miR-155过表达髓核细胞IncRNA表达谱芯片分析及对凋亡功能的影响

目的探讨在椎间盘退变过程中miR-155过表达髓核细胞IncRNA对凋亡功能的影响及机制。方法采用miR-155慢病毒载体过表达人椎间盘细胞髓核细胞,IncRNA芯片检测并通过基因组数据库(Ensemble)筛选出可能通过miR-155参与髓核细胞凋亡调控的IncRNA;将筛选出的GAS5 IncRNA转染髓核细胞,流式细胞术检测过表达GAS5 IncRNA后髓核细胞的凋亡情况;Western印迹法检测线粒体通路上两个关键凋亡相关蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3和B淋巴细胞瘤/白血病(Bcl)-2的表达情况。结果经IncRNA芯片分析共发现630个差异表达IncRNA,其中381个IncRNA表达上调、249个IncRNA表达下调。Ensemble显示,GAS5 IncRNA共包含有30个转录本,本次IncRNA芯片分析获得了13个转录本表达情况,均呈下降趋势,其中GAS5-016转录下调差异有统计学意义(Fc值≥1.5,P0.05)。GAS5 IncRNA过表达髓核细胞后,流式细胞术分析显示,GAS5 IncRNA过表达组髓核细胞早期凋亡率明显高于阴性对照组(P0.05);GAS5 IncRNA过表达组髓核细胞中Caspase-3蛋白表达水平明显高于阴性对照组,Bcl-2蛋白表达水平明显低于阴性对照组(均P0.05)。结论 IncRNA在人退变椎间盘髓核细胞凋亡中发挥重要作用,GAS5 IncRNA过表达可上调Caspase-3表达并下调Bcl-2表达同时激活细胞内的线粒体凋亡通路,促进髓核细胞凋亡;miR-155可能参与了GAS5 IncRNA调控髓核细胞凋亡的过程,但二者的相互调控机制仍需进一步研究。     

富血小板血浆调节滑膜炎保护软骨细胞

文题释义：富血小板血浆：是自体生长因子的来源,通过自体全血梯度离心得到。富血小板血浆于1993年Hood等首先提出这一概念,并发现富血小板血浆中含有正常血浆3倍以上的血小板和丰富的生长因子,如血小板衍生生长因子、胰岛素样生长因子、表皮生长因子和血管内皮生长因子等。基质金属蛋白酶：是一类分解细胞外基质组分的锌蛋白酶。它们在有机体生长发育中的细胞外基质逆转与重塑以及疾病中的病理损害起着极为重要的作用。基质金属蛋白酶的表达和活性在不同细胞水平受到严密调控,如细胞因子、生长因子以及激素的调节,基质金属蛋白酶以酶原形式分泌,随后被其他蛋白酶如胞浆素或非蛋白酶类化学物质如有机汞所激活。背景：研究证实,滑膜炎分泌的炎症因子通过加速关节软骨的分解代谢而成为骨性关节炎发展的主要原因,基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶13在骨性关节炎中起关键作用。目的：探究富血小板血浆治疗骨性关节炎的有效作用机制。方法：分离并提取大鼠膝关节滑膜细胞和软骨细胞分别培养,腹主动脉取血制备富血小板血浆制剂。将滑膜细胞分为空白对照组和大肠杆菌脂多糖处理组,脂多糖处理组用脂多糖刺激滑膜细胞制造滑膜炎模型;再将滑膜炎细胞分为富血小板血浆处理组和未处理组(脂多糖组)。对照组、富血小板血浆处理组和未处理组3组细胞培养24 h后,用ELISA法检测培养基中炎性细胞因子白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的水平,另一部分培养基分别处理软骨细胞,培养48 h后,Western blot 检测软骨细胞内Ⅰ型、Ⅱ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶13蛋白水平的变化,荧光定量PCR检测基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶13 mRNA表达水平的变化。结果与结论：①ELISA检测显示,脂多糖处理组滑膜细胞培养基中白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的水平显著高于对照组和富血小板血浆处理组(P < 0.01);富血小板血浆处理组培养基中白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的水平高于对照组(P < 0.05);②Western blot检测显示,富血小板血浆处理组软骨细胞中Ⅰ型、Ⅱ型胶原蛋白显著高于对照组和脂多糖处理组(P < 0.01),脂多糖处理组低于对照组(P < 0.05);③脂多糖组基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶13蛋白显著高于富血小板血浆处理组和对照组(P < 0.01);④PCR检测显示脂多糖组基质金属蛋白酶3,13 mRNA显著高于富血小板血浆处理组和对照组;⑤结果表明,富血小板血浆处理能够通过降低滑膜细胞炎性因子白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的水平,降低软骨细胞中基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶13的蛋白和mRNA水平,增加Ⅰ型、Ⅱ型胶原蛋白的表达而发挥保护软骨的作用。ORCID: 0000-0002-0704-4511(陈尉)中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

