支原体检测用培养基的质量稳定性考察

目的  考察支原体检测用培养基存放在15~25 ℃不同时间的质量稳定性及其影响因素。方法  支原体肉汤、支原体半流体、精氨酸支原体肉汤、精氨酸支原体半流体培养基灭菌后在15~25 ℃存放0、21、35、49、70d,检测各时段4种培养基的外观、pH值和灵敏度,综合分析3个质量指标的变化规律,以及引起变化的因素。结果  4种支原体检测用培养基的3个质量指标相互作用,均随存放时间延长而变化：存放21 d内,支原体肉汤和半流体培养基内环境变化最剧烈,颜色变化明显,pH下降较快;存放35 d内,4种培养基质量符合中国药典标准,不同稀释度的对应支原体生长管数均达到接种管数的2/3或以上。结论  4种支原体检测用培养基在15~25 ℃存放35 d,质量符合标准;存放过程中,分装容器的密封性决定溶于培养基的空气总量,进而影响培养基的质量稳定性。     

结肠癌患者单核或树突状细胞MICA的表达及其与NK细胞活性的关联

目的:观察结肠癌患者单核或树突状细胞是否表达MHCⅠ类相关抗原A(MICA),并分析MICA+单核细胞的频率是否与患者体内NK细胞的活性相关联。方法:首先利用流式细胞仪检测MICA在外周血单核细胞和由单核细胞诱导而来树突状细胞(DCs)上的表达;并用IL-15和IFNα-刺激树突状细胞,观察MICA表达的变化;然后检测患者外周血NKG2D+、CD16+、CD69+NK细胞的频率及NK细胞的杀伤活性;最后分析MICA+单核细胞的频率是否与NK细胞表达NKG2D及其杀伤活性关联。结果:与健康个体相比,结肠癌患者MICA+单核细胞的频率无显著变化。未成熟DCs表达MICA,但受IL-15和IFNα-刺激后,结肠癌来源的DCs表面MICA的表达无显著上调。结肠癌患者外周血NKG2D+、CD69+NK细胞的频率显著降低,NK细胞的杀伤活性显著降低,而CD16+NK细胞的频率无明显变化。结肠癌患者MICA+单核细胞的频率与NK细胞表达NKG2D无明显关联,但与NK细胞杀伤靶细胞时CD107a的表达正相关。结论:结肠癌患者体内单核细胞表达MICA与NK细胞表达NKG2D无关,但高频率MICA阳性的单核细胞与NK细胞的抗肿瘤活性正相关。     

固相MHCI类相关抗原A刺激的NK细胞对树突状细胞活性的影响

目的:观察固相MHCI类相关抗原A(iMICA)刺激的NK细胞对树突状细胞(DCs)活性的影响.方法:首先取新鲜分离及受固相MICA刺激的异体NK细胞,或IL-2、及IL-2联合iMICA刺激的自体NK细胞与未成熟DCs(iDCs)按5:1比例孵育24 h后,用流式细胞术(FCM)分析HLA-DR+或CD86+频率的DCs.然后取自体NK细胞以iMICA刺激后,按1:5的比例与iDCs孵育24 h后,FCM检测DCs上HLA-DR、CD86的表达.最后在NK细胞与DCs的共培养体系中加人抗IFN-γ抗体,观察DCs上HLA-DR、CD86表达的变化.结果:当NK细胞与iDCs孵育比例为5:1时,异体新鲜分离的与自体活化的NK细胞均能杀伤iDCs;而MICA无协同作用.当NK细胞与iDCs孵育的比例为1:5时,iMICA刺激的NK细胞可促进DCs表达HLA-DR和CD86;而加人抗IFN-γ抗体可抑制 NK细胞诱导DCs表面HLA-DR和CD86表达的上调.结论:异体新鲜分离的或自体活化的NK细胞杀伤iDCs时,无需iMICA的刺激;但当NK细胞的数目明显低于iDCs时,iMICA可刺激NK细胞分泌IFN-γ促进DCs成熟.     

