相对定量检测HLA-B27 mRNA表达水平的方法建立

目的 建立检测HLA-B27 mRNA表达水平的相对定量的方法.方法 筛选未经治疗的AS患者外周静脉血27例,其中HLA-B27阳性患者22例,HLA-B27阴性患者5例,对标本进行Total RNA提取.然后用RT-PCR方法进行HLA-B27反转录及相对定量.结果 22例HLA-B27阳性AS患者有着相对较高的HLA-B27 mRNA表达水平,最低值为1.16,最高值为37.01,均值为7.77.5例HLA-B27阴性AS患者均值为1.19,接近于HLA-B27阴性健康对照组.结论 检测外周静脉血HLA-B27 mRNA表达水平对检测AS是一种有效可行的方法.     

醒脑静对脑缺血大鼠神经保护作用与氨基酸受体表达的关系

目的：探讨醒脑静对局灶性脑缺血大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体的影响。方法：采用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉阻断(MCAO)模型，分别观察醒脑静对MCAO大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积和海马NMDA受体的含量的影响。结果：缺血3和6h，醒脑静组神经功能缺损评分明显低于MCAO组(P&;lt;0．01)；且模型组梗死体积24h(197．60&;#177;34．03)mm^-3明显大于6h(140．60&;#177;14．81)mm^3，差别有统计学意义(P&;lt;0．05)；但治疗组梗死体积6h是(114．60&;#177;23．62)mm^3，24h是(125．60&;#177;20．51)mm^3．后者明显小于模型组(P&;lt;0．01)；缺血1，6，24h，模型组NMDA受体表达分别为(8．40&;#177;1．23)，(12．08&;#177;1．80)，(17．94&;#177;1．62)nmol／g，呈逐渐上调趋势(P&;lt;0．05)，24h时治疗组NMDA受体表达为(5．22&;#177;1．43)nmol／g，明显低于模型组(P&;lt;0．01)。结论：醒脑静对局灶性脑缺血大鼠具有明确的神经保护作用，其机制可能与拮抗兴奋性氨基酸受体表达上调有关。     

前S1抗原、HBV—DNA和乙肝病毒血清标志物联合检测的临床意义

[目的]了解乙肝两对半（主要是HBeAg）、乙肝病毒DNA（HBV—DNA）与乙肝前S1抗原（Pre—S1）检测三者之间的关系以及它们的临床应用价值。[方法]采用酶联免疫吸附实验（ELISA）方法对273例乙肝患者血清进行乙肝两对半、Pre—S1抗原的测定，用荧光PCR技术对HBV—DNA进行测定，并分析3者之间的关系。[结果]HbeAg阳性组Pre—S1抗原、HBV—DNA的阳性率分别为85．09％、91．23％。说明Pre—S1抗原与HBV—DNA一样可较好的反映乙肝病毒在体内的活动及复制情况；HbeAg阴性组中Pre—S1抗原与HBVDNA的阳性率分别为37．11％、37．11％，说明在HbeAg阴性组患者仍有病毒复制，不能完全以HbeAg来判断病毒复制与否；与HBV—DNA的检测结果相比较，Pre—S1抗原检测的检出率为88．95％，特异性为87．32％，总符合率为88．28％，HBVDNA与Pre—S1抗原的阳性检出率没有差别（P〉0．05）。[结论]Pre—S1抗原能较好的反映HBV病毒感染及复制情况，三者联合检测互相补充，更有助于临床疾病的诊治。     

凉血通瘀方对脑出血大鼠脑水肿及基质金属蛋白酶9和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响

目的：探讨中药凉血通瘀方对脑出血大鼠脑水肿的作用及其机制。方法：采用自体血纹状体注射方法制备大鼠脑出血模型。实验大鼠分为假手术组、模型组和凉血通瘀方组。凉血通瘀方组给予凉血通瘀煎剂灌胃,余两组给予生理盐水灌胃,每日1次。脑出血后24、48、72和120 h观察大鼠脑水肿情况,明胶酶谱法检测脑血肿周围组织内基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）活性,荧光定量实时聚合酶链式反应法检测MMP-9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1（tissueinhibitor ofmetalloproteinase-1,TIMP-1）的表达水平。结果：凉血通瘀方组大鼠脑水肿程度在各时间点均显著低于模型组（P〈0.01）,仅在72 h其脑组织含水量高于假手术组（P〈0.01）。与模型组相比,凉血通瘀方组的MMP-9酶原水平及活性均显著降低,其mRNA水平亦在脑出血后48、72、120 h低于模型组（P〈0.01）,而TIMP-1 mRNA水平在各时间点均显著升高（P〈0.01）。结论：凉血通瘀方可能通过上调TIMP-1表达来抑制MMP-9水平,从而减轻脑出血大鼠脑水肿。     

