乙肝标志物模式与HBV-DNA定量的比较分析

目的 :探讨乙型肝炎标志物模式与 HBV-DNA复制水平之间的关系。方法 :采用 EL ISA法检测乙型肝炎病毒标志物 ,采用荧光定量探针 PCR法 ( fluorogenic quantitative PCR,F Q-PCR)检测 HBV-DNA。结果 :310例血清标本中 ,H Bs Ag,HBe Ag,H Bc Ab( +)组的平均拷贝数为 10 7.32± 1 .2 8,阳性率为 10 0 % ;H Bs Ag,HBe Ab,HBc Ab( +)组的平均拷贝数为10 4 .6 9± 1 .4 0 ,阳性率为 47% ;H Bs Ag,H Bc( +)组的平均拷贝数为 10 5.0 4± 1 .4 3,阳性率为 5 0 % ;HBe Ab,HBc( +)组的平均拷贝数为 10 4 .94± 2 .72 ,阳性率为 11.8% ;HBs Ab ( +)组的平均拷贝数为 10 4 .71± 1 .56 ,阳性率为 14 .3% ;阴性组的平均拷贝数为10 4 .38± 1 .2 8,阳性率为 12 .5 %。HBs Ag,HBe Ag,HBc Ab( +)组的平均拷贝数显著高于其它各组。结论 :FQ-PCR可以更为清楚地反映乙肝患者的病程变化情况及更为真实地反映 HBV的感染和复制情况 ,对临床诊断、治疗及判断预后具有重要的指导意义。     

胸苷激酶1在肿瘤疾病中的应用研究

胸苷激酶（TK,ATP：thymidine5′-phosphotransferase,EC.2.7.1.21,简称TK）是DNA合成过程中的关键酶之一,在ATP和Mg2＋参与下,催化脱氧胸苷（TdR）为脱氧1-磷酸胸苷酸（dTMP）。TK在人类细胞中以两种同功酶形式存在：细胞质胸苷激酶（TK1）和线粒体胸苷激酶（TK2）。TK1与DNA复制密切相关,在细胞周期G1期含量较低,S期逐渐升高,到G2期最高,临床研究证明,TK1在95%的恶性肿瘤细胞中都有升高,故TK1被认为是一种极具生命潜力的细胞增殖标志物,它在肿瘤早期发现、肿瘤疗效评估、肿瘤预后判断等方面都有广阔的临床应用前景。有鉴于此,本文就TK1在肿瘤疾病中的应用研究作一简要综述。     

中国人自身免疫性肝病相关性 CTLA-4基因多态性研究

目的　探讨细胞毒性 T细胞相关抗原 - 4 (cytotoxic T lymphocyte- associated antigen- 4 ,CTL A- 4 )基因启动子 - 318和第 1外显子区第 4 9位基因多态性与中国人自身免疫性肝炎 (autoimmunehepatitis,AIH)、原发性胆汁性肝硬化 (primary biliary cirrhosis,PBC)发病的相关性。方法　应用限制性片段长度多态性方法分析 6 2例 AIH和 77例 PBC患者外周血单核细胞基因组 DNA CTL A- 4启动子 -318T/ C、第 1外显子区第 4 9位基因 A/ G多态性 ,并与 16 0名正常对照比较。结果　 AIH组 CTL A- 4启动子 - 318位 T/ C基因型分布与对照组比较差异无显著性 ,但 C等位基因频率明显高于正常对照组 (P=0 .0 2 ,OR=2 .4 3)。 PBC患者 CTL A- 4第 1外显子区第 4 9等位基因分布与正常对照组比较差异非常显著(P=0 .0 0 6 ) ,PBC患者 G等位基因频率明显高于正常组 (P=0 .0 0 4 6 ,OR=1.8)。联合分析 CTL A- 4启动子与第 1外显子的基因多态性分布 ,虽然 AIH组和 PBC组 GG- CC型携带率均比正常人高 (AIH组 :32 .3% ,PBC组 :37.7% ,对照组 :2 2 .5 % ) ,但是统计学分析结果均显示两组患者与正常人差异无显著性。结论　 CTL A- 4启动子 - 318和第 1外显子区第 4 9位基因多态性可能与中国人 AIH、PBC易感性相关。     

过敏性紫癜患儿基质金属蛋白酶-9水平的变化及临床意义

目的 通过检测过敏性紫癜(HSP)和紫癜性肾炎(HSPN)患儿血清和尿液中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平及部分自身抗体指标,探索它们与HSP病变程度的关系.方法 收集20例HSP(HSP组)、15例HSPN患儿(HSPN组)以及20例健康儿童(对照组)的血清和尿液,ELISA检测血清和尿液中MMP-9水平,间接免疫荧光法检测血清抗核抗体(ANA)和抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA),免疫斑点法检测抗可提取性核抗原抗体谱.结果 (1)HSPN组血清MMP-9为(469.82±38.34)ng/mL,显著高于HSP组的(244.71±88.23)ng/mL和对照组的(50.81±24.91)ng/mL,HSPN组尿液MMP-9为(76.46±24.25)ng/mL 也显著高于HSP组的(27.03±8.85)ng/mL和对照组的(6.32±3.20)ng/mL,差异均有统计学意义(均P<0.01).(2) 35例患儿,ANA阳性1例,ANCA阳性1例(pANCA阳性),抗可提取性核抗原抗体谱(nRNP、Sm、JO-1、SS-A、SS-B、scl-70)均为阴性.结论 HSPN患儿血清及尿液中MMP-9水平均显著高于HSP患儿和健康儿童,提示MMP-9不仅参与HSPN的发生发展过程,且可能与肾损害有关.HSP患者ANA、ANCA等自身抗体检测的临床意义有待进一步评估.     

