66例急性胰腺炎患者中血清IL-22诊断及其临床意义

[目的]探讨急性胰腺炎患者血清白细胞介素-22(IL-22)的水平及意义.[方法]采用酶联免疫吸附法检测66例急性胰腺炎患者和60例同期住院的非胰腺疾病患者血清IL-22的水平.[结果]急性胰腺炎患者血清IL-22水平显著高于对照组,与患者的年龄及性别无关,重症胰腺炎患者血清IL-22水平高于轻度胰腺炎患者.[结论]急性胰腺炎患者血清IL-22的水平较对照组增加,且与病情严重程度相关,可作为急性胰腺炎诊断和病情评估的潜在生物学靶点.     

造血干细胞移植前清髓及非清髓性照射预处理对小鼠血管内皮的影响

目的 探讨在造血干细胞移植前清髓及非清髓性全身照射(TBI)预处理对小鼠血管内皮的影响.方法 将6～8周龄雌性Balb/c小鼠随机分为正常对照组(正常小鼠)、致死剂量TBI组(~(60)Co 8.5 Gy)和减低剂量TBI组(~(60)Co 5.0 Gy).TBI后定期观察小鼠的生存状态,计数外周血白细胞;采用流式细胞术检测外周血中内皮细胞和内皮祖细胞的变化;通过病理切片及透射电镜观察小鼠小肠及肝脏的组织结构和血管内皮的超微结构.结果 致死剂量TBI组小鼠外周血白细胞减少,同时内皮细胞及内皮祖细胞增加,与正常小鼠相比,差异有统计学意义(P<0.05).减低剂量TBI组小鼠外周血白细胞先降后升,内皮细胞与内皮祖细胞同样也出现增加,与正常小鼠相比,差异有统计学意义(P<0.05);与致死剂量TBI组比较,其外周血内皮细胞和内皮祖细胞增加幅度明显降低(P<0.05).两个TBI组小鼠的病理切片均可见肝脏实质细胞水肿及小肠炎症细胞浸润,肝脏的超微结构可见血管内皮完整性受损,致死剂量TBI组受损更为显著.结论 清髓及非清髓性剂量TBI预处理均可引起小鼠血管内皮早期损伤,其损伤程度与剂量相关,且外周血中内皮细胞的变化可以反映血管内皮损伤的程度.     

小鼠adam10基因启动子克隆和双荧光素酶报告基因系统构建及鉴定

本研究旨在克隆小鼠adam10基因启动子,构建以adam10基因启动子为启动序列的双荧光素酶报告基因系统并分析其活性,为研究adam10基因转录调控提供有效工具。以BALB/c小鼠脑组织为模板,采用PCR方法克隆小鼠adam10基因启动子序列至pCR-Blunt载体,酶切后连接至荧光素酶报告质粒pGL4.10启动子区域,构建重组荧光素酶报告质粒pGL4.10-adam10,采用阳离子脂质体法与阳性对照质粒pGL4.74共转染真核细胞293FT,以离子霉素刺激为刺激组、DMSO为未加干预组,同时以不含启动子的pGL4.10与阳性对照质粒pGL4.74共转染组为阴性对照组,化学发光仪检测荧光强度及比例。结果表明,酶切及测序验证克隆的adam10启动子序列正确且无突变,构建的重组荧光素酶报告质粒pGL4.10-adam10与阳性对照质粒pGL4.74载体成功共转染293FT细胞,pGL4.10-adam10转染细胞后具有转录活性。离子霉素刺激组活性明显高于DMSO组,荧光比值约为DMSO组2倍(P<0.05),阴性对照组不具备转录活性。结论:成功克隆了adam10启动子并构建了重组荧光素酶报告质粒pGL4.10-adam10,离子霉素可增强adam10基因启动子转录活性。     

慢病毒载体介导的鼠基因工程调节性T细胞对小鼠移植物抗宿主病的作用研究

目的 通过慢病毒载体介导的鼠叉状头螺旋转录因子(Foxp3)基因表达构建鼠基因工程调节性T细胞(Tr),探讨输注基因工程Tr细胞对小鼠异基因骨髓移植后移植物抗宿主病(GVHD)的影响.方法 利用慢病毒载体介导,将鼠Foxp3基因转导入BALB/c小鼠的CD4+CD25-T淋巴细胞,即为基因工程Tr细胞.建立小鼠异基因骨髓移植模型,在移植时联合输注基因工程Tr,通过受鼠移植后生存期、组织病理学改变、炎性细胞因子浓度等指标评价其防治GVHD的作用.并与单纯照射组、移植对照组、空载体对照组相比较.结果 单纯照射组、移植对照组、工程Tr组和空载体对照组小鼠存活时间分别为(8.8±0.6)d、(36.7±2.5)d、(51.6±4.0)d和(34.1±2.3)d,工程Tr组小鼠存活时间明显长于其他各组(P＜0.05).移植对照组及空载体对照组小鼠肝脏、皮肤和小肠病理切片均存在GVHD病理改变,工程Tr组长期存活小鼠的肝脏、皮肤和小肠常规病理切片结构基本正常,未见GVHD病理表现.移植后移植对照组、工程Tr组、空载体对照组受鼠血清IFN-γ、IL-2和TNF-α浓度在21～28 d时达高峰,工程Tr组在21 d时IFN-γ、IL-2和TNF-α浓度高峰较其他两组为低(P＜0.05).结论 小鼠异基因骨髓移植时联合输注基因工程Tr细胞可通过减少受鼠移植后炎性细胞因子的分泌有效减少GVHD的发生,减轻其严重程度.     

