5氮杂胞苷联合干扰素-γ上调神经母细胞瘤细胞Caspase 8表达的研究

  目的  探讨半胱-天冬氨酸蛋白酶8(Caspase 8)和死亡受体(DR)在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导神经母细胞瘤(NB)细胞凋亡中的作用。  方法  应用RT-PCR方法检测γ干扰素(IFN-γ)作用前后NB细胞Caspase 8 mRNA的表达; 应用Western blot方法检测Caspase 8、DR4和DR5蛋白表达; 应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞术检测IFN-γ, TRAIL, IFN-γ+TRAIL, Caspase 8抑制剂+TRAIL及IFN-γ+阿霉素/依托泊苷+TRAIL对NB细胞株生长及凋亡的影响。  结果  IFN-γ在NB细胞株SKNDZ中诱导了Caspase 8mRNA及蛋白表达。SY5Y细胞对TRAIL不敏感, 而IFN-γ与TRAIL或阿霉素, 依托泊苷联用对SY5Y细胞有明显诱导凋亡作用。IFN-γ+TRAIL组SY5Y细胞早期凋亡率(23.09+2.35)%高于TRAIL组[(6.15±0.54)%(P< 0.01)], 但低于IFN-γ+阿霉素/依托泊苷+TRAIL组[(43.41±6.46)%/(38.86±7.29)%, P< 0.01]。阿霉素或依托泊苷可以诱导NB细胞株DR5蛋白表达, 但未诱导DR4蛋白表达。IFNγ诱导后表达Caspase 8的SKNDZ细胞对TRAIL的诱导凋亡作用仍不敏感, 而阿霉素或依托泊苷处理后同时表达DR5的SKNDZ细胞对TRAIL的诱导凋亡作用相对敏感。IFN-γ+阿霉素/依托泊苷+TRAIL组SKNDZ细胞早期凋亡率(11.54±2.49)%/(13.38±1.65)%高于IFN-γ+TRAIL组(P< 0.01)。  结论  IFN-γ上调Caspase 8表达及化疗药阿霉素或依托泊苷诱导DR5表达可以恢复NB细胞对TRAIL的敏感性, Caspase 8和DR5在TRAIL诱导NB细胞凋亡中起着十分关键的作用。     

发育早期阶段砷暴露小鼠肝和脑组织中砷形态的检测分析

目的探索小鼠在其早期发育阶段暴露不同浓度亚砷酸钠后,各砷形态在肝和脑组织中的代谢与分布情况。方法母鼠在妊娠和哺乳期以自由饮水方式暴露0、10和30 mg/L iAsⅢ水溶液,仔鼠在哺乳期后继续摄入与母鼠相同浓度的含砷水溶液。分别在仔鼠出生后第0、10、15、21和35天,采用氢化物发生-超低温捕集-原子吸收分光光度法测定肝和脑组织中无机砷(iAs)、一甲基胂(MMA)和二甲基胂(DMA)水平。结果从出生后15 d起,肝组织中iAs含量开始逐步增加;从出生后21 d起,肝组织中MMA含量开始逐步增加;肝组织中DMA含量在出生后10～15 d最低,以后逐步增高。脑组织中iAs含量,在出生后15 d开始升高,在出生后21 d时达最高水平;MMA含量在早期发育阶段的脑组织中没有检测到;DMA含量在出生后10～15 d最低。结论母鼠体内各形态砷化物可通过胎盘屏障进入胎鼠体内,但其基本不能通过乳房屏障进入母鼠乳汁,进而进入仔鼠体内,成熟的血脑屏障对iAs具有一定的阻挡作用,但可允许部分DMA进入脑组织。     

烧伤病房微生物学监测

为了解烧伤病房微生物污染状况,加强消毒管理,预防烧伤感染的发生,我们于1992年5~6月在本院烧伤病房进行了微生物学监测,操作按卫生部1991年12月颁发的《消毒技术规范》进行。     

