限制性片段长度多态性分析拉米夫定治疗引起乙型肝炎病毒耐药基因变异的研究

目的　应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析方法 (PCRRFLP) ,研究拉米夫定治疗引起慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒耐药基因 (HBVDNA)变异。方法　收集 2 4 0例用拉米夫定治疗 5 2～ 78周慢性乙型肝炎患者的血清标本 ,应用PCRRFLP方法扩增HBV 5 5 2 ,5 2 8两个基因位点片段 ,用限制性内切酶NdeⅠ ,NlaⅢ酶切分析 ,同时测定HBVDNA含量 ,并用DNA序列分析测定 3例患者HBVDNAP区基因序列 (1例野毒株 ,1例M5 5 2V伴L5 2 8M变异 ,1例M5 5 2I变异 )。结果　 2 4 0例患者应用拉米夫定治疗 5 2～ 78周后 ,5 1例血清HBVDNA出现YMDD变异 ,其中M5 5 2V变异 38例 ,M5 5 2I变异 13例 ,L5 2 8M和M5 5 2V同时变异 2 6例 ,L5 2 8M和M5 5 2I同时变异 1例。与定量PCR比较 ,可以测定YMDD变异的最低含量为 1× 10 4 copies mlHBVDNA序列分析结果与RLFP测定一致。结论　PCRRLFP方法是一种快速、简便的检测HBVDNA聚合酶变异的方法 ,可以用来筛查大量的血清标本 ,适宜作为临床用来观察拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者检测HBV变异的方法     

MRI联合3D—CE—MRA在布-加综合征中的诊断价值

目的探讨磁共振成像（MRI）联合3D—CE—MRA在布-加综合征中的诊断价值。方法回顾性分析经手术治疗的布-加综合征患者资料14例，术前均经MRI常规检查及三期增强扫描并行3D—CE—MRA重建，复习布-加综合征在MRI及3D—CE—MRA上的影像学表现并和手术作对照。结果14例中，单纯肝后段下腔静脉狭窄2例，单纯主肝静脉狭窄1例，肝后段下腔静脉合并主肝静脉狭窄11例，肝内侧支循环11倒，肝外侧支循环10例，门静脉扩张5例，肝脏增大12例，其内信号不均匀，尾状叶增大9例，脾脏增大5例，腹水3例。膜性狭窄5例，阶段性狭窄9例。先天性狭窄或阻塞7例，血栓引起狭窄1例，肿瘤受侵及血管内癌栓3例，肿瘤受压1例，血肿受压1例。MRI对14例布-加综合征的定位、分型及周围结构关系与手术所见一致，其准确性、敏感性及特异性均达到100％。MRI反映肝硬化的各种信号特点与病理相近。结论MRI联合3D—CE—MRA能够显示布-加综合征的各种征象，并能做出正确的诊断和分型，能够鉴别和区分引起布-加综合征的确切病因。     

先天性胆总管囊肿并发肝脏损害的磁共振诊断及病理分析

目的分析先天性胆总管囊肿并发肝脏损害的磁共振（MRI）诊断价值及病理基础。方法用SIEMENSSONATA1．5T超导磁共振扫描机，采用平均矢状位自旋回波序列（SE）T1WI，快速自旋回波序列（FSE）T2WI，True fisp（真稳态自由进动快速成像），MRCP（磁共振水成像）及二乙三胺五乙酸乳（Gd—DTPA）增强检查，回顾性分析12例先天性胆总管囊肿并发肝脏损害的MRI表现，结合手术及文献对其病理基础进行分析。结果MRI对12例先天性胆总管囊肿的定位、分型及周围结构关系与手术所见一致，其准确性、敏感性及特异性均达到100％。7例出现并发肝脏损害后肝硬化改变，占总病例的58．3％，MRI反映肝硬化的各种信号特点与病理结果相近。结论MRI作为无创性检查手段，能够对先天性胆总管囊肿的形态、部位及与周围结构关系作出准确诊断，可以对肝脏损害并发肝硬化作出较好的评价，并能反映其病理特征。     

