异基因移植患者RQ-PCR监测巨细胞病毒感染并指导抢先治疗的临床研究

本研究旨在评价血浆巨细胞病毒（CMV）-DNA实时荧光定量PCR（RQ-PCR）用于异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）患者cMV感染的诊断监测和指导抢先治疗的I临床作用及特点。通过回顾性统计2008年1月至2010年6月在我院血液科行allo-HSCT的141例患者的病例资料及cMV检测数据并随访至移植后180d,分析患者特征、RQ-PCR检测结果、CMV感染及治疗情况和相关危险因素。结果显示,患者CMV感染和CMV肺炎发生率为81．5％和2．9％,主要发生在移植后2个月内。发生CMV感染后63例患者接受单药更昔洛韦、6例接受单药膦甲酸钠抢先抗病毒治疗,治疗的总有效率为87．8％,并表现出不同的疗效反应模式。女性、预处理中使用ATG或巴利昔单抗以及发生急性移植物抗宿主病（GVHD）的患者更容易感染CMV。使用ATG或巴利昔单抗以及发生急性GVHD的患者中CMV感染发生的时间更早（P〈0．05）。急性GVHD、病毒DNA最大负荷量、阳性次数及治疗疗程与疗效有关（P〈0．05）。结论：allo-HSCT患者的CMV感染发生率仍然很高,RQ-PCR检测血浆CMV-DNA与临床转归有很强的相关性,是监测allo-HSCT患者CMV感染情况并指导抢先抗病毒治疗的有效方式。     

57例非胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤患者临床特点和疗效分析

目的 进一步了解非胃黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤患者的临床特点并探讨合理的治疗方法.方法 回顾性分析57例经病理确诊的非胃MALT淋巴瘤患者资料,对其临床特点和治疗疗效进行分析.结果 57例患者中,男32例、女25例,中位年龄58(14 ～86)岁,常见发病部位为肺及支气管(17例,29.8％)、肠道(16例,28.1％)、涎腺(8例,14.0％)、眼及附属器(7例,12.3％)等.临床分期为Ⅰ～Ⅱ期者35例(61.4％),Ⅲ～Ⅳ期者22例(38.6％),淋巴结受累者26例(45.6％),多个结外器官受累者7例(12.5％).56例接受治疗的患者完全缓解率为66.0％,总反应率85.7％.中位随访时间52个月,患者5年总生存(OS)率和5年无疾病进展生存(PFS)率分别为91.6％和77.7％.单纯手术组、单纯化疗组、手术+化疗、手术+化疗+放疗组5年OS率分别为87.5％、100.0％、90.2％和100.0％,5年PFS率分别为62.3％、80.0％、90.2％和75.0％,差异无统计学意义.单纯手术者复发率高(22.3％).结论 非胃MALT淋巴瘤起病呈播散性,患者治疗反应率高,预后好,各种治疗方法的OS率差异无统计学意义,但单纯手术者复发率高.     

多中心性巨大淋巴结增生症六例报道并文献复习

目的 回顾性分析6例多中心性巨大淋巴结增生症(MCD)患者的诊断与治疗方法,并就相关文献进行分析.方法 6例初次诊断的MCD患者,采用干扰素和(或)联合化疗方案治疗.详细记录并分析其临床表现、实验室检查结果及治疗反应.结果 6例患者均为HIV阴性,其中4例病理学分型为浆细胞型,2例为混合型;6例均表现为多部位浅表淋巴结肿大、多克隆免疫球蛋白增多、低白蛋白血症.干扰素治疗2例,其中1例完全缓解,另1例激素及联合化疗效果均不满意,采用干扰素治疗3个月达到持续的部分缓解;其他4例采用联合化疗,其中1例死于疾病进展,3例部分缓解.结论 干扰素及联合化疗是最方便有效的治疗MCD的方法;血清白蛋白水平降低是MCD的诊断和监测指标.     

