p27^kipl及相关分子Skp2在U937细胞增殖过程中的表达变化及相互关系

p27^kipl为CIP／KIP家族的主要成员，对细胞周期起负调节作用。由于p27^kipl的蛋白水平主要受到S期激酶相关蛋白2（S-phase kinase—associated protein 2，Skp2）介导的细胞周期依赖性、底物特异性的泛素-蛋白酶体途径调节，因此p27^kipl降解水平的调节对其正常生物学功能的发挥至关重要。Skp2为人类F-box蛋白家族成员，介导p27^kipl的多聚泛素化及随后的蛋白水解。研究发现Skp2在人类多种肿瘤中都有表达，并且与肿瘤组织的分化程度及预后相关。我们旨在对Skp2参与介导的p27^kipl的泛素-蛋白酶体途径降解与p27^kipl的稳定性之间的关系进行探讨，运用目前比较公认的血清饥饿合并释放方法同步化处理U937细胞，结合Western blot、免疫荧光双标记及激光共聚焦技术检测在不同生长状态下p27^kipl、Skp2及其他细胞周期相关分子在U937细胞内的表达和定位情况。     

自发性气胸复张后引发局限型肺水肿1例报告

一、病例介绍自发性气胸复张后引发局限型单侧性肺水肿,临床较少见。最近,作者遇到1例,报告如下:患者:男,46岁,半月前搬重物后突发右侧胸痛伴胸闷、干咳,无畏寒、发热与心悸、心慌,来我院就诊。体检:神清,呼吸尚平稳,18次/分,律齐;体温37度,血压140/90mmHg。辅助检查:血常规WBC     

以港口为中心的沿海城市配送系统的动力机制

港口是沿海城市的战略依托。然而,由于通常距离城区较远,港口在沿海城市配送系统的构建中一直处于边缘。随着“港城互动”发展理念的实施,港口在沿海城市配送系统中承担的功能正逐渐转变。依据沿海城市配送系统的逻辑构造和动力学运行机理,可以从理论上推导出“港口”应该成为“沿海城市配送系统”的中心,而现实中“港口”也具备了成为“中心”的可能性与必要性,具体表现为港口集疏运体系的建设提供了“成为中心”的硬件基础,港口多个部门的整合提供了“成为中心”的软性经验,港口信息系统的先进提供了“成为中心”的技术保障,港口环境保护的重视提供了“成为中心”的必然要求。     

人肝癌组织中γ-谷氨酰转移酶异常表达及其基因甲基化程度的研究

目的探讨γ谷氨酰转移酶（ＧＧＴ）基因在人类肝癌发生过程中的表达及改变机制。方法以病理组织学、生物化学和分子生物学方法,将自身配对的肝癌、癌旁组织和远癌组织中总ＲＮＡ纯化,对ＧＧＴ的表达与改变进行了分析;并设计两套引物,以逆转录巢式ＰＣＲ法扩增ＧＧＴ５′非编码区（ＮＣ）基因和限制性内切酶消化分析了不同肝癌组织中ＧＧＴ基因的甲基化程度。结果在病理组织学证实的２４例肝癌、癌旁和远癌组织中：①从肝癌灶至远癌的不同组织中,总ＲＮＡ浓度呈逐步升高趋势,三种不同组织间的差异均有显著性（Ｐ＜０．０５）;②癌组织中总ＧＧＴ比活性（Ｕ／ｇ）较癌周和远癌组织明显升高（Ｐ＜０．０５）;③以自行设计建立的逆转录巢式ＰＣＲ法,成功地扩增ＧＧＴ的５′ＮＣ基因片段,特异性强且区带清晰,ＰＣＲ产物经酶切分析证明,ＧＧＴ基因５′ＮＣＭ３位点（ＣＣＧＧ）,其内位Ｃ在癌灶、癌周和远癌组织中的低甲基化频率分别为７０．８３％,５８．３３％和５４．１７％,非常明显地高于同组中已甲基化程度。结论肝癌组织中ＧＧＴ基因甲基化程度较低,且与肝癌ＧＧＴ的异常表达关系密切,对肝细胞癌变可能起促进作用。     

