HIV感染者CD4+调节性T细胞与HIV DNA呈正相关

目的分析CD4+调节性T细胞与艾滋病病毒(HIV)脱氧核糖核酸(DNA)之间的关系。方法随机选择门诊病人50例,采用流式细胞仪细胞内染色技术检测CD4+CD2+5Foxp3+调节性T细胞的水平,并用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测外周血单个核细胞中的DNA水平,分析CD4+调节性T细胞与CD4计数、病毒载量及HIV-1DNA之间的相关性。结果在HIV感染病人CD4+调节性T细胞与HIV DNA呈正相关,与CD4计数呈正相关,与病毒载量呈负相关。结论未进行治疗的HIV病人,其CD4+调节性T细胞与HIV DNA呈正相关,说明CD4+调节性T细胞越多,HIV-1DNA越多,CD4+调节性T细胞可能对机体发挥不利的作用。     

艾滋病痴呆复合征抗病毒治疗研究进展

获得性免疫缺陷综合征（acquired immune deficiency syndrome,AIDS）是人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）特异性感染辅助性T淋巴细胞,破坏免疫系统,造成以机会性感染和恶性肿瘤为主要临床表现的综合征,日前已成为世界上首要的社会公共卫生问题。截至2007年底,全世界已有HIV／AIDS患者4000余万,其中我国70余万人^[1]。     

壮骨颗粒含药血清对兔骨髓基质干细胞体外增殖及分化影响

目的:研究壮骨颗粒含药血清对骨髓基质干细胞体外成骨活性的影响。方法:采用体外细胞培养技术,用壮骨颗粒对细胞进行体外诱导培养建立实验组,并设置空白血清对照组,进行MTT、免疫组织化学染色及ALP测定,观察壮骨颗粒对骨髓基质细胞的诱导作用。结果:在促细胞增殖方面,实验组作用最显著(P<0.01),在第3天开始增殖,第6天达到平台期,而对照组对数增殖期明显延长(P<0.01);在促细胞分化方面,常规形态学观察,壮骨颗粒组诱导的细胞在形态上类似于成骨细胞,免疫组化染色提示诱导细胞具有骨细胞表型。结论:壮骨颗粒可促进细胞增殖,并诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化。     

HIV-1假病毒包装方法的探讨

目的：通过不同方案包装HIV-1假病毒,确定获得高重复性、高稳定性和高滴度假病毒的方法。方法从转染效率影响因素出发,通过不同的转染方案,利用pNL4-3 LucR-E-质粒与VSV-G质粒共转染293细胞包装病毒,分别于48 h和72 h收取假病毒并重新感染293细胞,48 h后测荧光素酶报告基因。结果成功包装出HIV-1假病毒,不同包装方案的病毒滴度不同,测得报告基因最高接近107 RLUs。结论应用PEI转染试剂、大提质粒pNL4-3︰VSV-G为4︰1时,转染效率最高,包装的假病毒滴度最高。     

人趋化因子CCL3L1融合蛋白表达和活性分析

目的人趋化因子CCL3L1进行融合蛋白原核表达和真核表达，纯化后活性分析。方法克隆人类CCL3L1eDNA，构建两种CCL3L1表达载体，获得两个CCL3L1融合蛋白，一个在BL21大肠杆菌表达的GST-CCL3L1融合蛋白，另一个在跎果蝇细胞表达的His-CCL3L1融合蛋白。同时克隆了pcDNA3.1-flag-CCR5表达载体，培养了稳定表达flag-CCR5的细胞株，进行人趋化因子CCL3L1活性分析。结果成功构建人趋化因子CCL3L1融合蛋白原核表达载体pGEX-4T和真核表达载体pMT／BiP／V5-His，免疫沉淀法检测和Westernblot法分析His-CCL3L1蛋白在浓度1nmol／L到50nmol／L存在剂量依赖性，浓度50nmol／L到100nmol／L没有剂量依赖性。纯化的His-CCL3L1蛋白能特异性结合CCR5受体。结论成功表达了融合蛋白GST-CCL3L1和His-CCL3LI，果蝇细胞表达的His-CCL3L1蛋白具有与天然CCL3L1相同的生物学活性，为进一步制备CCL3L1单克隆和多克隆抗体及研究CCL3L1影响HIV-1感染的机制提供基础资料。     