补肾健脾活血中药干预膝骨关节炎模型大鼠软骨细胞IL-1β/ERRα/SOX9/Col2α1信号通路的变化

文题释义：膝骨关节炎：是一种以膝关节软骨退变、破坏和骨质增生为主要特征的慢性关节病,多患于中老年人群,主要表现为膝关节疼痛,上下楼梯时疼痛加重,休息后缓解,局部肿胀,活动受限,晚期膝关节畸形,严重影响患者的生活质量。雌激素：主要由卵巢分泌,分泌的雌激素进入血液循环发挥生物学效应,妇女绝经后卵巢功能衰退,雌激素分泌减少从而诱发膝骨关节炎。背景：膝骨关节炎是最常见的退行性关节疾病,其发病率和致残率高,已严重影响患者的生活质量。研究发现,补肾健脾活血中药能够改善膝骨关节炎临床症状,但其具体机制仍未阐明。目的：通过膝骨关节炎去势大鼠模型研究补肾健脾活血中药调节IL-1β/ERRα/SOX9/Col2α1信号通路治疗大鼠膝骨关节炎的作用机制。方法：6月龄SD雌性大鼠,随机分为空白对照组、模型组、实验组和阳性对照组,模型组、实验组和阳性对照组摘除卵巢及切除交叉韧带和内侧半月板制作去势大鼠膝骨关节炎模型,术后2周实验组采用补肾健脾活血中药灌胃,阳性对照组采用塞来昔布胶囊灌胃,空白对照组和模型组以生理盐水灌胃。连续灌胃6周后取血清及膝关节软骨组织,采用ELISA检测血清雌二醇含量,分别采用荧光定量PCR和Western blot检测关节软骨组织中IL-1β/ERRα/SOX9/Col2α1信号通路表达水平。结果与结论：与空白对照组比较,模型组白细胞介素1β表达量明显升高,雌二醇、雌激素受体相关受体α、SRY相关蛋白9、Ⅱ型胶原的α1链表达量明显降低(P < 0.05);与模型组比较,实验组白细胞介素1β表达量明显降低(P < 0.05),雌二醇、雌激素受体相关受体α、SRY相关蛋白9、Ⅱ型胶原的α1链表达量明显升高(P < 0.05);与阳性对照组比较,实验组白细胞介素1β、雌激素受体相关受体α及Ⅱ型胶原的α1链表达量明显升高(P < 0.05),SRY相关蛋白9表达量明显降低(P < 0.05)。实验结果表明,IL-1β/ERRα/SOX9/Col2α1信号通路参与膝骨关节炎软骨病变,补肾健脾活血中药可通过该机制发挥治疗作用。ORCID: 0000-0002-5449-3942(霍少川)中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

