tau蛋白异常翻译后修饰在阿尔茨海默病中的作用

在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)中微管相关蛋白tau能够产生许多异常翻译后修饰并聚集形成配对螺旋丝(paired helical filament,PHF).这些tau的修饰包括过磷酸化、异常糖基化、截断等,其中,过磷酸化和异常糖基化是阿尔茨海默氏病等神经退行性疾病神经元纤维化的主要分子发病机制.     

短节段固定结合伤椎置钉、植骨治疗胸腰椎骨折的临床研究

目的 探讨后路短节段椎弓根钉固定结合伤椎椎弓根钉固定加伤椎经椎弓根植骨成形术治疗胸腰椎骨折的方法和效果.方法 2005年3月至2010年3月治疗组采用传统短节段椎弓根钉固定结合经伤椎椎弓根钉固定和椎体内植骨成形术治疗32例胸腰椎骨折,以同期随机选择的采用传统短节段椎弓根钉固定术治疗的30例胸腰椎骨折为对照组进行临床对比研究,分别测量两组病例术前、术后及末次随访时伤椎椎体前缘高度、脊柱矢状位Cobb角,椎管内占位百分比,以ASIA 2000分级标准评定神经功能;以Charles标准评定临床疗效,并进行统计学分析.结果 术后平均随访17.2个月（12 ～21个月）,放射学评估两组患者术后的脊柱重建均较术前有明显改善,两组术后即刻伤椎高度恢复方面疗效相当,但对照组在术后脊柱的后凸矫形和骨折块复位方面较治疗组差（P＜0.05）.末次随访时治疗组与对照组伤椎椎体前缘高度、脊柱矢状位Cobb角两组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）,神经功能和临床疗效评估两组比较差异均无统计学意义,并发症治疗组2例,对照组5例.结论 经伤椎椎弓根植骨加伤椎固定结合短节段椎弓根钉固定可提高骨折后凸畸形的矫正度,使脊柱和内固定物的载荷更合理、更稳定,降低了内固定失效和矫形丢失的发生,促进了骨折愈合,是弥补传统短节段椎弓根螺钉内固定手术不足的有效方法.     

小鼠急性心肌梗死后不同时间点心肌组织自噬水平的动态演变

目的研究小鼠急性心肌梗死(AMI)后不同时间点心肌组织自噬水平的动态变化。方法选取8~10周龄SPF级C57BL/6J野生型小鼠40只,随机分为假手术组(Sham组)、AMI组(永久结扎左前降支),每组20只,分别于术后7、14、28 d时,用心脏超声检测心脏功能及结构变化,Masson染色观察小鼠梗死周边心肌组织纤维化,Western blot检测自噬蛋白、透射电镜观察自噬小体、免疫组织化学检查凋亡蛋白表达。结果 Masson染色显示,AMI组梗死周边组织间质纤维化随着时间的推移加重;AMI组7、14和28 d时Bax蛋白较Sham组明显上调(0.71±0.08、0.77±0.05和0.86±0.06 vs 0.53±0.08,P<0.05),Bcl-2和自噬微管相关蛋白轻链3蛋白降低(P<0.05),P62蛋白表达增强(P<0.05);透射电镜示,AMI组梗死周边心肌组织内自噬小体数量明显减少。结论小鼠AMI后梗死周边心肌组织自噬水平进行性降低,心室重构进一步恶化,自噬可能在AMI中起保护作用。     