竞争抑制0610009E02Rik长链非编码RNA重组腺病毒穿梭载体的构建与鉴定

目的 构建可竞争抑制肝细胞内0610009E02Rik长链非编码RNA(lncRNA)的重组腺病毒穿梭载体,为探索0610009E02Rik/Notch1在肝静脉闭塞病(HVOD)肝细胞损伤修复中的作用提供有效实验方法.方法 采用基因组DNA提取试剂盒对截取的C57BL/6小鼠尾进行基因组DNA的提取,通过PCR扩增出0610009E02Rik与Notch1基因第34个外显子重叠的1 000 bp基因序列,并连接入经BamHⅠ/Nhe Ⅰ双酶切后的腺病毒穿梭载体GV359;竞争抑制0610009E02Rik lncRNA重组腺病毒穿梭载体与辅助包装质粒pBHG共转染HEK293细胞,并对竞争抑制0610009E02Rik lncRNA重组腺病毒进行包装、扩增,采用氯化铯(CsCl)不连续密度梯度离心与连续密度梯度离心2个步骤对重组腺病毒进行浓缩纯化,并对重组腺病毒滴度进行测定;测定不同感染复数(MOI)竞争抑制0610009E02Rik lncRNA重组腺病毒感染肝细胞株H2.35的感染效率,并采用实时聚合酶链反应(RT-PCR)与Western blotting对竞争抑制0610009E02Rik lncRNA重组腺病毒感染肝细胞株H2.35与同步培养的对照肝细胞中竞争抑制0610009E02Rik lncRNA片段、Notch1 mRNA及0610009E02Rik lncRNA相对表达水平及其蛋白表达水平,并进行统计学分析.结果 ①经基因序列比对分析发现0610009E02Rik与Notch1的第34个外显子存在分子量为1 000 bp的重叠序列,依据0610009E02Rik与Notch1基因序列设计含BamH Ⅰ/Nhe Ⅰ酶切位点特异性引物,通过PCR扩增出片段长度为1 000 bp的0610009E02Rik与Notch1基因第34个外显子重叠序列的竞争抑制0610009E02Rik lncRNA片段,DNA测序结果显示竞争抑制0610009E02Rik lncRNA重组腺病毒穿梭载体与理论预期序列构建成功.②将竞争抑制0610009E02Rik lncRNA重组腺病毒穿梭载体转染HEK293细胞后第12天,约90％细胞出现细胞病变(CPE),收集细胞获取病毒液.浓缩纯化病毒液经梯度稀释在感染HEK293细胞后第10天,于显微镜下观察稀释梯度1∶ (10～1010)均出现CPE,病毒滴度约为5.01×109 PFU/mL.③当竞争抑制0610009E02Rik lncRNA重组腺病毒MOI为80,感染肝细胞株H2.35 48 h后感染效率高达95％.收集经竞争抑制0610009E02Rik lncRNA重组腺病毒感染后肝细胞,通过RT-PCR检测竞争抑制0610009E02Rik lncRNA片段相对表达水平为同步培养肝细胞株H2.35对照的3.13±0.83倍,且差异有统计学意义(P=0.047);Notch1 mRNA相对表达水平为对照细胞的(0.38±0.08)倍,且差异亦有统计学意义(P=0.010);0610009E02Rik lncRNA相对表达水平为对照细胞的(1.04±0.26)倍,但差异无统计学意义(P＞0.05).经Western blotting检测发现,重组腺病毒感染后肝细胞Notch1蛋白表达水平较对照肝细胞减低,与Notch1 mRNA相对表达水平检测结果相一致.结论 成功构建竞争抑制0610009E02Rik lncRNA重组腺病毒穿梭载体,重组腺病毒感染肝细胞H2.35后,可下调肝细胞内Notch1 mRNA表达水平及其蛋白表达水平,这为HVOD肝细胞损伤修复的深层机制研究奠定实验数据基础.     

