循证护理对预防脑卒中昏迷患者胃肠道及呼吸系统感染效果研究

目的 观察循证护理对预防脑卒中昏迷患者并发胃肠道及呼吸道感染的疗效,以指导临床脑卒中昏迷病人的护理实践.方法 选取2009年4月～2013年5月来我院就诊的脑卒中昏迷患者82例,依据护理方法的不同将患者分为循证组和常规组各44例,循证组在常规治疗基础上对患者进行循证护理,常规组给予常规护理.结果 治疗前两组患者的检测指标无明显差异（P＞0.05）;治疗4周后,循证组的WBC、ESR、痰定量培养分离致病菌数、胸部CT示肺部阴影例数、血细菌培养阳性例数及鼻饲管引流液细菌培养阳性例数均明显低于常规组（P＜0.05）;循证组患者的脂类吸收率明显高于常规组（P＜0.05）.结论 应用循证护理方法对脑卒中昏迷患者进行护理可明显预防患者并发肺部及胃肠道感染的发生,为患者的康复奠定良好基础.     

急性肝损伤小鼠肝组织中的自噬现象

目的探讨在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GalN)诱导的小鼠急性肝损伤模型中,肝脏组织的自噬情况。方法将60只雄性Balb/C小鼠随机分为5组(每组均包括实验亚组和对照亚组,各6只)。实验组小鼠腹腔注射LPS(100μg/kg)和D-GalN(350mg/kg)溶液,对照组小鼠只注射无菌等量生理盐水,分别于注射后2、4、8、12、24h处死小鼠,取其血液及肝脏。另取3只小鼠饥饿处理24h作为自噬阳性对照组。所有小鼠于处死前24h经高压尾静脉注射法注射溶于2ml生理盐水的GFP-LC3质粒100μg。生化法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;透射电镜、荧光显微镜下观察小鼠肝脏的自噬情况。结果各实验组血清ALT、AST水平均明显高于相应对照组(P<0.01)。透射电镜显示,实验组和自噬阳性对照组肝组织中可见大量肝细胞发生自噬。荧光显微镜下可见GFP-LC3绿色荧光蛋白。8、12、24h实验组及自噬阳性对照组每高倍镜视野下平均GFP-LC3荧光点数目明显高于对照组(P<0.01)。结论 LPS和D-GalN可诱导小鼠发生急性肝损伤,而自噬是这一过程中的重要形态学特征。     

RPS4Y1蛋白在前列腺癌组织中的表达及意义

目的 探讨RPS4Y1蛋白在前列腺癌组织中的表达及意义.方法 利用Real-time PCR、RT-PCR和免疫组织化学方法检测RPS4Y1在不同细胞系以及前列腺癌组织中的表达.结果 RPS4Y1的表达在C4-2中比LNCaP中下调(137.19±13.64)倍;RPS4Y1在LNCaP、C4-2、C4-2B中随着恶性程度的增加,其表达随之降低,在骨转移前列腺癌细胞系中未见表达,而脑转移的前列腺癌细胞系DU145中有较高表达,在MCF-7、HepG2、Hela、PC12、293T等细胞系中未检测到RPS4Y1的表达,特异性较好;RPS4Y1胞浆阳性,表达与恶性程度呈负相关,与表达谱结果一致.结论 RPS4Y1蛋白可作为前列腺癌进展诊断的候选分子标志物.     

获得性免疫缺陷综合征儿童抗病毒治疗后外周血单个核细胞线粒体DNA基因D环区序列研究

目的研究我国人类免疫缺陷病毒（HIV）感染儿童长期抗反转录病毒治疗（ART）后对外周血单个核细胞（PBMC）线粒体DNA基因D环（D-loop）区序列的影响。方法选择34例ART的HIV感染儿童与21例正常对照儿童,提取两组儿童PBMC内DNA,普通聚合酶链反应（PCR）法扩增线粒体DNA D-loop区序列并测序。结果 ART组儿童PBMC内线粒体DNA D-loop区碱基变异数（6.29±2.25）bp高于对照组儿童（4.71±2.53）bp（P〈0.05）,ART组患儿PBMC线粒体DNA D-loop区共有50个位点出现碱基改变,其中有3个位点的变异频率在两组儿童间差异有统计学意义,即16362T→C、131T→C、489T→C。结论 ART可能导致儿童PBMC线粒体DNA Dloop区基因变异增加。     

E2F1对XRCC1启动子调节作用的研究

目的:探讨E2F1对XRCC1启动子的调节作用及其意义.方法:PCR扩增XRCC1启动子序列克隆至pGL3-Basic荧光报告载体上,与E2F1或突变的E2F1(132E)表达载体分别同时转染Sao2细胞;从基因Bank中调取XRCC1启动子序列和E2F结合位点序列分析其相关性;设计引物逐渐从5'端删除与E2F结合位点相关的序列,将PCR产物分别克隆至pGL3-Basic荧光报告载体上,转染至Sao2细胞.细胞裂解后与β-gal反应液一同保温,570 nm处读取吸光度值.结果:XRCC1与E2F1共转染后,可以诱导XRCC1荧光强度的增加;XRCC1启动子序列5'端-819～-803与E2F结合位点相关,删除5'端序列使荧光强度减少.结论:E2F1作用于XRCC1启动子序列,上调XRCC1转录.     

