免疫组化和RT—PCR方法检测脐带源间充质干细胞（MSC）表达神经细胞标记情况,以分析其向神经细胞分化的潜能。发现脐带源MSC表达多种神经细胞标记,包括神经干细胞标记Nestin、神经元标记Tubulin以及神经胶质细胞标记GFAP,在蛋白和分子水平提示脐带源MSC具有向神经细胞分化的基础。     

大鼠胎盘来源间充质干细胞的生物学特性

背景:研究报道,人间充质干细胞用于实验动物研究的结果不令人满意,所以考虑使用大鼠胎盘来源的间充质干细胞用于动物实验研究,以期获得更好的实验结果。查阅国内外相关文献,目前尚未发现大鼠胎盘来源间充质干细胞的相关报道。目的:建立从大鼠胎盘分离间充质干细胞的方法,观察其基本生物学特性。方法:通过胶原酶消化法从大鼠胎盘分离并得到间充质干细胞。每天用倒置显微镜观察其形态。用MTT法测定其生长动力学并绘制生长曲线。用流式细胞仪检测其表型及细胞周期。通过免疫组化法证实其成脂及成骨分化的潜能。结果与结论:原代细胞培养8h后细胞贴壁,24h内细胞形成集落,第4代细胞大小、形态基本一致,以梭形为主。细胞周期检测提示G0/G1期、S期、G2期的比例分别为83.76%,8.01%,8.23%。免疫表型分析其表达CD29和CD90,不表达CD45。体外诱导实验证实胎盘间充质干细胞具有成脂和成骨分化的潜能。     

成体干细胞与细胞心肌成形术

目前在心脏外科领域,虽然冠心病的治疗取得很大进展,但由于心肌梗死后无法再生或再生能力有限,心肌梗死及其导致的心力衰竭等心血管疾病仍是危害人类健康的头号疾病。对终末期心力衰竭者,心脏移植可能是唯一的治疗手段,但是,由于供体缺乏大大限制了其的临床应用,且大量免疫抑制剂的应用还可能降低病人生活质量。细胞治疗,又称细胞心肌成形术,即将细胞移植至心肌梗死区,增加或保持心肌细胞数量、促进局部血管新生,恢复局部血液供应,促进损伤心肌的功能恢复,可能成为治疗终末期缺血性心脏病的一种新方法。     

脐血血管内皮祖细胞的分离和诱导分化

目的 从脐血中分离内皮祖细胞，诱导其向内皮细胞分化，研究内皮祖细胞的生物学特性和诱导分化条件。方法 从新鲜脐血中纯化的CD133^ 细胞接种于添加了VEGF、bFGF、IGF—1的M199培养液中，观察梭形贴壁细胞的出现时间和特异性细胞标志。结果 培养3—4d可观察到梭形贴壁细胞，14d左右可形成索条状结构，贴壁细胞表达血管内皮细胞特异性标志VE-cadherin,vWF,UEA-1和VEGFR-2。结论 脐血中含有内皮祖细胞，在一定的条件下，可分化为内皮样细胞。