电穿孔转染K562细胞的效率研究

目的:探讨脂质体转染与电穿孔转染的效率,观察电转染对K562细胞凋亡的影响。方法:以GFP为报告基因,通过脂质体转染及电穿孔两种方式转染K562细胞,荧光显微镜下观察并计算转染效率,Annexin V和PI观察细胞凋亡率。结果:电转染较脂质体转染K562细胞的效率高,电穿孔转染效率10%左右,脂质体转染效率小于1%。电穿孔时K562细胞凋亡率为40%。结论:电转染较脂质体转染K562细胞的效率高,但细胞凋亡率也高。     

国内首例非亲缘供者外周血造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血

目的:探讨非亲缘供者外周血造血干细胞移植(UD-PBSCT)治疗重型再生障碍性贫血(SAA)的可行性。方法:采用HLA-A 1个位点亚型不相合非亲缘供者的外周血造血干细胞治疗1例病程6年的SAA患者。预处理方案为环磷酰胺、足叶乙甙和抗人胸腺球蛋白,以霉酚酸酯、环孢菌素A、CD25单克隆抗体加短疗程的甲氨喋呤预防移植物抗宿主病(GVHD)。结果:移植后22 d中性粒细胞达到0.998×109/L,33 d血小板计数≥20×109/L,50 d血小板升至52×109/L,61 d血红蛋白升至104 g/L,无GVHD发生,移植后无病存活时间已达8个月。结论:UD-PBSCT可以使SAA患者短期内获得造血重建,可以作为治疗的选择。     

单次与两次自体造血干细胞移植治疗血液肿瘤的远期结局比较：150例资料回顾

目的:对没有与供者HLA配型相合的血液恶性肿瘤患者来说,自体造血干细胞移植不失为一种积极有效的治疗方法。评价比较单次与两次自体造血干细胞移植治疗血液肿瘤的效果。方法:①实验对象:选取1988～2001年解放军总医院血液科行自体造血干细胞移植的150例患者,对本实验均知情同意。其中两次自体移植25例(两次骨髓移植3例、两次外周血造血干细胞移植1例、1次骨髓移植 1次外周血造血干细胞移植21例),单次自体移植125例(骨髓移植44例、外周血造血干细胞移植81例);急性非淋巴细胞白血病75例,急性淋巴细胞白血病43例,非霍奇金淋巴瘤22例,霍奇金淋巴瘤10例。②实验方法:应用化疗使白血病患者在移植前达到完全缓解,淋巴瘤患者要求移植前至少骨髓中没有肿瘤累及。动员化疗方案原则上采用对相应肿瘤有效的联合化疗方案,并适当增加剂量。骨髓移植及外周血造血干细胞移植患者回输单核细胞中位数分别为2.68×108/kg,4.20×108/kg。115例患者采用环磷酰胺/全身放疗方案,35例患者采用不含全身放疗的高剂量化疗方案。③实验评估:自体造血干细胞移植5年后血液肿瘤患者的无病存活率。结果:①急性非淋巴细胞白血病:69例患者单次移植,5年无病存活率58.0%(40例),复发率29.0%(20例),移植相关死亡率13.0%(9例)。6例患者两次移植,其中1例M5患者复发死亡,5例无病存活。②急性淋巴细胞白血病:29例患者单次移植,5年无病存活率34.5%(10例),复发率34.5%(10例),移植相关死亡率31.0%(9例)。14例患者两次移植,5年无病存活率42.9%。③非霍奇金淋巴瘤:18例患者单次移植,5年无病存活率61.1%(11例),复发率16.7%(3例),移植相关死亡率22.2%(4例)。4例患者两次移植,其中1例CR1期患者在首次移植后21个月复发,化疗获得PR后行第2次自体造血干细胞移植,17个月后复发死亡;其余3例均无病存活。④霍奇金淋巴瘤:9例患者单次移植,5年无病存活率100%。1例患者行两次移植,首次移植前13个化疗疗程未缓解,行自体外周血造血干细胞移植后达到部分缓解,9个月后行自体骨髓移植后完全缓解,无病存活。结论:①自体造血干细胞移植是治疗血液肿瘤安全有效的方法。②自体造血干细胞两次移植5年无病存活率明显优于单次移植效果,可改善血液肿瘤患者预后。     

DNA抑制因子4作为急性淋巴细胞白血病临床复发前报告因子的可行性初探

本研究探讨以DNA抑制因子4作为急性淋巴细胞白血病（ALL）复发前报告因子的可行性。以骨髓持续完全缓解6—8个月的ALL患者为研究对象，应用甲基化特异性聚合酶链反应（MS—PCR）对经诱导缓解和巩固强化后持续完全缓解的32例ALL患者进行DNA抑制因子4启动子区甲基化状况分析，并随诊3个月以上。结果发现，32例完全缓解的ALL患者中20例（62．5％）DNA抑制因子4呈甲基化。12例DNA抑制因子4呈非甲基化的患者中只有1例3个月内复发，复发率8．33％，20例DNA抑制因子4呈甲基化状态的患者中10例3个月内复发，复发率50％。DNA抑制因子4甲基化与ALL患者初诊时是否具有高危因素并不完全相关。结论：DNA抑制因子4可作为ALL患者临床复发前的报告因子。     