祛风活血通络法治疗膝骨性关节炎临床观察

膝骨性关节炎（OA）中医称之为骨痹，是一种可动性关节的非炎症性病变，它的特点是关节软骨退化和关节表面及边缘新骨形成，又称退行性关节病。我们自2006年2月～2007年11月对80例膝骨性关节炎患者采用中药熏蒸法治疗，取得满意疗效，报道如下。     

重建钢板内固定治疗肩峰骨折

肩峰骨折较为少见[1],临床报道不多,我院从2001年2月~2005年6月采用切开复位重建钢板内固定术治疗肩峰骨折7例,取得满意效果,现报道如下。1临床资料1.1一般资料本组7例,全部为男性。年龄19~41岁,平均27岁。右侧5例,左侧2例。刀砍伤3例,重物砸伤2例,车祸伤2例。伤后入院时间0.5 h~10 h。均为直接暴力。开放伤4例,闭合伤3例。合并肩胛体骨折2例,合并肩胛体及锁骨骨折1例。1.2临床表现4例开放伤均可从创口内探及骨折断端,3例闭合伤见有患肩肿胀、疼痛,肩峰处压痛明显,骨擦感( )。7例均感患肢无力,肩关节不同程度功能障碍,以外展功能受限为甚。4…     

失代偿期乙型肝炎肝硬化抗病毒治疗耐药增加肝细胞癌风险研究

目的分析失代偿期乙型肝炎肝硬化患者队列肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发生的危险因素及抗病毒方案的优化。方法选择2008年1月—2011年10月随访2年的193例乙型肝炎肝硬化患者队列,包括拉米夫定(LAM)组29例、阿德福韦(ADV)组57例、替比夫定(LDT)组30例、恩替卡韦(ETV)组38例及对照组39例。按HCC发生前是否耐药将接受抗病毒治疗患者分为耐药组(31例)和无耐药组(123例),分析各组Child-Pugh评分、病毒学指标、耐药率、HCC发生率、患者生存率及安全性。结果各抗病毒治疗组在随访2年时Child-Pugh评分较基线均显著下降(P均<0.05);血清HBVDNA水平明显低于基线值,各组HBeAg血清学转换率和HBeAg阴转率差异无统计学意义;ETV组累计2年耐药率低于LAM组、ADV组和LDT组(P均<0.05);抗病毒治疗各组及对照组间累计2年HCC发生率、患者生存率差异无统计学意义,但耐药组HCC发生率明显高于无耐药组和对照组(P均<0.05);在2年随访中各组均未出现严重肌病等不良反应。结论 ETV治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化疗效优于其他单药治疗,抗病毒治疗耐药可增加HCC发生风险。     

应用三维有限元模型研究颈椎不同工况下的生物力学变化

目的 研究颈椎前屈、后伸、侧屈、旋转等多种工况下，钩椎关节、小关节应力规律，从应力角度探讨钩椎关节、小关节退变的生物力学机制。方法 测量尸体颈段脊柱各节点三维坐标，利用SUPER—SAP软件建立机内模型，模拟完整的颈段脊柱力学模型。通过测量求得力矩值，直接或根据力矩等价公式间接将肌力值加载于模型体表各点。运用颈椎周围不同肌肉对颈椎作用力的变化，模拟正常活动范围内颈椎前屈、后伸、侧屈、旋转等多种工况。分别计算并得出相应载荷下钩椎关节、小关节应力值。结果钩椎关节在各种工况下的受力总体上集中于颈椎中下段。前屈时，由上至下呈现逐渐增大趋势；后伸时，在C4-5，C5-6出现应力集中现象。小关节各种工况下的受力状况总体趋势与钩椎关节相同，前屈时z轴上受到拉应力，后伸时受到压应力，且后伸时承受的拉应力是前屈时承受压应力的2倍多。这说明小关节在后伸时起到承受和传导载荷的作用。结论 不同运动状态下，中下段颈椎的钩椎关节、小关节出现应力集中。     

采用集合转化的方法构建HIV-1蛋白酶区和反转录酶区T-A克隆载体

DNA重组技术是将两个或多个单独的DNA片段连接起来产生一个能在特定宿主中自主复制的DNA分子。重组DNA分子最简单的构建方法是将基因片段克隆到质粒或噬菌体等克隆载体上。常用的质粒载体有pBR322、pUC和pGEM等。这些载体含有不同的多克隆位点,适于将含有不同酶切位点的DNA片段连接起来[1]。