康惠尔敷料治疗压疮的疗效观察

目的:观察康惠尔敷料对患者压疮的治疗效果,为临床上压疮治疗提供依据。方法:将46例并发有压疮患者随机分为对照组和实验组,每组23例,实验组采用康惠尔外贴创面治疗,对照组采用传统的方法治疗,评估两组治愈率及治愈时间,观察两组压疮生长及愈合情况。结果:实验组治愈率(73.9%)显著高于对照组(34.8%),两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组治愈时间显著短于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:相较于常规治疗手段,康惠尔敷料可提高压疮患者治愈率,缩短治愈时间,值得临床推广使用。     

miR-322对大鼠高原性肺动脉高压的作用及机制研究

目的 探讨miR-322对高原肺动脉高压发生发展的影响及作用机制。方法 SPF级雄性SD大鼠40只,随 机数字表法分为4组（n=10）,即常氧组、低氧组、空白病毒+低氧组（空载体组）,miR-322抑制+低氧组（miR-322沉默 组）,剔除实验过程中死亡大鼠后常氧组 10 只,低氧组、空载体组、miR-322 沉默组各 9 只。测定肺动脉氧分压 ［p（O2 ）］和平均肺动脉压（mPAP）;HE染色观察肺组织变化;免疫荧光观察组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达变 化;实时荧光定量PCR检测大鼠肺组织中miR-322和apelin mRNA基因表达;Western blot法检测大鼠肺组织中apelin 蛋白的表达。结果 低氧组和空载体组肺动脉p（O2 ）、mPAP和肺组织各项指标差异均无统计学意义。与常氧组比 较,低氧组mPAP、α-SMA、apelin mRNA和蛋白以及miR-322 mRNA相对表达量均升高,p（O2 ）下降（P＜0.05）;肺组织 破坏严重,大量炎症细胞浸润。与低氧组比较,miR-322 沉默组 mPAP 和 miR-322 mRNA 相对表达量均下降,α- SMA、p（O2 ）以及apelin mRNA和蛋白相对表达量上升（P＜0.05）;肺组织损伤程度降低。结论 抑制miR-322表达可 促进高原肺动脉高压模型大鼠apelin的表达,进而降低高原肺动脉高压的上升程度。     

西达本胺对急性T淋巴细胞白血病CD8+T细胞的调控作用研究

目的：探讨西达本胺对急性T淋巴细胞白血病CD8+T细胞的调控作用。方法：通过荧光定量PCR检测西达本胺处理的Jurkat细胞、淋巴细胞、与西达本胺处理的Jurkat细胞共培养的淋巴细胞的CXCL9、CXCL3 m RNA表达水平。通过流式细胞术检测西达本胺处理的淋巴细胞、与西达本胺处理的Jurkat细胞共培养的淋巴细胞中CD8+T细胞的比例。结果：西达本胺上调Jurkat细胞系CXCL9的m RNA表达，上调水平呈剂量依赖（r=0.950），西达本胺5μmol/L组的CXCL9 m RNA表达是无处理组的164倍。西达本胺上调淋巴细胞CXCL9的m RNA表达，上调水平明显低于同浓度西达本胺处理的Jurkat细胞系。与西达本胺处理的Jurkat细胞共培养，可以上调淋巴细胞中CD8+T细胞的比例。结论：急性T淋巴细胞白血病中，西达本胺可能通过上调肿瘤细胞CXCL9的表达，增加肿瘤微环境中CXCL9的浓度，导致CD8+T细胞数量的增加。     

幽门螺杆菌阴性消化性溃疡临床特征及与出血关系的临床研究

消化性溃疡(PU)是一种常见的慢性消化系统疾病,主要包括十二指肠溃疡、胃溃疡或复合性溃疡等,病因复杂.大量研究已证明幽门螺杆菌(Hp)感染是引起PU的重要病因之一,但随着国内外日益重视根除Hp,Hp相关性溃疡的发病率逐步下降,而Hp阴性PU的发病率日益增加[1].Hp阴性PU是指通过呼气试验、病理等检查排除Hp感染,且经过内镜证实黏膜损伤程度超过3 mm的溃疡[2].目前发现,Hp阴性PU有较严重的溃疡病变、较长时间的抗酸治疗和较高的死亡率[1,3].PU较常见的并发症是出血,且Hp阴性PU可能更容易并发出血[4].为进一步了解Hp阴性PU的特征及其与出血的关系,本文为此作进一步探讨,现报告如下.     

新形势下南疆军队医院防范恐怖袭击的策略

当前新形势下,新疆“三股势力”空前膨胀,特别是南疆地区,“三期叠加”的态势没有根本改变,高压“严打”下暴恐事件仍然居高不下,多发、频发且有一定升级态势,政府、公安、军队等国家机关常常是暴恐分子袭击的目标.军队医院作为一个开放式单位,为一级军事医疗单位,“平时应诊、急时应急、战时应战”是其根本宗旨;一方面要担负所辖区域官兵的医疗保健和卫勤保障;另一方面,还要负责所在驻地老百姓的医疗就诊服务.因此,军队医院又不同于一般国家机关,具有更易遭受恐怖袭击的潜在性[1].如何保证军队医院本身不被恐怖分子袭击,是当前南疆军队医疗机构面临的现实而紧迫的课题.笔者在援疆期间走访调查了几所军队医院,分析了这些医院防范恐怖袭击的难点,并就应当采取的策略以及对防范恐怖袭击的具体措施提出一些建议.