DMSO增强原核表达TAT-EGFP（Apoptin）穿膜效应的研究

目的：构建pET15b-TAT-EGFP和pET15b-TAT-Apoptin,观察表达的融合蛋白TAT-EGFP在细胞内的定位及TAT-Apoptin的诱导Caski凋亡活性。方法：人工合成编码TAT蛋白转导区的DNA片段,插入载体pET15b后再连接EGFP和Apoptin基因,组成pET15b-TAT-EGFP（Apoptin）重组子。转化大肠杆菌,1mMIPTG诱导TAT-EGFP（Apoptin）融合蛋白表达,His亲和层析柱纯化。培养的Caski细胞经过10%DMSO处理1h后,加入融合蛋白孵育1h,观察TAT-EGFP进入细胞的情况。同时用TUNEL检测TAT-Apoptin诱导Caski凋亡的情况。结果：成功地构建了高表达pET15b-TAT-EGFP（Apoptin）重组子,纯化了分子质量约为30KD的融合蛋白TAT-EGFP和17KD的TAT-Apoptin融合蛋白,并在体外培养的Caski细胞经10%DMSO处理后证实TAT-EGFP融合蛋白穿透生物膜的能力明显增强。结论：通过对TAT-EGFP融合蛋白的表达纯化及活性分析,证实了DMSO能够增强TAT的蛋白转导作用,为肽类及生物大分子药物进入组织细胞内发挥治疗作用提供了理论基础。     

涂阳肺结核病人家庭接触者调查报告

2005年1-12月对我院2003-2004年结核项目门诊检出的1 124例涂阳肺结核病人的家庭接触者3 941人进行调查,现将调查结果报告如下.[第一段]     

腹茧症的外科诊治现状

笔者复习相关文献，对腹茧症的病因、病理、临床特点、诊断及治疗等方面的研究现状作一综述，旨在加深临床医生对该病的认识。     

共培养诱导小鼠ES细胞向软骨细胞分化的初步研究

目的 探讨软骨共培养体系诱导小鼠ES细胞向软骨细胞分化的可行性.方法 GFP标记的小鼠ES细胞初步分化为EB后,将EB消化为单个细胞,同猪关节软骨细胞按一定比例(1∶3)昆合后接种于PGA材料,体外培养1周后植入裸鼠皮下3周取材.对照组为EB细胞接种组及软骨细胞接种组.取材后行连续冰冻切片,切片分别做荧光拍照,HE染色及甲苯胺蓝染色.结果 组织学结果显示,EB细胞接种组形成畸胎瘤;软骨细胞对照组形成软骨组织;实验组形成软骨组织和畸胎瘤的混合体.甲苯胺蓝染色结果和荧光照片对照结果显示,部分软骨组织GFP阳性,由小鼠ES细胞分化而来.结论 软骨共培养体系可以诱导小鼠ES细胞向软骨细胞分化,但得到的软骨组织不纯,混有畸胎瘤组织.     

678例慢性乙肝患者CD3、CD4、CD8的临床检测分析

我院从2 0 0 0年开始,对6 78例慢性乙肝患者进行血液CD3、CD4 、CD8的检测,同时对30例健康人进行对照分析,现将检测结果总结如下:　1　材料和方法　1.1　检测对象　6 78例慢性乙肝患者均来自我院住院和门诊病人,年龄最小7岁,最大6 6岁,病程均在6个月以上,对照组30例,来自健康人     

经尺骨鹰嘴截骨入路双钢板治疗肱骨髁间骨折

[目的]探讨经尺骨鹰嘴截骨入路应用肱骨内、外髁解剖钢板治疗肱骨髁间骨折的方法和临床疗效。[方法]2002年7月-2006年3月采用经尺骨鹰嘴截骨入路结合肱骨内、外髁解剖钢板治疗肱骨髁间骨折26例，男19例，女7例；年龄15-46岁，平均35岁。按照Riseborough和Radin的分类方法，Ⅱ型6例，Ⅲ型18例，Ⅳ型2例。[结果]术后25例骨折复位满意，1例复位稍差，无切口感染，1例术中牵拉损伤尺神经，22例获得随访，时间6～19个月，平均13．5个月。尺神经损伤恢复，骨折全部愈合，无内固定松动及断裂，愈合时间14～24周，平均17周。根据改良的Cassebaum评分系统评价肘关节功能，其中优5例，良13例，可3例，差1例，优良率81．8％。[结论]经尺骨鹰嘴截骨入路显露骨折充分，肱骨内、外髁解剖钢板固定肱骨髁间骨折牢固可靠，能有效的防止骨折不愈合，并可满足患者早期进行关节功能锻炼。     

