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目的 利用shRNA干扰沉默人乳腺癌细胞MCF-7的解聚素-金属蛋白酶17(adisintegrin and metalloproteinases 17,ADAM17)基因,观察其对细胞增殖的影响.方法 针对ADAM17基因设计合成具有特异性的ADAM17-shRNA,经脂质体LipofectamineTM 2000转染MCF-7细胞.实验设对照组(空白PBS)、干扰组(转染干扰无义序列ADAM17-shNC)、实验组(转染ADAM17-shRNA),采用Reahime PCR检测各组细胞AD-AM17 mRNA的表达水平,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期变化.结果 实验组ADAM17 mRNA的相对表达量显著低于对照组和干扰组,差异有统计学意义(P<0.05);实验组的MCF-7细胞增殖活性较其他两组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);实验组的MCF-7细胞进入S期(23.60±1.09)%和G2/M期(6.30±0.82)%的比例降低,绝大多数细胞停留在G0/G1期(65.17±1.35)%,细胞周期延缓,与对照组、干扰组相比较差异具有显著性意义(P<0.05).结论 ADAM17-shRNA对人乳腺癌细胞MCF-7的ADAM17基因具有沉默作用,从而抑制MCF-7细胞的增殖活性,延缓细胞周期进展. 相似文献
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我院自1998年以来,应用双“J”管治疗上尿路尿瘘7例,获得满意效果,报告如下:1临床资料1.1一般资料:本组7例,男5例,女2例,年龄23~58岁,尿瘘部位:肾实质3例,肾盂2例,输尿管2例,时间7~30d:尿瘘原因:肾囊肿术后3例,肾盂切开取石术后2例,输尿管切开取石术后2例,均表现为术后引流管引出大量黄色尿液。1.2治疗方法:在X光监视下,经膀胱镜将导丝插入病侧输尿管,达肾盂,确定后,将双“J”管推入,一端进入肾盂内,将导丝撤出,留置尿管,置管时间40d,经膀胱镜将双“J”管取出。1.3结果:本组7例,均置管成功,置管后尿瘘处引流量逐渐减少,于3~8d无尿液引… 相似文献
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目的探讨RNA干扰基质金属蛋白酶(MMP)-9基因对人骨肉瘤MG-63细胞体外侵袭和迁移能力的影响。方法通过慢病毒载体介导shRNA-MMP-9转染MG-63细胞,实验分为:转染组(转染shRNA-MMP-9序列)、对照组(转染shRNA-MMP-9-NC序列)、空白组(磷酸盐缓冲液);RT-PCR检测各组MMP-9和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达;Western印迹检测各组MMP-9和VEGF蛋白的表达;Transwell小室侵袭实验检测细胞的侵袭能力;细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力。结果转染组MMP-9和VEGF的mRNA和蛋白表达量显著低对照组和空白组(P0.05);转染组穿膜细胞数[(56.37±3.29)个/视野]显著低于对照组和空白组[(92.06±3.56)个/视野、(93.05±1.52)个/视野](P0.05);转染组划痕愈合率(23.63%±1.47%)显著低于对照组和空白组(57.17%±3.86%、58.13%±2.35%)(P0.05)。结论 RNA干扰沉默骨肉瘤MG-63细胞的MMP-9基因表达,通过作用于VEGF靶基因,抑制其细胞侵袭及迁移能力。 相似文献
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资料与方法我院自1991年11月以来,采用经腹部腹膜外切口实施肾输尿管手术840例,年龄3~80岁,其中肾癌根治术163例,肾盂癌肾输尿管膀胱部分切除术38例,肾切除术381例,中上段输尿管切开取石术170例,其他手术(肾囊肿去顶减压术、肾修补术、肾盂切开取石术、肾盂输尿管成型术等)88例 相似文献