2014年中国克雅氏病监测网络病例特征分析

目的 了解中国12个克雅氏病(creutzfeldt-Jakob disease, CJD)监测网络省(直辖市、自治区)克雅氏病的发病情况、流行病学及临床特征。方法 对2014年我国克雅氏病监测网络获得的可疑克雅氏病病例的临床及流行病学资料进行分析, 收集患者脑脊液及血液样品, 利用Western blot方法检测脑脊液中14-3-3蛋白, 提取全血基因组DNA并利用PCR及测序方法对PRNP基因进行129位和219位氨基酸多态性及基因突变的分析。结果 发现散发型克雅氏病临床诊断病例143例(44.14%), 疑似诊断病例15例(4.63%), 遗传型克雅氏病病例10例(3.09%), 致死性家族型失眠症8 例(2.47%)。病例报告无季节聚集性, 长久居住地呈散在分布, 职业分布广泛。临床诊断病例年龄中位数为61岁(24, 81), 男女性别比为1.07:1;疑似诊断病例年龄中位数为57岁(33, 76), 男女性别比为1.5:1。快速进行性痴呆为最常见的首发症状。脑脊液14-3-3蛋白、脑电图(EEG)以及头颅磁共振成像(MRI) 三项检测结果中, 出现阳性结果越多的病例表现出更多的典型症状。对324份血液样品PRNP基因的检测, 其中297例129位氨基酸为M/M纯合子, 294例219位氨基酸为E/E纯合子。结论 2014年我国监测到的克雅氏病病例的报告时间、长久居住地、职业、性别比例以及年龄分布均符合散发型克雅氏病的发病特点。     

朊蛋白突变体D178N在RT-QuIC实验中的转化研究

目的 利用RT-QuIC研究带有D178N突变的朊蛋白的自我转化能力.方法 以带有人PRNP基因的质粒为模板,通过定点突变,构建了带有D178N突变的人PRNP基因,利用原核表达系统表达并纯化了带有N端及N端缺失的D178N朊蛋白.分别将此蛋白作为底物,利用RT-QuIC体外纤维形成实时监测系统,对各种突变蛋白体外纤维形成进行了观察和比较,并对形成纤维蛋白的蛋白酶抗性进行了初步分析和比较.结果 正确构建了D178N突变的PRNP基因;在RT-QuIC的反应条件下,缺失N端的带有D178N突变的人朊蛋白,即使在不存在prpSc种子的情况下,在体外也能够发生自我转化,且形成的纤维具有蛋白酶抗性;而带有N端的D178N突变的朊蛋白,在RT-QuIC的反应条件下不发生自我转化.结论 朊蛋白N端对D178N突变的朊蛋白自发纤维形成具有一定影响,这为探索和研究遗传型克雅病的致病机制提供了重要线索.     

2012年我国克雅氏病监测病例特征分析

目的了解中国(未包括香港、澳门和台湾地区,以下同)克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob disease,CJD)的发病情况、流行病学及临床特征。方法对2012年我国克雅氏病监测网络获得的可疑CJD病例的临床及流行病学资料进行分析,收集患者脑脊液及血液样品,利用Western blot方法检测脑组织中PrPSc蛋白及脑脊液中14-3-3蛋白,提取全血基因组DNA并利用聚合酶链反应(PCR)及测序方法对PRNP基因进行129位多态性及基因突变的分析。结果发现散发型CJD确定诊断病例1例,临床诊断病例63例,疑似诊断病例29例,遗传型CJD病例8例(突变分别为R208H、E196A和V180I各1例、E200K 2例、T188K3例)及致死性家族型失眠症病例5例(突变为D178N,129M/M)。病例报告无季节聚集性,长久居住地呈散在分布,职业分布广泛。临床诊断病例年龄中值为59岁(39,79),男女性别比为0.91∶1;疑似诊断病例年龄中值为53岁(36,84),男女性别比为1.41∶1。快速进行性痴呆为最常见的首发症状,占全部诊断病例的46.74%。临床诊断病例中,同时出现3种典型临床表现的为29例,占46.03%,同时出现4种典型临床表现的为8例,占12.70%,而疑似诊断病例大部分只出现2种典型临床表现。脑脊液14-3-3蛋白、脑电图EEG以及头颅MRI 3项检测结果中,出现阳性结果越多的病例表现出更多的典型临床表现。结论 2012年我国监测到的CJD病例主要以散发型为主,快速进行性痴呆为最常见的首发症状,临床诊断病例比疑似诊断病例出现更多的典型临床表现,脑脊液14-3-3蛋白、脑电图EEG以及头颅MRI 3项检测结果中,阳性结果越多,患者出现典型临床表现越多。病例的报告时间、长久居住地分布、职业分布、性别比例以及年龄分布均符合散发型CJD的发病特点。     

