三肽基肽酶Ⅱ在依赖主要组织相容性复合物I类分子内源性抗原提呈中的作用

三肽基肽酶Ⅱ（TPPⅡ）对不同依赖MHC-Ⅰ类分子的内源性抗原提呈过程有不同的作用,对某些内源性抗原提呈过程无明显影响,但能促进或抑制另一些内源性抗原的提呈过程。此文对TPPⅡ的生物学特征和在依赖MHC-Ⅰ类分子的内源性抗原提呈中的作用进行综述,从而为感染性疾病、肿瘤等疾病的治疗提供新的思路。     

微创治疗肩手综合征的研究进展

<正>肩手综合征（shoulder-hand syndrome,SHS）又称反射性交感神经营养不良（reflex sympathetic dystrophy,RSD）,国际疼痛学会又将SHS归属为复杂性局部疼痛综合征Ⅰ型（complex regional pain syndrome,CRPS-Ⅰ）。肩手综合征一般作为脑卒中、脑损伤、心肌梗死、上肢创伤、颈椎病等疾病的并发症而出现,上述病程中,     

高糖对缺氧神经元的影响及钙相关机制研究

研究高糖对神经元缺氧的影响,并探讨其钙相关机制.利用SD大鼠大脑皮质神经元体外缺氧模型,通过对细胞活力的检测,观察浓度分别为22.7(对照组),30,40,50,60(高糖组)mmol/L的葡萄糖对神经元缺氧的影响;以Fura-2/Am为荧光指示剂,测定细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i.结果发现当培养基中葡萄糖浓度达到60 mmol/L时,高糖可引起缺氧神经元损伤;与对照组相比,有钙介质与无钙介质中静息[Ca2+]i均升高,P＜0.01;但对照组与高糖组在有钙介质中对氯化钾(KCl)、谷氨酸(Glu)刺激引起的[Ca2+]i升高无明显差异,P＞0.05;在无钙介质中,对氯化钙(CaCl2)引起的[Ca2+]i增高率无明显差别,P＞0.05.本研究表明:高糖对神经元的损伤作用可能与其促进细胞内钙离子释放,诱发细胞内钙超载有关.     

伴钙黏蛋白1基因突变的遗传性弥漫型胃癌

遗传性弥漫型胃癌是一种常染色体显性遗传病,以胃弥漫型印戒细胞癌和乳腺小叶癌为特征。该综合征的遗传基础是编码E-钙黏蛋白的钙黏蛋白1( CDH1)基因的胚系突变。该患者为年轻女性,胃体后壁、胃体前壁见印戒细胞癌,外周血行基因二代测序检测显示 CDH1基因第10外显子存在杂合性突变,经多学科协作讨论后,...     

黄芩素对顺铂抑制卵巢癌A2780细胞增殖的影响

目的体外检测黄芩素对顺铂抑制卵巢癌A2780细胞增殖的影响及其机制。方法选择对数生长期A2780细胞,采用CCK-8法分别检测黄芩素对A2780细胞的毒性、有黄芩素和无黄芩素作用下顺铂对A2780细胞的半数抑制浓度(IC₅₀)差异、在细胞缝隙连接(GJ)通道功能抑制剂18-α-甘草次酸(18-α-GA)的作用下顺铂对A2780细胞抑制率的变化以及增加黄芩素对顺铂作用的影响,使用细胞接种荧光示踪法检测黄芩素对A2780细胞GJ通道功能的影响。利用GEO公共数据库,比较卵巢正常上皮组织和卵巢癌上皮组织中编码Cx43的GJA1基因表达的差异。利用蛋白免疫印迹法检测黄芩素对A2780细胞中Cx43蛋白表达的影响。利用Swiss Target Prediction数据库预测黄芩素的靶蛋白,并构建靶蛋白与GJ通道的互作网络。结果当黄芩素≤10.00μmol/L,其对A2780细胞无明显毒性。与单用顺铂比较,10.00μmol/L黄芩素可增加顺铂对A2780细胞的抑制率(P <0.01)。GEO公共数据库分析显示,卵巢癌上皮组织中GJA1 mRNA的表达水平低于卵巢正常上...     