奥曲肽抑制核因子κB在大鼠急性坏死性胰腺炎中的活化

目的 :研究奥曲肽在大鼠急性坏死性胰腺炎 (ANP)模型中对核因子κB (NF κB)活化的作用。方法 :大鼠ANP模型 ,随机分成 3组 ,对照组 ,ANP组 ,奥曲肽组。观察血清淀粉酶、一氧化氮、胰腺病理的变化及NF κBp6 5mRNA在胰腺组织的表达。结果 :应用奥曲肽后 ,奥曲肽组与ANP组比较 ,血清淀粉酶、一氧化氮明显下降 ,分别由 (8131.5 0± 883.97)U/L ,(81.4 7± 10 .6 7) μmol/L降至 (396 8.30± 993.91)U/L ,(6 9.89± 11.87) μmol/L ;胰腺损伤减轻 ;NF κBp6 5mRNA表达下降。结论 :奥曲肽抑制ANP大鼠NF κB的活化 ,并通过抑制NF κB的活化抑制诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)的表达 ,改善大鼠ANP。     

步长脑心通对急性缺血性卒中脑微小循环障碍的影响

目的：观察步长脑心通对急性缺血性卒中微小循环障碍的影响。方法：采用Zea Longa线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,缺血2 h后拔线再灌注。实验鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、步长脑心通组(BCNXT),每组20只。观察指标：脑梗死体积、神经功能缺损评分、脑血流量、脑组织EB含量、金属基质蛋白酶基因表达、血脑屏障超微结构。结果：缺血再灌48 h模型组大鼠脑梗死灶体积(146．1±34．5)mm~3,步长脑心通组(97．2±25．8)mm~3(P＜0．01)；模型组神经功能缺损自再灌注24 h开始恢复。与12 h相比,有显著差异(P＜0．01)；步长脑心通组再灌24～48 h神经功能缺损与模型组比较明显好转(P＜0．05)；模型组大鼠再灌注后脑内EB含量升高,并于再灌后3h与48h出现两个高峰(P＜0．05)；步长脑心通组各时间点EB含量与模型组比较均明显下降(P＜0．05)；步长脑心通组与模型组相比,在再灌24 h、48 h和120 h的MMP-9 mRNA含量下降,有显著差异(P＜0．05)；步长脑心通组各时相血流量与模型组比较有明显提高(P＜0．01～＜0．05)。再灌注48 h模型组内皮细胞线粒体嵴肿胀,部分嵴断裂呈空泡样改变；内质网扩张呈空泡；紧密连接少见,血管基底膜尚完整。步长脑心通组血管内皮细胞结构完整；部分线粒体嵴肿胀断裂呈空泡样改变；基质均匀；内皮细胞所含吞饮小泡很少；细胞间有紧密连接存在；整个基底膜连续完整。结论：急性脑缺血再灌注后脑微小循环障碍,脑血流量明显下降,血管内皮细胞结构异常。步长脑心通可明显改善MCAO大鼠再灌后神经功能缺损评分及减小脑梗死体积,这种作用与改善脑微小循环障碍有关。     

流式细胞术检测贫血患者血细胞CD55和CD59的表达及临床意义

目的检测贫血患者外周血中红细胞和中性粒细胞膜表面抗原CD55和CD59的表达情况并探讨其临床意义。方法应用流式细胞术检测贫血患者及健康对照组外周血红细胞和粒细胞的表面抗原CD55、CD59的表达水平。结果正常人CD55-、CD59-红细胞和中性粒细胞的百分率均〈5%。阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）患者均〉20%;部分再生障碍性贫血患者〉5%,但均〈15%;部分缺铁性贫血患者CD55-、CD59-红细胞〉5%,但均〈15%,而中性粒细胞的结果全部正常;少部分巨幼细胞性贫血患者CD55-、CD59-血细胞〉5%,但均〈10%;自身免疫溶血性贫血患者的CD55-、CD59-红细胞和中性粒细胞百分比均正常。结论利用流式细胞术同时检测外周血中红细胞和中性粒细胞CD55和CD59的表达是目前诊断和鉴别诊断PNH的最可靠、最敏感的方法,也可作为判断疗效的手段。     

