联合应用c－Ha－ras，c－myc反义寡聚脱氧核苷酸对人膀胱癌细胞生长增殖的抑制作用

作者联合应用人工合成的ｃ－Ｈａ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ反义寡聚脱氧核苷酸（ＡＳＯ－ｒ，ＡＳＯ－ｍ）对人膀胱癌细胞株进行作用，观察到ＡＳＯ－ｒ、ＡＳＯ－ｍ能明显抑制癌细胞中ｒａｓＰ２１、ｍｙｃＰ６２的表达，抑制了癌细胞ＤＮＡ合成及生长增殖，经ＡＳＯ－ｒ、ＡＳＯ－ｍ处理后癌细胞裸鼠致瘤力下降。这一结果表明：针对多个癌基因联合应用反义寡聚脱氧核苷酸，可能给膀胱癌的治疗提供新的途径，有进一步探索的价值     

大鼠肌源性干细胞的分离、纯化和培养

背景:要获得满足临床需要的肌源性干细胞,体外筛选和扩增已成为关键环节.目的:拟建立稳定高效的成年大鼠肌源性干细胞的分离培养、纯化方法.方法:成年SD大鼠麻醉后,无菌条件下取骨骼肌,采用Ⅺ型胶原酶、Dispase和胰酶消化法获得肌源性干细胞,以密度梯度离心法和差速贴壁法进行纯化.记录细胞生长曲线,MTT比色法观察不同接种密度对细胞生长的影响,采用免疫细胞化学染色对细胞进行鉴定.结果与结论:原代肌源性干细胞体积较小,贴壁缓慢,折光性较好,多呈球形、梭形或纺锤形,增殖缓慢.传代培养后,加入含体积分数为20%血清浓度的完全培养基,以1×109L-1密度接种时活细胞数量最多,为适宜接种密度,传1～4代细胞生长状态良好.免疫细胞化学染色结果为desmin(+),CD34(+),CD45(-),Sea-1(+),证实通过体外原代培养获得了高纯度的肌源性干细胞,并成功扩增.     

肾移植术后尿瘘病因68例分析

背景:肾移植后并发尿瘘占泌尿系并发症的40%～70%,其尿瘘的可能诱因包括外科因素和内科因素两个方面.目的:有效减少和避免同种异体.肾移植后尿瘘的发生,延长移植肾的存活.方法:从病因、诊断和处理方面回顾分析68例肾移植患者术后尿瘘的临床资料,其中男47例,女21例,年龄20～58岁,肾移植后尿瘘发生时间为3～31 d, 每日漏尿量60～2 000 mL.参照尿道损伤分类标准,按照尿瘘病变程度分为单纯性和复杂性两大类,按照尿瘘的病因及部位分为低位瘘、高位瘘和多发瘘.观察肾移植后尿瘘炳例中单纯性和复杂性尿瘘各自发生概率,分析尿瘘的病因.结果与结论:68例肾移植患者术后尿瘘中,47例为单纯性尿瘘,占69.1%,其中输尿管末端坏死42例,输尿管膀胱吻合口缝合不严4例,伤口感染致吻合口愈合不良1例;复杂性尿瘘21例,占30.9%,其中肾盂瘘2例,输尿管瘘2例,输尿管膀胱吻合口瘘11例,输尿管坏死段大于2 cm 6例.肾移植的任何步骤处理不当都可引起术后尿瘘,术中应根据输尿管血液供应,水肿情况,瘘口大小和输尿管的长度来选择不同的术式,以确保无张力的可靠吻合.发生尿瘘后要根据不同情况及时处理.     

