标准大骨瓣减压结合脑-硬脑膜-肌肉血管重建术对术后硬脑膜下积液的疗效分析

目的 探讨标准大骨瓣减压(SLTC)结合脑-硬脑膜-肌肉血管重建术对重型颅脑损伤(STBI)患者术后硬脑膜下积液的疗效.方法 回顾性分析都昌县人民医院神经外科2017年11月—2019年11月60例STBI患者,依据手术方式不同分为对照组(28例)与观察组(32例).对照组采用SLTC,观察组采用SLTC结合脑-硬脑膜...     

滇重楼环阿屯醇合酶基因的克隆及序列分析

目的 获取滇重楼甾体皂苷合成途径关键酶环阿屯醇合酶基因（PpCAS）的全长cDNA序列,并进行序列分析。方法 利用同源克隆和RT-PCR技术获得PpCAS基因保守片段,采用RACE技术获得PpCAS基因的3’及5’末端序列,并采用生物信息学方法进行序列分析。结果 PpCAS基因全长cDNA为2 309 bp,其开放阅读框（ORF）为2 283 bp,可编码760个氨基酸的蛋白质;PpCAS推导的蛋白质相对分子质量为8.69×10⁴,等电点（pI）为6.54;其氨基酸序列与GenBank中其他植物CAS的同源性在60%～83% PpCAS蛋白。结论 从滇重楼中首次获得PpCAS基因cDNA全长序列,该基因具有CAS同源基因的典型特征。     

血脂异常中医病因病机及辨证论治初步探讨

文章通过古今文献研究,对血脂异常中医病因病机及辨证论治进行了初步探讨,指出血脂异常的病因为嗜食肥甘厚味,暴饮暴食,饮酒过度,脾、肝、肾三脏虚损;病机核心是脾失运化,肝失疏泄,肾失气化;病理产物为内湿、痰浊、瘀血。血脂异常乃本虚标实之证,本虚为脾虚,累及肝、肾,其标为内湿、痰浊、瘀血流注于血脉,痰瘀互结,以致脉道不畅。中医治疗可以从脾、肝、肾入手,施以健脾益气、疏肝理气、补肾填精、化瘀祛痰之法。     

(Ⅲ)国产单硝酸异山梨醇酯对异丙肾上腺素引起大鼠心肌损伤的保护作用

本文用腹腔注射异丙基肾上腺素(Iso)造成大鼠心肌缺血性损伤模型,研究了国产单硝酸异山梨醇酯(ISMN)对大鼠心肌损伤的影响。ISMN能降低Iso引起的S-T段抬高,减少心肌肌酸磷酸激酶(CPK)的丢失;其口服给药的作用强度与二硝酸异山梨醇酯(ISDN)相似。实验结果提示国产ISMN对Iso引缺的心肌缺血性损伤有保护作用,其机理可能包括对心肌本身的直接作用。     

一种快速可靠筛选作用于细胞缝隙连接药物的方法建立

目的建立一种可以快速有效地筛选能影响细胞缝隙连接(gap junction,GJ)功能药物的方法;为研制以GJ为靶点的新型药物提供技术手段。方法构建能同时双向表达两种不同连接蛋白(connexins,Cxs)的质粒;用能表达Cx26/Cx32的质粒转染HeLa细胞,建立可以稳定表达Cx26/Cx32并形成异质性GJ的HeLa细胞模型。用荧光传递示踪法测定荧光示踪剂在细胞之间的传递,以此反映GJ的功能。观察公认的GJ激活剂——维甲酸(retinoid acid,RA)和GJ抑制剂——油酸酰胺(oleamide)对GJ功能的影响,检验该方法是否能够准确地检测出GJ功能。结果 Western blot和荧光传递示踪法的结果表明,转染含有Cx26/Cx32 cDNA质粒的HeLa细胞,可以稳定表达Cx26/Cx32;并能够形成可以传递荧光示踪剂在相邻细胞间的GJ。RA和油酸酰胺能分别增强和抑制荧光示踪剂的传递。结论在转染Cx26/Cx32质粒并稳定表达Cxs的HeLa细胞上,用荧光传递示踪法测定GJ功能,可以快速准确地检测出药物对GJ的作用。该方法的建立为筛选作用于GJ的药物提供了一种有用的技术手段。     

低位直肠癌保留部分肛提肌重建盆底的改良经肛提肌外腹会阴联合切除手术

目的 探讨低位直肠癌保留部分肛提肌重建盆底的改良经肛提肌外腹会阴联合切除(ELAPE)手术操作的技术要点和临床效果.方法 2018年1月至2019年12月于南京大学医学院附属鼓楼医院胃肠外科收治的不能保肛的低位直肠癌患者,按腹腔镜直肠癌根治术常规清扫和分离,至肿瘤平面时根据肿瘤位于直肠的部位,分离健侧直肠系膜与肛提肌;...     