亚砷酸钠对淋巴细胞毒性及抗氧化物拮抗作用

目的研究不同浓度的亚砷酸钠对体外培养的大鼠淋巴细胞活力的影响及亚硒酸钠和抗坏血酸的拮抗作用。方法体外分离大鼠外周血淋巴细胞后，施加处理因素，在37℃条件下恒温培养，用水溶性染料(AlamarBlue)摄入法定量检测淋巴细胞活力。结果亚砷酸钠浓度大于5μmol／L时，AlamarBlue的还原率显著低于对照组，且呈剂量反应关系；用5μmol／L的亚硒酸钠预处理细胞24h后，10μmol／L亚砷酸钠组AlamarBlue的还原率显著增高，接近空白对照组还原率；而用50μmol／L的抗坏血酸预处理后，还原率有所增高，但未达到对照组水平。结论亚砷酸钠可抑制淋巴细胞活力，抗氧化物可一定程度的拮抗三价砷的细胞毒性作用。     

砷对作业工人脂质过氧化水平的影响

砷对作业工人脂质过氧化水平的影响中国医科大学预防医学系（沈阳１１００１）李富君皮静波孙贵范中国医科大学癌症预防中心郑全美刘淑兰陆春伟在铜冶炼过程中，砷为其主要污染物。现已发现，砷与脂质过氧化之间存在密切的联系［１］但对于直接从事铜冶炼作业工人在长期接...     

香烟烟气溶液和砷致淋巴细胞DNA损伤的协同作用

目的研究香烟烟气溶液和亚砷酸钠联合作用对大鼠淋巴细胞DNA的损伤,并探讨两者对DNA的损伤是否存在交互作用。方法大鼠淋巴细胞分为4组:亚砷酸钠单独作用组、香烟烟气溶液单独作用组、两者联合作用组和对照组,染毒后用单细胞凝胶电泳试验(彗星试验)检测淋巴细胞DNA的损伤,并检测细胞内丙二醛含量,同时采用2×2析因设计研究两者的交互作用。结果亚砷酸钠单独作用组、香烟烟气溶液单独作用组和两者联合作用组的彗星尾长和细胞拖尾率分别为[(11.68±3.79)μm,36%;(17.26±5.57)μm,75%;(32.10±6.18)μm,96%]均大于对照组[(6.74±1.09)μm,10%],差异均有统计学意义性(P<0.01)。而各染毒组细胞内丙二醛含量也高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。析因设计分析结果表明,香烟烟气溶液和亚砷酸钠对彗星尾长的影响存在交互作用(P<0.01),对细胞内丙二醛含量的影响也存在交互作用(P<0.01),交互作用方式均为协同作用。结论香烟烟气溶液和亚砷酸钠对大鼠淋巴细胞DNA损伤存在交互作用,交互作用方式为协同作用。     

不同砷化合物对血管内皮细胞毒性的研究

目的观察不同砷化合物对体外培养的牛主动脉血管内皮细胞(BAEC)的细胞毒性。方法培养的BAEC分别暴露于亚砷酸钠(NaAsO2,iAsⅢ0~50μmol/L)、砷酸钠(Na2HAsO4,iAsⅤ,0~10mmol/L)和甲基亚胂酸(CH3AsO,MMAⅢ,0~2μmol/L)24h,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞生存率;诱导性偶联质谱分光光度(ICP-MS)法测定细胞内总砷(tAs)含量。结果不同剂量范围内的iAsⅢi、AsⅤ和MMAⅢ均能够显著降低BAEC的细胞生存率(P<0.01),且具有剂量-效应关系;iAsⅢi、AsⅤ和MMAⅢ暴露24h的BAEC细胞的50%生存率(IC50)经计算分别为24.1μmol/L、155.9μmol/L和1.7μmol/L,对BAEC的细胞毒性从大到小依次为:MMAⅢ>iAsⅢ>iAsⅤ;相同暴露剂量和时间下,BAEC对MMAⅢ暴露的砷摄取速度明显高于iAsⅢ暴露(P<0.01)。结论无机砷甲基化的活性中间产物MMAⅢ对BAEC的细胞毒性要明显强于无机砷化合物。