蛋白质芯片技术检测异基因造血干细胞移植患者血浆IL-4和IL-6含量变化及其与aGVHD关系探讨

本研究旨在通过动态观察异基因造血干细胞移植患者血浆中IL-4和IL-6含量的变化，探讨其变化与急性移植物抗宿主病（aGVHD）发生的关系。采用蛋白芯片方法对32例行异基因外周血造血干细胞移植的住院患者的外周血细胞因子IL-4和IL-6的含量进行10周的动态观察。结果发现：IL-4含量在aGVHD组患者移植后第1周迅速增加，显著高于无aGVHD组（P〈0．05）；而在无aGVHD组，在移植后的第7周，血浆IL-4含量大幅增加，显著高于aGVHD组（P〈0．01）。IL-6含量在移植前两组患者即存在显著差异（P〈0．05）。在移植后的第1周，aGVHD组患者血浆IL-6上升达到最高水平，显著高于无aGVHD组（P〈0．01），而在无aGVHD组，在移植后的第4周IL-6含量非常显著高于aGVHD组（p〈0．01），在移植后的第5周，IL-6显著高于aGVHD组（P〈0．05）。结论：IL-4和IL-6在异基因造血干细胞移植后含量突然升高提示即将发生aGVHD；移植前高水平的IL-6可能是移植后aGVHD高发的危险因素；无aGVHD的患者，如果血浆几4含量增高，提示可能有相对延迟的aGVHD出现。通过对IL-4和IL-6含量的动态观察以预测aGVHD发生，这一技术可能是一个颇具前景的研究方向。     

急性移植物抗宿主病病人Th细胞亚群变化及其临床意义

本研究探讨异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后急性移植物抗宿主病（aGVHD）时Th细胞亚群的数量变化及其临床意义。观察了23例allo-HSCT患者aGVHD的发病情况,aGVHD的诊断主要依据临床表现,对部分病例进行了皮肤活检,取得病理学依据。移植前后定期采集23例患者的外周血,采用流式细胞仪检测其Th细胞亚群Th1、Th2细胞比例的变化。结果表明：23例患者8例发生了aGVHD,其中3例Ⅰ度,2例Ⅱ度,3例Ⅲ度aGVHD,15例未发生aGVHD。流式细胞术检测显示,发生aGVHD患者的Th1细胞量明显高于未发生aGVHD患者（p〈0.01）,Ⅱ-Ⅲ度aGVHD患者Th1细胞的IFN-γ表达明显高于未发生aGVHD患者（p〈0.01）,而Th2细胞的IL-4表达明显低于未发生aGVHD患者,动态观察发现在aGVHD发生前和发生后未治疗的患者Th1细胞明显增高,治疗后明显下降,而未发生aGVHD的患者移植前后Th1细胞量变化不大。结论：发生aGVHD患者Th1细胞明显增多,且这种增多与aGVHD有关。因此,移植后早期动态监测Th细胞亚群Th1量的变化有助于aGVHD的诊治。     

自体造血干细胞移植治疗急性淋巴细胞白血病43例:远期疗效分析

目的：异基因造血干细胞移植治疗急性淋巴细胞白血病的疗效已不容置疑，在不具备异基因造血干细胞移植条件下，评价自体造血干细胞移植治疗急性淋巴细胞白血病的疗效。 方法：选取1989—05／2000—07解放军总医院血液科43例急性淋巴细胞白血病患者，所有患者均同意行自体造血干细胞移植。中位年龄24．5（11～48）岁。单次移植29例，其中移植前首次完全缓解期23例，二次缓解期5例，未缓解期1例。双次移植14例，其中首次移植和第二次移植前为二次缓解期各1例，其余移植前均为首次完全缓解期。预处理方案：包括含全身放疗（26例）、全淋巴放疗（14例）与不含全身放疗的高剂量化疗方案（3例）。移植后治疗：化疗长春新碱＋泼尼松／6-巯基嘌呤＋甲氨蝶呤方案和白细胞介素2免疫维持治疗。 结果：单次自体造血干细胞移植29例5年无病存活10例，其中移植前首次完全缓解期9例，二次缓解期1例。5年无病存活率34．5％。双次移植14例5年无病存活6例，5年无病存活率为42．9％。两次移植前均为首次完全缓解期。 结论：在不具备异基因造血干细胞移植条件下，可采用自体造血干细胞移植治疗急性淋巴细胞白血病，双次自体造血干细胞移植疗效较好。