干扰素诱导抗病毒蛋白基因多态性与慢性丙型肝炎疗效相关性研究

目的探讨α-干扰素（IFN-α）诱导的黏病毒抵抗蛋白（MxA）和真核细胞起始因子调节区2（eIF-20α-reg2）基因的单核苷酸多态性（SNP）与慢性丙型肝炎（CHC）患者对IFN-α治疗应答的关系。方法前瞻性研究216例CHC患者，在接受IFN-α联合利巴韦林治疗48周，随访至停药后24周时，评价疗效[分为持续性应答（SVR）和非持续性应答（NSVR）]。应用多聚酶链反应（PCR）及限制性片段长度多态性（RFLP）法检测患者MxA启动子-88（G／T）、-123（C／A）及eIF-20α-reg2（MG）位点的SNP，并比较SNP与IFN疗效的关系。结果MxA 88位点：GT与GG型患者SVR（57．43％对34．21％）比较，差异有统计学意义（χ^2=9．37，P〈0．01）；TT与GG型患者SVR（66．67％对34．21％）比较，差异有统计学意义（χ^2=9．37，P〈0．01）。而GT与TT型患者SVR比较（57．43％对66．67％），差异无统计学意义（χ^2=1．00，P〉0．05）；MxA-123位点、eIF-20α-reg2位点基因型与IFN疗效比较：差异均无统计学意义（χ^2=4．87，P〉0．05；χ^2=1．66，P〉0．05）。多因素Logist回归分析结果显示：病毒载量（OR=3．178，95％CI：1．463～6．904，P=0．003）、干扰素种类（OR=3．117，95％CI：1．484～6．544，P=0．003）对SVR的独立影响具有统计学意义。MxA-88基因型（OR=1．470，95％CI：0．646～3．345，P=0．358）对SVR的独立影响无统计学意义。结论CHC患者MxA-88为TT或GT型者比GG型者对IFN-α应答好，但不是影响SVR的独立因素。     

前列腺肉瘤3例的MRI诊断

目的总结前列腺肉瘤的MRI影像学表现。方法回顾性分析3例经病理证实的前列腺肉瘤的MRI征象,结果平滑肌肉瘤2例,神经源性肉瘤1例。3例前列腺体积都不同程度的明显增大,前列腺正常结构消失,中央叶、周围带结构显示不清,前列腺特异性抗原（PSA）检查结果均正常。2例呈团块状,1例呈分叶状,肿瘤内都有不同程度的坏死、结论MRI影像学表现结合PSA检查结果诊断前列腺肉瘤有较高价值．     

经支气管动脉灌注化疗治疗中晚期肺癌200例

目的评价经支气管动脉灌注化疗（BAI）治疗中晚期肺癌的临床疗效及影响疗效的因素。方法200例原发性肺癌患者进行560次BAI,采用Seldinger技术插管,找到支气管动脉开口,手推造影证实为靶血管且无脊髓动脉显影后,经导管缓慢推注化疗药物。结果200例肺癌患者,完全缓解（CR）58例,部分缓解（PR）96例,稳定（NC）30例,进展（PD）16例。总有效率（CR＋PR）为77％,无严重并发症发生。结论经支气管动脉灌注化疗是治疗中晚期肺癌的一种有效方法,可使肿瘤缩小,提高患者的生存率,改善患者症状,提高生活质量。但还存在一些影响疗效的因素。     

乙型肝炎病毒X基因原核表达载体的构建及蛋白表达

[目的] 构建和表达乙型肝炎病毒x基因原核表达载体，获得重组HBx蛋白。[方法] 用PCR方法扩增含有EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的X基因序列，分别以pMD18-T载体和pET32a（＋）载体构建pMD18-T-HBX克隆载体和pET32a-HBX原核表达载体，随后把pET32a-HBX转化大肠杆菌BL-2l进行诱导表达和纯化，Western blot检测原核表达的HBx蛋白的免疫活性。[结果] 经IFFG诱导后可见分子量约38KD的融合蛋白表达；表达的蛋白主要以包涵体形式存在；Western blot结果表明HBx融合蛋白具有较好的免疫活性。[结论] HBVX基因的克隆表达及其融合蛋白的纯化。为研究HCC患者血清中HBx蛋白和抗-HBx抗体滴度水平奠定了坚实的基础。     

基于日常检测结果的核酸扩增检测假阳性统计室内质量控制方法

目的建立一种利用核酸扩增检验实验室日常检测数据进行定性测定假阳性监测的实验室室内质量控制方法。方法以实验室日常不少于20次检测的阳性率比值为基础,计算阳性率比值的均值(x)和标准差(s),绘制质控图,以1+2S为“告警”规则,1+3S和3+2S为失控规则。结果对实验室212次HBVDNA聚合酶链反应(PCR)实测数据分析,x和s分别为0.527和0.078,与前20次测定的x(0.532)和s(0.09)相近。212次测定中,出现5次超出x±2s,按照所定的质控规则有两次失控。符合统计上的正态分布。结论为核酸扩增常规检测提供了一种具有可操作性的假阳性统计室内质控方法。