苦瓜蛋白逆转K562／AO2细胞多药耐药性的研究

目的：研究非细胞毒性质量浓度苦瓜蛋白对耐阿霉素的人红白血病细胞株K562／AO2多药耐药性的逆转作用和促凋亡作用。方法：采用CCK-8法测定苦瓜蛋白的细胞毒性及其对K562／AO2细胞敏感性的影响,用流式细胞仪检测K562／AO2细胞经不同药物处理后细胞的凋亡情况。结果：苦瓜蛋白对K562／AO2细胞有一定的细胞毒作用,其非细胞毒性质量浓度为5μg／mL,非细胞毒性质量浓度苦瓜蛋白对K562／AO2细胞对阿霉素、长春新碱（VCR）和柔红霉素的耐药性都有部分逆转作用（分别为5．4、6．5和4．0倍）;5μg／mL苦瓜蛋白联合VCR诱导K562／AO2细胞凋亡,凋亡率为（19．38±1．06）％,而对照组为（1．64±0．27）％,单一苦瓜蛋白组为（3．79±0．82）％,单一VCR组为（9．83±0．98）％。结论：苦瓜蛋白能部分逆转人红白血病K562／AO2细胞对阿霉素、VCR和柔红霉素的耐药,一定剂量的苦瓜蛋白与VCR联合应用可增加肿瘤细胞凋亡率。     

苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的抑制作用研究

目的:观察苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的影响.方法:采用倒置显微镜观察苦参碱对鼻咽癌CNE2细胞形态的影响:采用CCK-8法检测苦参碱时鼻咽癌CNE2细胞生长的影响.结果:苦参碱处理后CNE2细胞形态发生改变,细胞皱缩,变小变圆.空泡明显.苦参碱能抑制鼻咽癌CNE2细胞的增殖.在实验浓度范围内,随着剂量的增加,抑制作用更加明显;同一剂量下.72 h内药物作用时间越长,抑制作用越明显.结论:苦参碱能够抑制鼻咽癌CNE2细胞的增殖.     

粘附分子CD54、CD44在苦瓜蛋白诱导K562细胞凋亡中的作用

目的观察苦瓜蛋白诱导K562细胞凋亡时细胞粘附分子(CD54、CD44)表达水平的变化,探讨粘附分子在苦瓜蛋白诱导K562细胞凋亡中的作用。方法以一定浓度的苦瓜蛋白处理K562细胞;CCK-8试剂盒检测其对细胞生长的影响;流式细细术(An-nexinⅤ)、透射电镜等方法检测细胞凋亡;同时应用流式细细术检测粘附分子(CD54、CD44)蛋白表达水平的变化。结果苦瓜蛋白对K562细胞生长具有明显的抑制作用;流式细胞术及形态学观察(电镜)证实一定作用浓度的苦瓜蛋白可诱导K562细胞发生明显的细胞凋亡;苦瓜蛋白处理组K562细胞中CD54、CD44表达分别为18.62%和1.32%,对照组分别为0.25%和0.17%,分别上调了18.37%、1.15%。结论苦瓜蛋白引起K562细胞凋亡的过程中,粘附分子CD54表达上调;CD54表达上调可能是苦瓜蛋白诱导肿瘤细胞凋亡的机制之一,其机制可能涉及细胞粘附依赖性细胞凋亡。     

强直性脊柱炎患者外周血CD4+调节性T细胞的变化及意义

目的 探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者外周血中CD4+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的表达、功能及意义.方法 采用流式细胞术检测78例AS患者和50例健康志愿者外周血中CD4+CD25+CD127lo/- Treg、细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)和NK细胞,采用ELISA法检测血清中β型转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达水平.从患者外周血单个核细胞中磁珠分选出CD4+CD25+ Treg细胞,混合淋巴细胞培养(mixed lymphocyte culture, MLC)分析其免疫抑制功能.结果 AS活动期患者外周血中CD4+CD25+CD127lo/-Treg占CD4+ T淋巴细胞的百分比为(4.36±1.21)%,MLC中CD4+CD25+ Treg抑制同种异体T淋巴细胞增殖功能低下,与其Treg分泌TGF-β减少相关,CD4+ Treg含量及功能均低于健康志愿者(P<0.05).AS患者外周血中CD4+CD25+CD127lo/- Treg水平与TGF-β呈正相关,与TNF-α呈负相关.结论 AS患者外周血中Treg表达水平低,且存在功能缺陷,导致体内诱导免疫耐受机能不足,可能参与AS免疫发病.     

