MYH基因变异与散发性大肠癌发病风险的初步研究

背景与目的：初步探讨MYH（MutY homologue,MYH）基因的变异与散发性大肠癌发病风险的关系。材料与方法：应用变性高效液相色谱（denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC）和测序技术,对140例大肠癌患者及280名正常对照人群的MYH基因16个外显子区域中的7个（外显子1、7、9、11、13、14和16）区域进行变异筛查,用SPSS统计软件进行数据分析。结果：Exon1区域的变异位点为Exonl-316 G〉A、Exonl-292 G〉A和Intronl＋11 C〉T,3者同时出现在所有变异样本中,且病例组变异危险性均为对照组的8．16倍（P=0．04;OR=8．16,95％C／为1．01—203．70）;Exon16区域的变异为nt1678—80delGTF,病例组中直肠癌患者的变异危险性为结肠癌患者的7．18倍（P=0．04;OR=7．18,95％C／为1．102～165）;Exon11区域查出4例Intron10—2A〉G变异;Exon13区域筛查出2例In．on13＋12C〉T变异;Exon14区域筛查出1种错义变异,即Exon14＋74T〉A,P．V463E;Exon7和Exon9区域未筛查出任何变异。结论：MYH变异可能会增加结直肠癌发病风险,应进行监测管理;未筛查到高加索人群中最常见的Exon7区域的变异,提示人种之间变异存在差别。     

应用差别PCR检测石蜡包埋乳腺癌组织癌基因扩增时固定剂影响的研究

应用差别ＰＣＲ检测石蜡包埋乳腺癌组织癌基因扩增时固定剂影响的研究陈森清，马国建，吴建中，薛开先（江苏省肿瘤防治研究所南京２１０００９）癌基因扩增在人类肿瘤发生和演进中起着重要的作用，检测Ｃ─ｅｒｂＢ─２基因扩增对乳腺癌预后有重要的参考价值，差别聚合酶...     

大肠癌Kai-1/CD82基因外显子9区域突变的研究

背景与目的:探讨Kai-1/CD82基因外显子9区域的突变在结直肠癌演进与转移中的意义.材料与方法:提取40例结直肠癌患者的肿瘤组织(24例无淋巴结转移,16例有淋巴结转移)DNA和RNA,PCR扩增DNA,测序判断Kai-1/CD82基因中外显子9区域的突变情况;RT-PCR后经测序Kai-1/CD82基因外显子9缺失情况.结果:40例组织标本中18例出现Kai-1/CD82基因突变;在有淋巴结转移的结直肠癌组织中,突变的频率明显高于无淋巴结转移的结直肠癌组织(P＜0.05),在大肠癌中晚期(Dukes C/D期)明显高于早期(Dukes A/B期)(P＜0.05),而Kai-1/CD82基因的突变频率与结直肠癌患者的年龄,性别,组织学类型以及分化程度无关(P＞0.05).结论:Kai-1/CD82基因突变可能与大肠癌演进、转移有关,检测其突变,可以为判断预后、指导临床治疗提供实验依据.     

应用等位基因特异性PCR和多重差别PCR检测肺癌患者CYP1A1和GSTM1的遗传多态性

本文对等位基因特异性ＰＣＲ（Ａｌｅｌｅｓｐｅｃｉｆｉｃ,ＡＳ）和多重差别（Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌ,ＭＤ）ＰＣＲ技术进行了优化,并用此法联合检测了１０５例江苏地区健康人群及６８例肺癌患者ＣＹＰ１Ａ１、ＧＳＴＭ１的等位基因型。结果表明：ＡＳＰＣＲ及ＭＤＰＣＲ采用的设立双参照扩增体系,可一次同时检测ＣＹＰ１Ａ１和ＧＳＴＭ１的等位基因型。在肺癌患者组中,ＣＹＰ１Ａ１的突变型Ｖａｌ／Ｖａｌ的频率１２／６８（１７．６％）约为健康组９／１０５（８．５７％）的２０５倍,而ＧＳＴＭ１纯合缺失的频率,肺癌组为３９／６８（５７３％）,与健康对照组４２／１０５（４０％）相比,亦有显著增加（Ｐ＜０．０５）。     