避孕疫苗研究现状

人口过剩是严重的全球性问题 ,实行计划生育开发有效的避孕疫苗将成为控制人口增长的理想措施。目前已采用多种方法以确定能够用于发展避孕疫苗的特异性抗原 ,如 :精子抗原、ZP抗原、性激素抗原等 ,并已证实这些抗原在哺乳动物包括人类中可产生生殖抑制和免疫性避孕效应 ,目前正在积极支持进一步研究和开发这种有效的免疫性避孕疫苗。本文对免疫性避孕疫苗的开发及相关分子生物学技术的现状做一综述     

COX-2和EGFR在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其相关性研究

目的 探讨膀胱移行细胞癌组织中环氧化酶-2(COX-2)和表皮生长因子受体(EGFR)的表达与膀胱移行细胞癌发生、发展的关系及其两者的相关性,分析COX-2、EGFR表达与肿瘤生物学行为的关系.方法 采用免疫组化(S-P)法检测48例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱黏膜组织中COX-2与EGFR的表达.结果 48例膀胱移行细胞癌组织中,COX-2与EGFR表达阳性率分别为70.8%和66.7%,显著高于正常膀胱黏膜组织(P<0.01).COX-2与EGFR在原发组中的阳性表达率低于复发组.随着膀胱移行细胞癌病理分级和临床分期的增高,COX-2和EGFR的表达增高,差异有统计学意义(P<0.05).COX-2和EGFR的表达之间呈明显正相关(Kappa=0.419,P=0.004).结论 COX-2和EGFR在膀胱移行细胞癌组织中普遍表达,且两者表达密切相关,两者可能在膀胱移行细胞癌的发生,发展过程中起重要作用,可作为判断膀胱移行细胞癌的生物学行为及估计预后的指标.     

微创经皮肾镜取石术后结石残留的原因分析

目的 分析微创经皮肾镜取石术后结石残留的原因,以减少结石残留,提高手术效果.方法 回顾分析本院2004年1月至2009年4月所有行微创经皮肾镜取石术患者资料,以出院时的影像资料为依据,对有结石残留的患者进行原因分析.结果 在所有行微创经皮肾镜的432例手术中,共有52例患者出院时存在结石残留,其中24例与结石过于复杂有关,11例患者要求出院后体外碎石而未行2次经皮肾镜,3例患者与碎石过程中结石散落有关,4例患者与开展该项技术早期技术操作不熟练和经验不足有关,此外引起结石残留的原因还有肾脏解剖结构异常(2例)、患者不能耐受2次经皮肾镜(2例)、因出血行选择性肾动脉栓塞(2例)、肾周巨大血肿(2例)、2次经皮肾镜不能另外建立通道(1例)、2次经皮肾镜仍出血(1例).结论 引起结石残留的原因主要与结石的复杂性、结石散落、出血及操作者经验有关.     

FscB蛋白在鼠精子发生过程中的动态表达和迁移研究

目的:探讨一种新的睾丸特异性蛋白FSCB(Fibrous sheath CABYR binding protein)在精子内的精细动态表达和迁移过程,并研究该蛋白在正常和畸形精子中的形态定位特征.方法:应用过碘酸-希夫氏染色获得鼠睾丸曲精小管上皮中精子发生的时相性背景特征,然后应用间接免疫荧光方法对FSCB蛋白在睾丸和精子内的动态表达和迁移过程进行观察.结果:FSCB最初表达于长精细胞的第11步(时相Ⅺ),呈胞浆内弥漫性染色;随之从第11步(时相Ⅺ)至第15步(时相Ⅵ)表达逐渐加强;在精子形成的第15步(时相Ⅳ至时相Ⅵ)FscB开始向精子鞭毛迁移,最终于第16步(时相Ⅷ)FSCB蛋白整体局限定位于睾丸精子鞭毛上,胞浆内荧光染色消失.进一步研究显示该蛋自在正常精子中定位于鞭毛主段、精子头部、鞭毛颈段、中段和末段均无表达.在畸形精子中,该蛋白表达存在3种异常改变:①鞭毛内无阳性表达;②表达节段前移并缩短,提示这类精子缺乏中段;③呈现间断分布的串珠状改变.结论:FSCB是纤维鞘的重要组成蛋白,在精子纤维鞘形成的后期装配于其表面,可能是纤维鞘生物合成的最后装配步骤.该蛋白在畸形精子中存在明显表达异常,其表达异常与精子运动功能之间的关系有待深入研究.     