组蛋白去甲基化酶JMJD2在绝经后骨质疏松症表达分析

目的观察绝经后骨质疏松症患者组蛋白去甲基化酶JMJD2家族的变化及其对组蛋白甲基化(H3K9me3、H3K36me3)水平的影响,揭示组蛋白去甲基化酶JMJD2家族与绝经后骨质疏松症的关系,为骨质疏松症的诊治提供新的思路。方法选择年龄50至70岁因髋关节骨性关节炎行关节置换的绝经后患者,通过检测腰椎骨密度,收集10例绝经后骨质疏松症患者(实验组)和10例非骨质疏松症患者(对照组),术中提取股骨头松质骨标本,免疫组织化学、蛋白质印迹法检测骨组织中组蛋白去甲基化酶(JMJD2A、JMJD2B)和组蛋白甲基化(H3K9me3、H3K36me3)表达。结果绝经后妇女JMJD2A、JMJD2B表达为弱阳性到阳性不等,骨质疏松症患者组表达水平低于非骨质疏松症患者组,组间差异具有统计学意义(P0.05);骨质疏松症患者组H3K9me3、H3K36me3表达水平高于非骨质疏松症患者组,组间差异具有统计学意义(P0.05)。结论绝经后骨质疏松症与组蛋白高甲基化状态相关,组蛋白去甲基化酶JMJD2A、JMJD2B能够降低骨质疏松的发生,组蛋白去甲基化酶JMJD2A、JMJD2B可能作为绝经后骨质疏松症的一种拮抗酶。     

补肾壮骨颗粒对去势骨质疏松大鼠血脂代谢指标的影响

目的探讨补肾壮骨颗粒对去势骨质疏松大鼠血脂代谢指标的影响。方法 30只7月龄SD雌性大鼠随机分成对照组、模型组、中药低剂量组、中药高剂量组、福善美组。治疗8周后,分别收集左侧股骨和血清的骨矿含量、骨密度和血脂代谢指标检测。结果模型组的骨矿含量和骨密度低于对照组(P0.05);对照组、中药高剂量组与福善美组骨密度高于模型组和中药低剂量组(P0.05),而对照组、中药高剂量组与福善美组之间比较差异无统计学意义。模型组甘油三酯(TG)、胆固醇(CH)高于对照组(P0.05),高密度脂蛋白(HDL)低于对照组(P0.05)。中药高剂量组甘油三酯低于模型组(P0.05),而模型组、中药低剂量组与福善美组之间比较差异无统计学意义。中药高剂量组高密度脂蛋白高于模型组、中药低剂量组与福善美组(P0.05)。结论去势大鼠存在血脂代谢异常,补肾壮骨颗粒可改善血脂代谢异常状态,有一定的预防作用,提高骨矿含量和骨密度。     

关节康膏治疗膝骨关节炎42例的近期疗效观察

目的：观察关节康膏治疗膝骨关节炎的近期疗效。方法：将84例膝骨关节炎患者随机分为对照组与治疗组,每组42例。对照组患者予塞来昔布胶囊口服,治疗组患者予关节康膏口服,疗程均为4周。观察比较两组患者HSS评分、VAS评分、膝关节活动度、等速肌力测试指标及临床疗效。结果：对照组脱落7例,治疗组剔除3例、脱落2例。对照组总有效率为82.86%(29/35),治疗组总有效率为86.49%(32/37),两组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。治疗4周后,两组患者HSS评分、膝关节活动度均较治疗前增加,差异均有统计学意义（P<0.05）;两组患者治疗后HSS评分、膝关节活动度比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。治疗4周后,两组患者VAS评分均较治疗前降低（P<0.05）,且治疗组患者治疗后VAS评分低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗4周后,两组患者屈肌峰力矩、伸肌峰力矩、平均功率均较治疗前升高（P<0.05）,且治疗组患者治疗后伸肌峰力矩、平均功率均高于对照组（P<0.05）;两组患者治疗后屈肌峰力矩比较,差异无统计学意义（P&g...