羊瘙痒因子139A感染引起小鼠脑组织中的1-ACT表达增加

目的 探究1-ACT在羊瘙痒因子139A感染小鼠脑组织中的变化情况。方法 利用蛋白免疫印迹、免疫组织化学、间接免疫荧光及荧光共聚焦方法分析羊瘙痒因子139A感染小鼠脑组织中1-ACT表达的变化和分布特点。结果 蛋白免疫印迹方法显示在羊瘙痒因子139A感染小鼠终末期脑组织中1-ACT的含量较正常对照小鼠明显上调且随着潜伏期的延长而逐渐增加;免疫组织化学方法发现1-ACT主要分布于羊瘙痒因子139A感染小鼠的皮层、丘脑和小脑区域;间接免疫荧光实验显示羊瘙痒因子139A感染终末期小鼠脑组织中补体成分C3含量明显增加,同时荧光共聚焦实验表明1-ACT与补体成分C3存在明显的共定位现象。结论 羊瘙痒因子139A感染终末期小鼠脑组织中1-ACT含量明显增加。     

METTL7B对人肝细胞脂滴形成的影响

目的 探讨甲基转移酶样蛋白7B(METTL7B)对人肝细胞脂滴形成的影响。方法取5只8～10周龄雄性C57BL/6J小鼠的心、肝、脑、肺、肾、肌肉、皮肤等组织,检测组织中METTL7B蛋白表达情况。用不同浓度油酸(0、0.25、0.5、1.0 mmol/L)处理人正常肝细胞LO2,采用CCK-8法检测细胞活力,油红O染色检测细胞内脂滴含量。METTL7B siRNA转染LO2细胞,检测LO2细胞内脂滴含量以及三酰甘油和胆固醇代谢相关基因的表达情况。结果 METTL7B蛋白在小鼠肝脏组织中表达最高,在其他器官组织中表达较弱或不表达。与油酸0 mmol/L比较,油酸1.0 mmol/L能降低细胞活力(P<0.05)。油酸0.5 mmol/L处理后,细胞内脂滴含量增多,且脂滴大小清晰,METTL7B mRNA和蛋白表达升高(P<0.05)。干扰METTL7B后,细胞内脂滴含量减少(P<0.05),三酯甘油代谢相关基因载脂蛋白B100、Runt相关转录因子2、硬脂酰辅酶A去饱和酶mRNA表达上调(P<0.05),胆固醇代谢相关基因肉毒碱棕榈酰转移酶、胆固醇调节元件结合蛋...     

护理干预辅助治疗消化性溃疡临床效果观察

目的：探讨护理干预辅助治疗消化性溃疡临床效果。方法：将我市中医院自2013年1月至2015年4月以来所收治的75例消化性溃疡患者,按照住院尾号奇偶将患者分为 a 组（37例）和 b 组（38例）。a 组在常规药物治疗基础上增加常规护理;b 组在常规药物治疗基础上增加全面护理。评价：（1）病情改善率;（2）遵医用药评分、遵医饮食评分、遵医个人卫生评分、遵医情绪调控评分;（3）复发率。结果：（1）b 组患者病情改善率显著比 a 组高,有统计学差异（P ＜0．05）;（2）b 组遵医用药评分、遵医饮食评分、遵医个人卫生评分、遵医情绪调控评分显著比 a 组高,有统计学差异（P＜0．05）;（3）b 组复发率显著比 a 组低,有统计学差异（P ＜0．05）。结论：护理干预辅助治疗消化性溃疡临床效果确切,可有效提升患者遵医行为,提高治疗效果,预防复发,值得推广。