塞来昔布通过调节PI3K/Akt通路活化影响人膀胱肿瘤细胞株T24的增殖和凋亡

探讨PI3K/Akt通路在选择性环氧化酶2(Cox-2)抑制剂塞来昔布抗膀胱肿瘤机制中的可能作用。方法常规培养的贴壁生长的T24细胞,加入不同浓度PI3K抑制剂LY294002共培养,MTT法测定其对T24细胞增殖活性的影响;贴壁生长及悬浮培养的T24细胞,分别加入塞来昔布、PGE2、LY294002等共培养,流式细胞仪测定T24细胞凋亡率。Western blot检测塞来昔布及PGE2作用后悬浮生长的T24细胞Akt活化情况。结果塞来昔布对贴壁及悬浮培养的T24细胞均可诱导其凋亡;PGE2及LY294002均对贴壁的T24细胞增殖和凋亡无明显影响,但PGE2对悬浮生长的T24细胞可减少其凋亡,而LY294002可显著增加T24细胞的失巢凋亡率。Western blot结果提示塞来昔布显著降低而PGE2增加Akt的活化。结论塞来昔布对PI3K/Akt信号通路的主要作用是阻遏Akt的磷酸化,通过阻止Akt活化抑制T24细胞增殖并诱导其产生凋亡。更多还原     

α-受体阻滞剂联合Cox-2抑制剂对Ⅲb型前列腺炎患者的疗效观察

目的 观察α-受体阻滞剂联合Cox-2抑制剂对Ⅲb型前列腺炎(CPⅢb)的临床疗效,并结合其作用原理探讨CPⅢb的发病机制.方法 从2012年9月至2013年9月期间在我院门诊就医的CPⅢb患者中,经排粪造影检查筛选合并耻骨直肠肌痉挛并完成随访的患者40例,分为单用α-受体阻断剂盐酸坦索罗辛(A组)和盐酸坦索罗辛联合Cox-2抑制剂塞来昔布组(B组),分别予以药物治疗,对治疗前及治疗2、4、6周进行IPSS评分,生活质量评分(QoL),依据症状改善评价疗效.结果 耻骨直肠肌痉挛患者排粪造影表现为排便时耻骨直肠肌压迹直肠肠壁形成“鹅征”.对诊断伴有耻骨直肠肌痉挛的Ⅲb型前列腺炎患者,2组治疗效果在各期随访中均有一定程度的改善,患者IPSS尿频、尿急等症状分数明显降低(P＜0.05),治疗评价对比B组患者IPSS评分以及尿频、尿急、尿不尽等分项评分和Qol均比A组改善明显(P＜0.05).结论 联合使用Cox-2抑制剂缓解耻骨直肠肌痉挛可明显提高CPⅢb的治疗效果,提示耻骨直肠肌痉挛与CPⅢb患者下尿路症状的发生有关.     

Fas配体在膀胱肿瘤细胞系免疫逃逸中的作用

目的　探讨膀胱肿瘤细胞系的免疫逃逸机制。　方法　采用免疫细胞化学方法检测膀胱癌细胞系BIU 87中Fas配体 (FasL)的表达 ,应用BIU 87与JurkatT淋巴细胞共培养的方法体外研究FasL诱导T淋巴细胞凋亡的作用。　结果　膀胱癌细胞系BIU 87FasL表达阳性。BIU 87与JurkatT淋巴细胞共培养T细胞凋亡率为 (33.2± 6 .5 ) % ,应用抗体NOK 2中和BIU 87细胞FasL后 ,T细胞凋亡率减少为 (10 .1± 2 .7) % ,两组相比 ,差别有非常显著性意义 (P <0 .0 1)。　结论　膀胱肿瘤细胞系可能通过表达FasL主动诱导T淋巴细胞凋亡从而在膀胱肿瘤的免疫逃逸中发挥作用