TAT-EGFP融合蛋白的表达及其在小鼠体内跨膜转导与分布的研究

目的:建立TAT-EGFP融合蛋白在原核细胞中表达的试验方法,探讨该融合蛋白经过胎盘屏障后在小鼠体内跨越各种生物膜转导及分布情况.方法:将重组表达栽体pET32-TAT-EGFP转化E ColiBL21,得到稳定表达的融合蛋白,纯化后注入孕鼠腹腔内,注射后第3天分别取母鼠和仔鼠组织,并做快速冷冻切片,观察融合蛋白在小鼠体内的分布.结果:成功表达了相对分子质量为32×103的TAT-EGFP融合蛋白.该融合蛋白能在小鼠不同组织细胞内分布,在小肠上皮分布最为明显, 并能透过胎盘及血脑屏障.结论:TAT介导的EGFP可在小鼠体内广泛跨膜转导分布,为进一步研究其他大分子活性物质进入细胞及其功能奠定了良好基础.     

基于iTRAQ技术的肝癌细胞蛋白质组学研究

目的 利用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术筛选稳定表达乙型肝炎病毒(HBV)的HepG2.2.15细胞与其亲本HepG2细胞差异表达的蛋白.方法 使用iTRAQ技术对HepG2.2.15细胞和HepG2细胞中的差异蛋白进行分析,并借助生物信息学对差异蛋白进行功能聚类和信号通路分析.以两组间细胞差异倍数(FC)...     

核苷类似物对小鼠中枢神经线粒体毒性研究

目的探讨长期使用核苷类似物是否产生中枢神经元线粒体损伤。方法取7周龄Balb/C小鼠40只,分为4组,每组10只。实验组每天分别喂饲司它夫定（D4T）50 mg/kg、齐多夫定（AZT）100 mg/kg和拉米夫定（3TC）50 mg/kg,每周5 d,连续16周;对照组喂服双蒸水。通过激光单细胞捕获技术抓取小鼠大脑皮层神经元,每组200个细胞,通过实时定量PCR观察线粒体DNA（mtDNA）含量变化。结果 COXⅡ基因扩增显示,喂饲核苷类似物可明显减低小鼠大脑皮层神经元mtDNA拷贝数,其中D4T组减少至对照组的（22.2±3.2）%,AZT组减少至对照组的（53.6±7.1）%,3TC组减少至对照组的（34.6±8.2）%。同时,与对照组相比,ND4基因扩增显示,mtDNA主环拷贝数明显减低,D4T、AZT、3TC组分别为对照组的（25.2±7.3）%、（46.3±9.1）%和（42.3±7.4）%。与对照组比较,差异均有统计学意义（P﹤0.05）。但是,3组ND1基因扩增显示,mtDNA小环拷贝数依次为对照组的（67.7±5.2）%、（53.5±9.2）%和（94.4±8.3）%。AZT与对照组比较,mtDNA小环拷贝数明显降低（P﹤0.05）,其他两组与对照组比较则无明显变化。结论长期使用核苷类似物可产生小鼠神经元mtDNA损伤,且以主环缺失为主。     

左锁骨下血管损伤救治成功一例

患者　男 ,39岁 ,2 0 0 1年 4月 12日左上胸部被刀刺伤 2 0ｍｉｎ入院。检查 :神志清楚 ,左上胸部锁骨内 1/3下方有 3ｃｍ长伤口 ,有大量鲜血外溢。立即给予纱布填塞止血。诊断为“左锁骨下血管损伤”。紧急抢救 ,建立 3个静脉通道 ,并作气管插管麻醉 ,头部用冰袋降温。快速于左侧第四肋间开胸分离出左锁骨下动脉起始部 ,阻断其血流 ,再分离出左头静脉并阻断其血流。于左锁骨下方伤口处向外侧延长切口 ,暴露出臂丛神经下干及左锁骨下动脉第 2、3段 ,阻断其血流 ,另一助手压迫左颈总动、静脉。解剖损伤段血管 ,见左锁骨下静脉与颈内静脉交汇…