三七总皂甙对淀粉样β25～35肽诱导的NG108-15细胞老年性痴呆模型的保护作用

背景：阿尔茨海默病(Alzheimer disease，AD)的病理病因虽然还没有完全清楚，但目前认为β-淀粉样肽(amyloid β-peptide，Aβ)是引起AD的胆碱能神经功能紊乱的主要成分。因此，Ag的产生及其对神经细胞的影响，以及寻找该病的发病机制、治疗方法及其有效的治疗药物成了医药界的研究热点。目的：观察三七总皂甙(PNS)对NG108-15细胞老年性痴呆模型的影响，为寻找该病的发病机制提供佐证，为研究和开发中药的新成分提供理论依据。设计：体外平行对照实验。单位：广西中医学院新药开发中心，广西中医学院生物化学教研室。对象：实验在广西中医学院新药开发中心完成。NG108-15细胞：中国科学院上海细胞研究所提供。PNS：云南玉溪维和制药厂生产。Aβ25～35片段：德国Sigma公司产品，批号：042K49501。MTT(四甲基噻唑蓝)，德国Sigma公司产品，批号：020609。cAMP(环-磷酸腺苷)日本ャマサ酱油株式会社产品，批号：00207。胚胎牛血清(FBS)：由美国Hyclone公司提供，批号：0405。DMEM培养基：美国GIBCO公司产品，批号：0311。干预：NG108-15细胞培养法：含50mL／L胚牛血清、10g／LHAT、10g／L青霉素和链霉素(1：1)的DMEM培养液，置100mL／LCO2、37℃用的培养箱内培养殖，每隔一天换一次液，4d传代一次。主要观察指标：利用MTT法、细胞计数法和细胞形态学检测法观察PNS对NG108-15细胞存活率和细胞突起的改变。结果：PNS能增加Aβ25～35片段神经毒性诱导的NG108-15细胞存活率[增殖状态：(311&;#177;21)％，分化状态：(113&;#177;31)％，P&;lt;0．05，F=5．567]、细胞突起率[增殖状态：(25．66&;#177;3．65)％，分化状态：(67．97&;#177;2．47)％，P&;lt;0．05，F=6．471]和细胞突起平均长度[增殖状态：(25．66&;#177;3．09)μm，分化状态：(25．66&;#177;3．65)μm，P&;lt;0．001，F=12．641]。结论：PNS具有减轻细胞对Aβ的神经毒性反应和促进细胞突起生长的作用，表明PNS能对老年性痴呆的病理发展有拮抗作用。     

阴道镜检在诊断宫颈病变432例中的临床价值

阴道镜检查在宫颈癌前病变和宫颈癌早期诊断中的价值已得到肯定，它是目前诊断宫颈不良病变简单易行有效的方法。现将我院432例宫颈病变的阴道镜检查结果分析如下。     

挫折是最好的礼物

听过一个故事：一个年轻人刚从军中退伍，只有高中学历，无一技之长，只好到一家印刷厂担任送货员。一天，这个年轻人要将一车书送到某学校7楼办公室。当他把书放到电梯门口等候时，一位警卫走过来：“这电梯是给老师搭乘的，其他人一律不准搭，你必须走楼梯。”年轻人解释：“我要送一整车书到7楼办公室，这是你们学校订的书!”警卫面无表情地说：“不行就不行，你不是老师，不准搭电梯。”两人在电梯口吵了半天，但警卫依然不予放行。     

福辛普利预处理对缺氧复氧期豚鼠心室肌细胞Na+/Ca2+交换电流的影响

目的:观察福辛普利晚期预处理对缺氧复氧心室肌细胞Na /Ca2 交换电流的影响。方法:应用全细胞膜片钳方法,记录观察酶解的成年豚鼠心室肌细胞Na /Ca2 交换电流在缺氧复氧期的变化。结果:缺氧复氧明显增加心肌Na /Ca2 交换电流,在-100mV和 60mV时较对照组分别增加41.05%及32.75%,福辛普利预处理后可明显抑制缺氧复氧心肌Na /Ca2 交换电流,在-100mV和 60mV时分别减少17.90%及14.20%,有助于减少钙内流,减轻钙超载。结论:福辛普利预处理可抑制缺氧复氧心肌Na /Ca2 交换电流逆向转运。