磷酸化P27kip1的表达与非霍奇金淋巴瘤的恶性相关

目的探讨P27kip110位丝氨酸(Ser10)和187位苏氨酸(Thr187)磷酸化形式的蛋白质表达水平与非霍奇金淋巴瘤(NHL)恶性程度的关系。方法采用免疫组织化学方法检测88例NHL及15例良性增生淋巴结中Ser10、Thr187磷酸化P27kip1和P27kip1蛋白的表达,结合临床及病理资料进行统计分析。结果两种磷酸化位点的P27kip1蛋白在良性增生淋巴结(不包括生发中心)中的阳性率明显低于NHL,随着肿瘤侵袭性的增加,两种磷酸化位点的P27kip1蛋白表达水平增高,与增殖指标Ki-67呈正相关。Thr187磷酸化P27kip1蛋白的阳性率与P27kip蛋白表达水平呈正相关,Ser10磷酸化P27kip1蛋白的阳性率与P27kip1蛋白表达水平表现为负相关。结论磷酸化的P27kip1与NHL的恶性程度有关,联合检测磷酸化P27kip1与P27kip1蛋白的表达水平可为NHL的临床诊断和治疗提供参考。     

急性丙型肝炎患者病毒株部分基因克隆及其序列分析

目的探讨HCV感染在肝炎发生中的病原学作用。方法对89例急性肝炎进行HCV标志物分析,并从HCVRNA阳性的5例非甲非乙型急性肝炎患者血清中提取HCVRNA,经随机引物逆转录合成cDNA,先以型别特异的PCR法分型,再用巢式PCR扩增部分核心基因区序列,将产物连接p-GEM-T载体,在大肠杆菌中表达后测序分析。结果非甲非乙型急性肝炎中HAV、HBV和HCV阳性分别占47.2%、28.1%和15.7%,HAV和HBV双重感染占14.6%,非甲、非乙和非丙肝炎占9%;HCV分型显示Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅱ/Ⅲ混合型分别占85.8%、7.1%和7.1%;Ⅱ型血清用于序列分析,扩增序列424bp与原设计完全一致。急性肝炎株间核苷酸同源性在98.1%～99.5%。氨基酸同源性在97.6%～99.2%;前者的同源性在Ⅰ型为91.9%,在Ⅱ型为94.3%～95.6%;后者与Ⅰ型、Ⅱ型的同源性在92.3%～95.8%。结论HCV为引起非甲非乙型急性肝炎的主要病毒之一,以Ⅱ型为主,应引起临床重视。     

血清鸟嘌呤酶活性酚钠试剂法测定及其影响因素探讨

采用国产试剂建立了鸟嘌呤酶（ＧＵ）测定法，并对其底物浓度，最大吸收峰，方法精密度等影响因素进行了探讨，其结果，以双倒数作图法测得ＧＵ的米氏常数（Ｋｍ）为０．０６０３ｍｍｏｌ／Ｌ，呈色后的最大吸收高峰在６３０ｎｍ；方法批内批间变异系数（ＣＶ）分别为２．９２％，５．３６％，正常人血清ＧＵ活性，男性１９．０６±３．１９ＩＵ／Ｌ，女性为１９．７±３．２０ＩＵ／Ｌ，性别间差别无统计学意义（Ｐ〉０．０５），对     

血清α─L─岩藻糖苷酶测定对诊断肝脏疾病价值的探讨

血清α─Ｌ─岩藻糖苷酶测定对诊断肝脏疾病价值的探讨唐琴华，陆建新南京铁道医学院附属医院２１０００９α－Ｌ－岩藻糖苷醇（α－Ｌ－Ｆｕｃｏｓｉｄａｓｅ，ＡＦＵ，ＥＣ３、２、１、５１）是一种溶酶体酸性水解酶，广泛分布于人体组织细胞和体液中，其主要生理功能是...