强直性脊柱炎患者外周血CD28 CD40共刺激通路相关分子的表达

目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者外周血淋巴细胞CD28和CD40共刺激通路相关分子的表达及其与免疫功能紊乱的关系。方法采用流式细胞仪检测69例AS初诊患者和50名健康对照者CD28、CTLA-4和CD40L在外周血CD3~ T细胞上的表达及CD80、CD86和CD40在CD19~ B细胞上的表达。用ELISA法测定血清中免疫球蛋白IgG、IgA和IgM的水平。结果AS患者CD3~ T细胞上的CD28、CTLA-4和CD40L,CD19~ B细胞上CD86和CD40的表达均较正常对照组显著增高(P＜0．01),CD80在CD19 B细胞表达增高(P＜0．05)：AS患者血清中2种免疫球蛋白IgG、IgA的水平较正常对照组显著增高(P＜0．01)。结论AS患者CD28和CD40共刺激通路相关分子表达增强,机体处于免疫激活状态,CD28和CD40共刺激通路在AS的发病中可能起重要作用。     

银屑病患者外周血T细胞亚群及B7/CD28的表达

银屑病的确切发病机制尚不清楚。近年来的免疫学研究表明,银屑病可能是一种T细胞介导的自身免疫性疾病,T细胞的活化是其发病的重要环节。共刺激分子CD28、CD80、CD86是决定T细胞激活的关键因素。本文采用流式细胞仪检测银屑病患者外周血T细胞及其亚群的变化,以及这些共刺激分子     

苦参碱抗人鼻咽癌CNE2细胞的作用及其机制研究

目的：观察苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞的作用,并探讨其作用机制。方法：倒置相差显微镜观察苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞形态的影响;CCK-8法检测苦参碱对CNE2细胞增殖的影响;流式细胞仪分析苦参碱对CNE2细胞周期的影响;Annexin V-FITC／PI法检测苦参碱对CNE2细胞凋亡影响。结果：苦参碱处理后CNE2细胞形态发生改变：细胞皱缩,变小变圆,空泡明显。苦参碱对CNE2细胞具有明显的抑制作用,并呈量效和时效关系。与对照组相比,苦参碱处理后的CNE2细胞G0／G1期比例明显增高,S期、G0／M期比例下降。苦参碱能诱导CNE2细胞的凋亡,其发生率随着药物浓度的增加而增加。结论：苦参碱能抑制人鼻咽癌CNE2细胞的增殖,它通过阻滞细胞周期和诱导凋亡来抑制CNE2的增殖。     

三氧化二砷诱导K562细胞凋亡与其抑制Evi-1表达有关

背景与目的： 探讨三氧化二砷(As2O3)诱导K562细胞凋亡的分子机制。 材料与方法： 分别以1、2、4、8 μmol/L的As2O3诱导K562细胞凋亡,每隔24 h采用光镜和电镜观察细胞形态变化,MTT观察细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR检测Evi-1mRNA表达率,ELISA检测细胞内JNK蛋白。 结果： As2O3对K562细胞增殖具有明显的抑制作用,且呈剂量-时间关系;1、2、4、8 μmol/L的As2O3可使K562细胞发生凋亡,在本实验时间段内随着作用时间的延长细胞凋亡逐渐升高,诱导细胞凋亡的最佳浓度为4 μmol/L;在此过程中K562细胞的Evi-1基因表达下调,JNK蛋白表达增多,两者跟As2O3浓度存在剂量-时间关系。 结论： As2O3通过抑制K562细胞Evi-1表达,从而激活JNK信号传导途径,促进细胞凋亡,这可能是As2O3促进K562细胞凋亡的机制之一。     

不同类型宫颈癌鳞状上皮组织中HPV DNA的比较及其临床意义

目的:比较不同类型宫颈癌患者宫颈鳞状上皮中人乳头瘤状病毒(HPV)负荷量,揭示HPV负荷量用于评价宫颈癌严重程度的潜在价值。方法:对不同类型的宫颈上皮内瘤变及宫颈癌患者2 718例采用Hybrid Capture2 High-Risk HPVDNA Test检测不同类型患者鳞状上皮组织中HPV负荷量,统计各组的1≤HPV DNA<100、100≤HPV DNA<500、500≤HPV DNA<1 000和HPV DNA≥1 000的比例。结果:217例健康妇女中HPV DNA<1的有215例,显著高于其他各组(P<0.05);CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ组1≤HPV DNA<100的比例分别为80.40%、70.65%和77.29%,均显著高于其他各组(P<0.05);原位癌组100≤HPV DNA<500比例占51.58%,显著高于其他各组的比例(P<0.05);浸润癌Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期组500≤HPV DNA<1 000比例分别占77.23%、77.20%和75.52%,均显著高于其他各组(P<0.05);浸润期IV期HPV DNA>1 000比例占68.67%,均显著高于其他各组的比例(P<0.05)。结论:HPV负荷量检测可区分正常宫颈、CIN、原位癌和浸润癌,具有潜在评价宫颈癌严重程度的临床价值。     

流式免疫磁珠法检测BCR-ABL融合蛋白在白血病中的意义

目的：探讨流式免疫磁珠（CBA）法检测白血病患者BCR-ABL融合蛋白的方法学评价及其意义。方法：采用CBA法检测64例白血病患者和10例正常人外周血白细胞中BCR-ABL融合蛋白表达,同时与实时定量聚合酶链反应（RQ-PCR）和荧光原位杂交（FISH）法比较。结果：正常人外周血白细胞BCR-ABL融合蛋白平均荧光强度（MFI）是10.58±3.88,64例白血病患者中BCR-ABL阳性25例,仅1例B-ALL患者检测结果与RQ-PCR结果不一致,与FISH检测结果完全一致。结论：CBA法检测BCR-ABL融合蛋白方法可靠,重复性好,简单,快速,具有良好的临床应用前景。