RT-PCR结合GeneScan检测SARS病毒的高灵敏度技术的建立及应用

目的建立高度敏感的检测SARS病毒(SARS—CoV)RNA的技术，提高SARS病毒检出率。方法用RT—PCR技术扩增SARS—CoV 138bp片段并荧光标记后，用ABI-310毛细管电泳仪和GeneScan软件对扩增产物进行分析，并以峰高的方式给出产物的相对产量，参考空白对照和阴性对照的峰高定出本批实验检测基线。高于基线为SARS病毒阳性。结果检测了来自20例SARS患的67份标本，与常规的琼脂糖凝胶电泳法的结果(23／67)相比，GeneScan法(38／67)检测SARS—CoV的灵敏度提高22．4％。全部20例患的1-5种标本中都有1种、2种甚至3种、4种检出为阳性。病程1-22天的患均能检出阳性。结论ABI-310仪检测SARS—CoV的灵敏度较高，有助于早期诊断。     

荧光原位杂交技术五色探针在产前诊断中的应用价值

目的研究分析产前诊断中应用荧光原位杂交技术(FISH)的临床价值。方法选取我院50例孕妇抽取羊水体位培养后进行染色体核型分析,其中50例患者同时进行荧光原位杂交技术(FISH)五色探针监测间期核细胞核染色体数目检测。结果荧光原位杂交技术诊断和染色体核型分析诊断成功率均为100.00%,染色体核型分析报告时间为(23.32±4.33)天,荧光原位杂交技术诊断报告时间为(3.22±1.08)天。荧光原位杂交技术诊断检测结果与染色体核型分析一致率为100.00%。结论产前诊断中应用荧光原位杂交技术的成功率高,可靠行强,且报告时间短,但不能完全替代常规的染色体核型分析。     

IL －4和 IL －13基因多态性与广东惠州地区儿童哮喘发生的相关性

目的：探讨IL－13（Arg130Gln）、IL－4（－589C／T）基因位点多态性与广东惠州地区儿童哮喘发生的相关性。方法采用PCR－RFLP法对34例广东籍哮喘患儿（哮喘组）及30例健康对照儿童（对照组）进行IL－13（Arg130Gln）、IL－4（－589C／T）位点的单核苷酸多态性检测。结果哮喘组与对照组IL－13（Arg130Gln）位点的基因型和等位基因频率差异有统计学意义（P＜0.05）;哮喘组与对照组IL－4（－589C／T）位点的基因型和等位基因频率差异无统计学意义（P＞0.05）;IL－13（Arg130 Gln）基因型AA及AG致儿童哮喘发生的相对危险度要高于基因型GG（P＜0.05）。结论 IL－13（Arg130Gln）基因多态性可能与广东惠州地区儿童哮喘发生存在相关性,并且基因型AA及AG对哮喘发生相对易感。     

不同分娩方式产后盆底障碍的的盆底康复治疗近期疗效观察

目的观察不同分娩方式的产妇产后42d检查诊断盆底功能障碍后,采用生物反馈联合电刺激的近期治疗效果。方法选取我院产后42d复诊时经筛查发现盆底功能障碍后进行一个疗程盆底康复治疗的产妇303例,根据不同分娩方式分为水中分娩组54例,剖宫产组55例,产钳/胎吸助产组9例,会阴侧切101例,会阴撕裂组84例,比较盆底治疗前后产妇盆底肌力、SUI及脏器脱垂情况。结果五组不同分娩方式的产妇经盆底康复治疗后,盆底电测肌电值均较训练前增强,差异有统计学意义(P<0.01)。除产钳/胎吸助产组,其他组盆底Ⅰ、Ⅱ类肌力较训练前增强,差异有统计学意义(P<0.01)。除产钳/胎吸助产外,其余各组经盆底康复训练后压力性尿失禁发生率较之前均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。除产钳/胎吸助产组,其他组阴道前壁脱垂率和子宫脱垂率较训练前降低,差异有统计学意义(P<0.05)。除产钳/胎吸助产组、阴道侧切组,其他组阴道后壁脱垂率较训练前降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论生物反馈联合电刺激治疗不同分娩方式的盆底功能障碍近期疗效显著。对产钳/胎吸助产发生盆底功能障碍的产妇和阴道侧切伴阴道后壁膨出的产妇需要强化疗程。     

惠州地区22671例孕妇孕早中期唐氏综合征产前筛查结果分析

目的 分析惠州地区22 671例唐氏综合征血清学筛查结果,评价孕早期和孕中期产前筛查胎儿染色体异常的效率.方法 对2015年1月至2016年9月来自广东省惠州市第一妇幼保健院产前诊断中心产检的22 671例单胎妊娠孕妇进行血清学筛查,计算筛查效率,对筛查结果异常者进行产前诊断并分析胎儿染色体核型异常结果.结果 在22 671例受检孕妇中,共筛查出21-三体综合征高风险1152例,18-三体综合征高风险33例,神经管畸形(NTD)高风险38例.其中孕早期21-三体综合征的阳性率为5.83％(765/13 109),18-三体综合征阳性率为0.21％ (28/13 109),孕中期21-三体综合征阳性率为4.05％(387/9 562),18-三体综合征阳性率为0.05％(5/9 562),NTD的阳性率为0.40％(38/9 562).检出21-三体综合征10例、18-三体综合征4例、13-三体综合征1例,其他染色体异常3例.其中孕早期占77.78％(14/18),孕中期占22.22％ (4/18).结论 孕早期和孕中期血清学产前筛查可有效降低出生缺陷,重视孕早期产前筛查有利于早期诊断胎儿染色体异常.     