共表达膜型IL-15和RAE的细胞克隆的筛选和鉴定

目的筛选能够共表达膜型IL-15和RAE的细胞株,为扩增和活化特定免疫细胞提供有效的实验工具。方法前期工作中已通过潮霉素筛选获得共表达膜型IL-15和RAE的BaF3细胞,但阳性细胞所占的比例较低。本实验通过有限稀释法先筛选高表达RAE的单克隆细胞株,再筛选高表达膜型IL-15的单克隆细胞株,最终获得了1株共表达膜型IL-15和RAE的单细胞克隆。将该细胞株与NK细胞共培养后,通过IFN-γ的分泌验证其生物学活性。结果流式细胞仪证实该细胞株能够高水平共表达膜型IL-15和RAE。并具有很强的活化NK细胞的效应。结论成功地制备了共表达膜型IL-15和RAE的单克隆细胞株,为活化特定免疫细胞,如IKDC和NK细胞提供实验工具。     

护理干预对预防下肢骨折手术后深静脉血栓形成的作用

目的:探讨围手术期护理干预对预防下肢骨折术后深静脉血栓形成的作用。方法:收集60例下肢骨折患者按手术编号随机分为观察组和对照组,每组各30例,两组患者均采用内固定手术并相应常规治疗,且观察组在围手术期予以护理干预,连续观察两月,比较两组患者深静脉血栓形成情况及继发肺栓塞情况,并统计患者住院时间。结果:经护理干预观察组深静脉血栓形成发生率6.67%明显少于对照组的16.67%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05);观察组无1例继发肺栓塞,对照组有1例继发肺栓塞发生且死亡;观察组患者平均住院时间明显短于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:围手术期予以护理干预可有效预防深静脉血栓的形成,进而缩短患者住院时间,提高患者生活质量,临床值得应推广实施。     

城市社区空巢中老年妇女代谢综合征聚集情况分析

目的通过对城市社区空巢中老年妇女代谢综合征组分的聚集情况进行调查,了解她们的健康状况以及为进一步向她们提供社会支持提供依据。方法选择湖州市三个街道166例年龄在55~75岁的社区空巢中老年妇女为研究对象,对其人口学特征及生化指标进行检测。结果 166例中老年妇女中有157例生化指标完全,其中73例患代谢综合征,患病率为46.5%。不同年龄中老年妇女代谢综合征组分一项、三项异常率比较,差异均有统计学意义(P<0.01),代谢综合征组分二项、四项异常率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论代谢综合征各组分的聚集在社区空巢中老年妇女中的异常率较高,尤其对55~65岁妇女代谢综合征一项组分异常者应重点干预。对她们开展代谢综合征及其相关危险因素的干预及社会支持,对改善中老年妇女的生命质量具有一定的现实意义。     

下调VEGF表达影响鼻咽癌细胞放射敏感度的机制

目的　应用RNA干扰技术抑制人鼻咽低分化鳞状上皮细胞癌细胞株CNE-2中血管内皮生长因 子（VEGF）表达,研究阻断VEGF基因表达对鼻咽癌细胞放射敏感度的影响及机制。方法 构建针对 VEGF的siRNA真核表达载体pU-VEGF-siRNA（CNE-2组）、1个阴性对照质粒（CNE-2/Neg-siRNA 组）、经脂质体转染至CNE-2细胞（CNE-2/VEGF-siRNA组）,用平板克隆形成实验检测在6MV-X线 0、2、4、6、8、10 Gy照射后克隆形成能力及通过单击多靶模型、线性二次模型拟合放射生物学参 数,流式细胞检测分析细胞周期和细胞凋亡的变化,用RT-PCR定量分析三组细胞中Cyclin D1、Cyclin E、P16和P53的mRNA表达。结果 经6MV-X线0、2、4、6、8、10 Gy照射后细胞存活率显著下降, CNE-2/VEGF-siRNA组细胞经D0和2 Gy照射后的存活分数明显低于CNE-2组、CNE-2/Neg-siRNA组; CNE-2/VEGF-siRNA组中G1/S期细胞周期阻滞更为明显。在Cyclin D1、Cyclin E、p16和p53基因中, Cyclin D1mRNA表达在放疗后6、12和24 h进行性升高,差异有统计学意义,而其他基因变化差异无统 计学意义,Western blot检测显示Cyclin D1蛋白表达在放疗后24 h明显升高。结论 下调VEGF表达可 增加鼻咽癌细胞的放射敏感度,其机制可能是通过Cyclin D1信号通路途径使细胞周期发生G1/S期阻滞。     

来曲唑用于多囊卵巢综合征患者促排卵效果的观察

多囊卵巢综合征（polycystic ovarian syndrome,PCOS）是育龄妇女常见的内分泌疾病。枸橼酸氯米芬（CC）是目前国内临床上用于促排卵的一线药物,但其具有外周抗雌激素作用,影响妊娠率。来曲唑（LE）是一种口服的、具有高度特异性的非甾体类芳香化酶抑制剂,     

辅助生殖助孕妊娠后胚胎停育25例原因分析及心理干预

现将我生殖中心从2008-01—2009—12接受辅助生殖助孕后发生的25例胚胎停育患者的心理问题和采取的心理干预措施进行总结,报告如下。