郴州市2008年低温雨雪冰冻灾害对居民健康影响因素分析

[目的]了解这次低温雨雪冰冻灾害对郴州市居民健康的影响,为制定应对冰雪灾害救援措施和保障机制提供科学依据. [方法]应用描述流行病学方法对郴州市2008年低温雨雪冰冻灾害期间居民健康相关资料进行统计分析. [结果]郴州市2008年低温雨雪冰冻灾害给居民生活带来严重影响,造成因灾害相关疾病和意外死亡增加,非职业性一氧化碳中毒较去年同期增加135.00%,摔伤增加102.94%,新生儿早产率增加53.48%,部分被调查居民出现不正常心理状态,医疗机构门诊工作量下降,手术及时率下降31.06%,儿童免疫接种率下降57.85%,因灾滞留人员发热、感冒人数占就诊人数的89.60%. [结论]郴州市2008年低温雨雪冰冻灾害给居民日常生活、居民健康带来严重影响,有必要制定合理的灾后救援措施与保障机制,最大限度降低财产损失、减少灾害对居民健康风险.     

雌激素对绝经后动脉粥样硬化模型兔ET水平及内皮细胞ET-1 mRNA表达的影响

目的　观察雌激素对绝经后动脉粥样硬化模型兔动脉粥样硬化血浆内皮素 (ET)以及ET 1mRNA表达等的影响。方法　纯种新西兰雌兔去势术 0 .5 %胆固醇饲料 静注牛血清白蛋白造成绝经后动脉粥样硬化动物模型 ,模型动物连续使用雌激素 12周后检测相关指标。结果　与模型组相比 ,雌激素能降低ET含量 (P <0 .0 5 ) ,并降低ET 1mRNA的表达 (P <0 .0 5 )。结论　雌激素能通过ET水平及ET 1mRNA表达的调控作用 ,发挥保护内皮细胞功能的作用     

黄萸方对大鼠糖尿病早期肾脏保护作用的研究

目的:观察中药复方黄萸方对实验性糖尿病大鼠微量白蛋白尿的疗效。方法:采用高糖高脂喂饲加低剂量STZ建立伴胰岛素抵抗的大鼠2型糖尿病模型,给予黄萸方治疗12周,动态观察血糖及尿微量白蛋白等指标。结果:黄萸方可降低血糖、减少尿微量白蛋白、减轻肾脏肥大、改善尿多症状、降低血清甘油三酯水平,疗效优于血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)氯沙坦。结论:黄萸方可改善实验性大鼠2型糖尿病肾脏病变,主要是减少微量白蛋白尿的作用。     

小檗碱对3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化相关基因PPARγ、C/EBPα mRNA和蛋白表达的影响

目的 探讨小檗碱对脂肪细胞增殖、分化的影响及其机制。     

黄芪多糖和小檗碱对3T3-L1脂肪细胞糖代谢及细胞分化的影响

目的比较黄芪多糖和小檗碱对脂肪细胞糖代谢和细胞分化的影响,并分析其改善糖代谢的可能机制。方法检测黄芪多糖和小檗碱干预的脂肪细胞对^3H-葡萄糖的摄取,对黄芪多糖和小檗碱干预分化的细胞进行油红O染色并通过比色定量分析脂肪细胞分化程度。逆转录多聚酶联反应(RT—PCR)检测脂肪细胞分化相关基因过氧化物体增殖剂活化受体γ(PPARγ)、CAAT／增强子结合蛋白α(C／EBPα)mRNA的表达。结果黄芪多糖和小檗碱组葡萄糖摄取率分别为正常组的109．3％和182．7％;黄芪多糖明显促进分化及其PPARγmRNA表达,与对照组比较,差异有显著性(P<0．01);小檗碱则明显抑制细胞分化及PPARγ,C／EBPα mRNA表达,与对照组比较,差异有显著性(P<0．01)。结论黄芪多糖促进脂肪细胞葡萄糖摄取及细胞分化和PPARγ mRNA表达,而小檗碱促进葡萄糖摄取但抑制脂肪细胞分化和PPARγ及C／EBPα mRNA的表达。     

蒲黄总黄酮对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢的影响

目的探讨蒲黄总黄酮对脂肪细胞糖脂代谢的影响。方法药物处理胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞24h,通过检测培养液中的葡萄糖含量反映葡萄糖消耗量;XTT法观察药物对细胞活性的影响;3H-葡萄糖摄入法观察细胞对葡萄糖的转运率;通过检测上清液中的浓度观察细胞游离脂肪酸(freefattyacid,FFA)的溢出。结果蒲黄总黄酮在浓度为0.025~0.4g/L时有增加葡萄糖消耗的作用,且呈剂量效应。当浓度为0.4g/L时,XTT值明显下降,显示对细胞的毒性作用。在0.2g/L时,蒲黄总黄酮与罗格列酮相似,可明显提高细胞对3H-脱氧葡萄糖的转运率。蒲黄总黄酮组培养上清液中FFA浓度明显低于空白对照组,而罗格列酮组则无明显差异。结论蒲黄总黄酮能显著增加3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖摄取和消耗,同时可减少FFA溢出,通过调节糖代谢和脂代谢改善胰岛素抵抗。