Detection of factor Ⅷ intron 1 inversion in severe haemophilia A

Objective Screening the intron 1 inversion of factor Ⅷ (FⅧ) in the population of severe haemophilia A(HA) in China and performing carrier detection and prenatal diagnosis. Methods Using LD-PCR to detect intron 22 inversions and multiple-PCR within two tubes to intron 1 inversions in sereve HA patients. Carrier detection and prenatal diagnosis were performed in affected families. Linkage analysis and DNA sequencing were used to verify these tests. Results One hundred and eighteen patients were seven diagnosed as intron 22 inversions and 7 were intron 1 inversions out of 247 severe HA patients. The prevalence of the intron 1 inversion in Chinese severe haemophilia A patients was 2. 8% (7/247). Six women from family A and 2 from family B were diagnosed as carriers. One fetus from family A was affected fetus. Conclusion Intron 1 inversion could be detected directly by multiple-PCR within two tubes. This method made the strategy more perfective in carrier and prenatal diagnosis of haemophilia A.     

北京汉族群体21号染色体上4个STR位点的遗传多态性

目的研究人类21号染色体上唐氏综合症关键区域内或附近的4个短串联重复序列(D21S1432、D21S2039、D21S1414、D21S1270)在中国汉族人群中的遗传多态性。方法应用Chelex法提取北京地区无血缘关系汉族253份个体血样DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增,非变性聚丙酰胺凝胶电泳或ABI鄄310电泳分型结合测序进行STR分型。结果得到4个STR基因座等位基因频率、各基因座的杂合度、个体识别率、多态信息含量等群体遗传学数据。4个位点基因型分布均符合Hardy鄄Weinberg平衡定律。结论21号染色体上4个STR位点多态性较好,基因型分布符合Hardy鄄Weinberg平衡定律,具有较高的个体识别率,在法医学及唐氏综合征的基因诊断和产前基因诊断研究中具有较高的应用价值。     

Detection of factor Ⅷ intron 1 inversion in severe haemophilia A

Objective Screening the intron 1 inversion of factor Ⅷ (FⅧ) in the population of severe haemophilia A(HA) in China and performing carrier detection and prenatal diagnosis. Methods Using LD-PCR to detect intron 22 inversions and multiple-PCR within two tubes to intron 1 inversions in sereve HA patients. Carrier detection and prenatal diagnosis were performed in affected families. Linkage analysis and DNA sequencing were used to verify these tests. Results One hundred and eighteen patients were seven diagnosed as intron 22 inversions and 7 were intron 1 inversions out of 247 severe HA patients. The prevalence of the intron 1 inversion in Chinese severe haemophilia A patients was 2. 8% (7/247). Six women from family A and 2 from family B were diagnosed as carriers. One fetus from family A was affected fetus. Conclusion Intron 1 inversion could be detected directly by multiple-PCR within two tubes. This method made the strategy more perfective in carrier and prenatal diagnosis of haemophilia A.     

RP-HPLC同时测定黑水缬草药材中缬草烯酸和缬草素含量

目的:建立同时测定黑水缬草药材中缬草烯酸和缬草素含量的HPLC检测方法。方法:采用Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.5%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～5 min,60%A→70%A;5～22 min,70%A→82%A;22～30 min,82%A→82%A;30～35 min,82%A→90%A),流速1 mL·min-1,采用切换波长法(268 nm检测缬草烯酸,255 nm检测缬草素),柱温35℃。结果:缬草烯酸、缬草素质量分别在0.0747～1.1952μg(r=0.9999)和0.0373～0.5971μg(r=0.9998)范围内线性关系良好;平均加样回收率(n=6)分别为99.8%(RSD=1.3%),100.2(RSD=1.4%)。结论:本法操作简便,结果准确,重复性好,为评价黑水缬草药材的质量提供了可靠的分析方法。     

新生儿高胆红素血症与继发性血小板增多症之间的关系及意义

目的了解新生儿高胆红素血症患儿胆红素的变化与继发性血小板增多症之间的关系及临床意义。方法选取新生儿科322例患有高胆红素血症的患儿,回顾性分析其血常规检测中血小板计数及血清胆红素浓度,同时在产科选取100名正常的新生儿,检测其血常规中血小板数量进行对照。结果 322例患有高胆红素血症的新生儿反应性血小板增多的发生率为20.8%,100例正常的新生儿反应性血小板增多的发生率为11.0%,差异有统计学意义(P<0.05);高胆红素血症不同胆红素浓度患儿反应性血小板增多症的发生率差异无统计学意义(P>0.05);322例高胆红素血症患儿中,合并有反应性血小板增多症的患儿黄疸消退的时间比血小板正常的患儿黄疸消退的时间要长,差异有统计学意义(P<0.05)。结论高胆红素血症在一定程度上可导致患儿的血小板反应性增多,这种增多的血小板可影响患儿黄疸的消退时间,因此应引起临床上的重视,对患儿要给予积极治疗,以减少并发症的发生。