缝隙连接蛋白43组成的缝隙连接对依托泊苷抗肿瘤作用的影响

背景与目的:缝隙连接能够增强化疗药物的细胞毒性,但缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)组成的缝隙连接对依托泊苷抗肿瘤作用的影响尚不清楚。因此,本研究拟观察睾丸癌细胞中Cx43对依托泊苷抗肿瘤作用的影响。方法:采用细胞接种荧光示踪实验检测睾丸癌细胞由Cx43形成的缝隙连接通讯功能,同时检测不同的药物(18-α-甘草次酸及维甲酸)和Cx43干扰RNA对缝隙连接功能的影响;采用标准细胞集落形成分析法检测睾丸癌细胞中由Cx43形成的缝隙连接通讯功能改变后,对依托泊苷抑制肿瘤细胞生长作用的影响。结果:荧光示踪实验显示18-α-甘草次酸可显著降低缝隙连接通讯功能,而维甲酸则可增强缝隙连接功能;Cx43干扰RNA能够显著抑制缝隙连接功能。标准细胞集落形成实验结果表明,在缝隙连接形成的睾丸癌细胞中,18-α-甘草次酸显著降低依托泊苷对睾丸癌细胞生长的抑制作用,而维甲酸则增强依托泊苷对睾丸癌细胞生长的抑制作用;应用Cx43干扰RNA能够显著降低依托泊苷对睾丸癌细胞生长的抑制作用。结论:睾丸癌细胞中Cx43形成的缝隙连接通讯功能降低能够减弱依托泊苷的抗肿瘤作用;而缝隙连接通讯功能增强能够增强其抗肿瘤作用。     

MKP-1增强组蛋白去乙酰化酶抑制剂对脑胶质瘤干细胞敏感性及其作用机制

目的 探讨MKP-1对组蛋白去乙酰化酶抑制剂（histone deacetylase inhibitors,HDACi）作用脑胶质瘤干细胞（glioma stem cells,GSC）敏感性的影响及可能的作用机制。方法 收集武汉市第三医院神经外科2016年1月至2018年12月收治的53例脑胶质瘤患者肿瘤及健康脑组织。RT-PCR检测MKP-1表达,分离并培养脑胶质瘤干细胞,采用MTT实验检测HDACi MS-275作用脑胶质瘤干细胞的IC₅₀。以MKP-1过表达质粒转染干细胞构建差异表达MKP-1的脑胶质瘤干细胞模型,MTT实验分析HDACi MS-275的敏感性,CCK-8实验检测细胞增殖情况,RT-PCR及Western blot实验检测肿瘤干细胞相关因子SOX2、SOX9的表达,Western blot实验检测p38、JNK、ERK1/2的表达。结果 MKP-1在脑胶质瘤组织中的表达较健康脑组织明显降低（P<0.001）。HDACi MS-275作用GSC的IC₅₀为（55.12±7.31） nmol/mL,作用后细胞增殖能力较对照组明显降低（P<0.001）,MKP-1表达明显升高（P<0.001）。HDACi MS-275作用过表达MKP-1脑胶质瘤干细胞的IC50较对照组和空白组明显降低（P<0.001）。MKP-1组GSC增殖能力,SOX2、SOX9 mRNA和蛋白表达量均较对照组和空白组明显降低（P<0.001）。MKP-1组JNK和p38表达较均对照组和空白组降低（P<0.001）,但ERK1/2表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 脑胶质瘤干细胞对HDACi的敏感性与MKP-1表达有关,MKP-1可能通过调控SOX2、SOX9、p38、JNK而影响脑胶质瘤干细胞对HDACi的应答。     

维生素D_3-β-环糊精包合物的稳定性考察

目的：考察维生素环糊精包合物中维生素D3的稳定性。方法：以正相高效液相色谱法测定维生素D3含量测定,薄层层析法分析分解产物。采用3000 Lx 光照、80 ℃与40 ℃, RH=76%和RH=92.5%条件下放置,考察含量改变。结果：维生素D3在光、热下极不稳定,含量迅速下降,薄层层析明显可见多个分解产物;与维生 素D3比较,D3-β-环糊精(D3-β-CD)包合物的抗热、抗光和抗湿热等稳定性均有 显著提高（P<0.01）。结论：将维生素D3制成D3-β-CD包合物是提高其稳定性的有效方法。     

血管紧张素Ⅱ对培养乳鼠非心肌细胞DNA及蛋白合成的影响

ＡｕｇⅡ作为一种独立于血液动力学及神经体液因子，对哺乳动物心脏细胞的直接作用尚未完全清楚。本实验中，我们观察了ＡｕｇⅡ对培养心脏的非心肌细胞的作用，结果表明：在培养的非心肌细胞，ＡｕｇⅡ引起蛋白合成、ＤＮＡ合成及细胞数目的明显增加，但不影响细胞的体积。ＡｕｇⅡ在非心肌细胞诱导的ＤＮＡ合成受ＡｕｇⅡ受体拮抗剂［Ｓａｒ１，Ｖａｌ５，Ａｌａ８］－ＡｕｇⅡ完全抑制、这些结果提示：（１）ＡｕｇⅡ诱导心脏非心肌细胞的增殖；（２）ＡｎｇⅡ的上述作用通过ＡＴ１受体亚型调控。