人胚细胞提取物拮抗环磷酰胺诱发小鼠骨髓微核的研究

本文研究了人胚细胞提取物（胚提物）对小鼠自发和环磷酰胺（ＣＰ）诱发骨髓嗜多染细胞（ＰＣＥ）微核的影响．结果表明：①胺腔注射０．３，３和３０ｍｇ／ｋｇ．体重的胚提物，小鼠骨髓ＰＣＥ微核率（ＭＮＦ）与对照组相比无显著差异．②ＣＰ可诱发ＰＣＥ的ＭＮＦ显著增加（Ｐ＜０．０１）．③注射ＣＰ和上述剂量的胚提物，可使ＭＮＦ呈剂量依赖性下降，当剂量达３和３０ｍｇ／ｋｇ．体重时，ＭＮＦ下降显著（Ｐ＜０．０５和＜０．０１）．上述结果提示；胚提物无诱发小鼠骨髓微核作用，而对ＣＰ诱发小鼠ＰＣＥ微核则有拮抗作用，这一结果在临床肿瘤化疗上有潜在的应用价值．     

差别PCR技术及检测卵巢癌C—erbB2癌基因扩增的研究

环境化学品和药物的反复处理，可引起人和哺乳动物细胞的抗化性和抗药性的形成，这常是癌基因的扩增结果；在肿瘤细胞中常自发癌基因扩增，这在肿瘤发生演进中起重要作用．以往多采用印迹转移和斑点杂交法进行检测．费时成本高，还需接触放射线．本文报告了简便的差别PCR(D-PCR)技术．对人卵巢癌C0erbB2(HER-2/neu)癌基因的扩增进行检测，并与印迹转移法进行比较，其主要方法与结果如下：     

鲁吡替康致突变性研究

背景与目的:研究鲁吡替康(9NC)的致突变作用.材料与方法:采用微核实验,研究9NC体外对人淋巴细胞和体内对小鼠骨髓嗜多染红细胞(polychromatic erythrocytes,PCE)的诱变作用;采用小鼠抑瘤实验,研究9NC对小鼠移植瘤S180和Heps的肿瘤抑制作用.结果:9NC分别在体外≤0.187μg/ml及体内≤0.375 mg/kg剂量范围内,不诱发人淋巴细胞微核和小鼠骨髓PCE微核的增加(P＞0.05),但对小鼠移植瘤S180(肉瘤)和Heps(肝癌)有抑制作用;在剂量≥0.25μg/ml(体外)和≥0.75 mg/kg(体内)时,9NC可引起人外周血淋巴细胞微核和小鼠骨髓PCE微核的显著增加(P＜0.01),有明显的遗传毒性.结论:9NC在最大安全耐受剂量内具备致突变性.     

非小细胞肺癌组织与癌旁组织SEMA3B基因甲基化分析

目的分析非小细胞肺癌组织与癌旁组织SEMA3B基因启动子区甲基化状况。方法用甲基化特异PCR(MSP)法检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织及癌旁组织标本23例,用克隆测序验证。结果非小细胞肺癌组织标本中SEMA3B基因启动子区有19例(82.6%,19/23)发生异常甲基化,相对应的癌旁组织标本中有18例(78.3%,18/23)发生异常甲基化,但与发病年龄、性别、病理分化无关。结论非小细胞肺癌组织与癌旁组织都表现出SEMA3B基因启动子区异常甲基化,癌旁组织细胞中发生SEMA3B基因启动子异常甲基化可能要早于细胞的恶性增生。     

差别PCR技术及检测卵巢癌C－erb－B2癌基因扩增的研究

癌基因的扩增见于多种人类肿瘤，有预后价值。本文报告了应用差别（Ｄ－）ＰＣＲ技术，检测人卵巢癌组织Ｃ－ｅｒｂ－Ｂ２基因拷贝数的改变。在这一技术中，靶基因（Ｃ－ｅｒｂ－Ｂ２基因）和单拷贝参照基因（ＩＦＮＧ），在同一反应管中进行扩增，靶基因拷贝数为靶基因和参照基因扩增产物带晁密度的比值。在本组１１例卵巢癌标本中，有１例存在Ｃ－ｅｒｂ－Ｂ２癌基因低拷贝数的扩增，并对１０份送检的卵巢肿瘤组织和同源正常组织同时作印迹转变分析，和Ｄ－ＰＣＲ检测结果一样，未发现有Ｃ－ｅｒｂ－Ｂ２癌基因的扩增。Ｄ－ＰＣＲ检测癌基因的扩增快速、简便，无需应用放射性同位素，具有较好的应用价值。