滇重楼环阿屯醇合酶基因的克隆及序列分析

目的 获取滇重楼甾体皂苷合成途径关键酶环阿屯醇合酶基因(PpCAS)的全长cDNA序列,并进行序列分析.方法 利用同源克隆和RT-PCR技术获得PpCAS基因保守片段,采用RACE技术获得PpCAS基因的3'及5'末端序列,并采用生物信息学方法进行序列分析.结果 PpCAS基因全长cDNA为2 309 bp,其开放阅读框(ORF)为2 283 bp,可编码760个氨基酸的蛋白质;PpCAS推导的蛋白质相对分子质量为8.69×104,等电点(pI)为6.54;其氨基酸序列与GenBank中其他植物CAS的同源性在60％～83％ PpCAS蛋白.结论 从滇重楼中首次获得PpCAS基因cDNA全长序列,该基因具有CAS同源基因的典型特征.     

滇重楼鲨烯合酶基因PpSQS的克隆及在大肠杆菌中的表达

目的: 克隆滇重楼鲨烯合酶(squalene synthase,SQS)基因(PpSQS),对该基因进行序列分析及原核表达。 方法: 采用同源克隆和RACE技术获得PpSQS的cDNA,并对其进行生物信息学分析;构建原核表达载体pET-30b(+)-PpSQS,在大肠杆菌Escherich coli BL21(DE3)中进行诱导表达。 结果: PpSQS基因cDNA全长1 498 bp,包含1个1 212 bp的开放阅读框(ORF),可编码403个氨基酸;PpSQS理论标准分子质量为46.36 kDa,等电点为pI 6.83;SDS-PAGE分析表明,经1 mmol·L^-1 IPTG诱导后,重组PpSQS蛋白在大肠杆菌中获得表达。 结论: 首次获得了滇重楼PpSQS基因cDNA全长序列,该基因编码产物具有植物SQS同源蛋白的典型特征,实现重组PpSQS在大肠杆菌中的表达。     

预测T4a期胃癌腹膜转移危险因素的列线图模型的建立与验证

目的探究T_4a期胃癌发生腹膜转移的危险因素,以此为训练组构建列线图模型,并进行内验证及外验证。 方法回顾性分析2011年1月至2017年12月394例行胃切除术+D2淋巴结清扫术影像学诊断为T_4a期胃癌患者的临床资料,其中将2011年1月至2015年12月224例患者作为训练集,2016年1月至2017年12月170例患者作为验证集。根据术前影像学表现判断有无腹膜转移并且最终经病理资料证实,采用SPSS 24.0软件通过t检验、秩和检验或卡方检验对发生腹膜转移的危险因素进行统计学分析,经单因素和多因素Logistic回归筛选T_4a期胃癌患者发生腹膜转移的潜在危险因素,采用R软件（版本4.0.2）建立列线图模型。采用Bootstrap法进行内验证,采用ROC曲线评价模型的符合度并计算95%CI,绘制校准曲线评价模型的符合度。绘制DCA曲线评价模型的临床获益度。 结果224例训练集患者中,共37（16.5%）例患者发生腹膜转移,验证集患者中23（13.5%）例患者发生腹膜转移,多因素分析显示糖类抗原125（CA125）、腹水、术前白蛋白（ALB）和肿瘤分化程度是胃癌患者发生腹膜转移的独立危险因素。绘制ROC曲线结果提示,内部训练集AUC曲线下面积为0.783（95%CI：0.699-0.867）,外部验证集AUC曲线下面积为0.848（95%CI：0.763-0.932）;且以此建立的列线图模型具有良好的区分度、校准度和临床获益度。 结论基于4个独立危险因素的列线图模型对T_4a期胃癌患者腹膜转移的发生具有良好的区分度和校准度,可用于术前对T_4a期胃癌患者腹膜转移风险进行评估,具有一定的临床推广和参考价值。     

黄芩素对人子宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用

目的:探讨黄芩素对人子宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用及可能机制。方法:采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测黄芩素对HeLa细胞生长的抑制作用;Hoechst 33258荧光染色法观察黄芩素对HeLa细胞凋亡的诱导作用;比色法测定黄芩素对HeLa细胞内caspase-3活性的影响。结果:不同浓度黄芩素作用24、36、48h后均可抑制HeLa细胞生长(P<0.05~P<0.01);黄芩素作用24h后,HeLa细胞凋亡率增加(P<0.01),细胞内caspase-3活性增强(P<0.05~P<0.01)。结论:黄芩素能抑制HeLa细胞生长,其机制可能与诱导细胞凋亡及增强caspase-3活性有关。