肿瘤微环境中Th17细胞生物学特性的研究进展

辅助性T细胞17（help T -cell type 17,Th17）是不同于Th1和Th2细胞的CD4+ T细胞新亚群, 主要通过分泌IL-17、IL-6、IL-21等效应因子在自身免疫性、感染性疾病和移植排斥反应中发挥重要作用。新近发现,Th17细胞在肿瘤微环境中高表达且与肿瘤的发生发展密切相关,但其具体之效应功能尚未完全清楚。进一步探求Th17细胞在肿瘤微环境中的免疫调节与分化作用机制,将对研究肿瘤的发病机理及其诊治和预后起重要作用。     

Attacin抗菌肽基因体内抗菌活性研究

目的建立Attacin基因体内抗菌活性检测系统,并初步研究其抗菌活性。方法PCR扩增Attacin编码区目的序列,并构建原核表达重组质粒,转化大肠埃希菌,在体内检测Attacin的抗菌活性,同时SDS-PAGE分析融合蛋白表达情况。结果与未诱导对照相比,包含重组质粒的宿主菌生长受到抑制,含pET30a（＋）/Attacin宿主菌诱导表达后,提纯不到His-Attacin融合蛋白,而含pGEX-4T-1/Attacin宿主菌可获得GST-Attacin融合蛋白。结论建立灵敏、简便的Attacin体内抗菌活性检测方法,为下一步研究Attacin的生物学功能及其应用开发奠定基础。     

127例乙肝表面抗体ELISA检测与化学发光法的比较

Objective To compare the difference between ELISA and chemiluminescence assay in de-tecting hepatitis B surface antibody (HBsAb) serum valued in 5～100mIU/ml. Method 127 HBsAb serum samples that had valued by chemiluminescence were detected using 10 domestic ELISA kits. The correlation between the results of ELISA kits and chemiluminescence assay were analyzed. Coincidence between the results of ELISA kits and chemiluminescence at different OD value range were also analyzed. Results The detected results between 10 domestic ELISA kits and chemiluminescence assay are positive correlation (P<0.01); The optimal coincidence rates of the results of ELISA with those samples valued by chemiluminescence at more than 100mIU/ml was 99.4%; the coinci-dence rate is from 42% to 80% in cut-off±20%. The average coincidence rate is under 60%. Conclusions Though the detected results of 10 domestic ELISA reagents is related closely, the coincidence rate of the results at 5～10mIU/ ml in detecting anti-HBs is low. So it is important to make a positive standard in detecting anti-HBs.     

罗氏Modular全自动生化分析仪酶学指标检测性能验证

目的验证罗氏Modular全自动生化分析仪酶学指标丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）分析性能。方法根据美国临床实验室标准化研究所（CLSI）系列文件（EP5-A2、EP15-A2、EP6-A2、EP7-A2、C28-A2）和其他相关文献的实验方案,对罗氏Modular全自动生化分析仪检测A坍、AST的精密度、准确度、线性、临床可报告范围、干扰和生物参考区间6大性能进行验证,并与厂商声明的性能或公认的质量标准进行比较。结果精密度均符合罗氏性能标准;对卫生部5份室间质控品检测结果与靶值的相对偏倚（SE％）在-3．94％--9．09％之间,变异指数得分（VIS）均〈50,室内质控（IQC）结果与罗氏全球质控系统（Qcs）结果相对SE％在-3．70％～5．85％之间;ALT、AST检测均呈一次线性（r=0．999,P〈0．05）,线性范围分别为4～1332U／L、4～1031U／L;ALT、AST的临床可报告范围分别为0～133200U／L和0～206200U／L;血红蛋白（Hb）对AST检测有正干扰,Hb≤6．025g／L的干扰效应剂量曲线呈一次线性（P〈0．05）;ALT、AST生物参考区间验证结果均在本实验室给出的参考区间内。结论罗氏Modular生化分析仪ALT、AST检测的主要分析性能符合质量目标要求,CLSI实验评价方案具有可操作性和实用性。     

乙型肝炎病毒X蛋白与肝细胞癌

肝细胞癌(hepatic cellular carcinoma,HCC)是临床最常见的恶性肿瘤之一。在我国,约80%的HCC合并乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染HBV感染者发生HCC的危险性是无感染者的200余倍。人们发现HBV基因中