基于多指标定量评价的正交试验优选五味黄连洗液水提工艺

目的:以多指标综合评分法优选五味黄连洗液的水提工艺。方法:参考单因素试验结果,以加水倍数、提取时间、提取次数作为考察因素,将测得栀子苷含量、黄芩苷含量、盐酸小檗碱含量、盐酸黄连碱含量和干浸膏得率作为考察对象,选用L₉(3⁴)正交试验优化五味黄连洗液的提取制备工艺。结果:优选五味黄连洗液制备工艺的最佳条件为加入10倍量水,提取2次,每次2h。结论:以多指标优选五味黄连洗液的提取工艺,不仅可以兼顾多成分含量的变化情况,还可为五味黄连洗液实现规模化大生产提供实验依据。     

脂质超声微泡增强AAV介导的致密结构细胞的基因转导

目的:探讨超声介导的脂质微泡能否增强腺相关病毒(AAV)对具有致密结构的细胞的转导效率.方法:制备载AAV-eGFP的脂质超声微泡,以Malvern粒度检测仪检测微泡粒径及分布,选用人支气管上皮细胞16HBE14o-为模型细胞,采用Transwell小室细胞培养技术培养具有紧密结构的人支气管上皮细胞16HBE14o-,利用倒置荧光显微镜定性观察转导效率,采用流式细胞技术进一步定量检测转导效率.结果:本试验制备的载AAV脂质超声微泡呈圆球形均匀分布,平均粒径为2.46±1.2 μm;脂质微泡携同超声处理能显著增强AAV对形成致密结构的人支气管上皮细胞16HBE14o-转导效率.结论:超声介导脂质微泡为AAV在基因治疗中的应用提供了一种新的途径,为AAV在体内的靶向应用奠定了基础.     

转铁蛋白修饰的载基因前阳离子脂质体制备及其表达研究

本文制备、优化转铁蛋白修饰的前阳离子脂质体，并研究其相关性质。通过薄膜分散膜挤压法制备空白前阳离子脂质体；以鱼精蛋白缩合质粒DNA与空白前阳离子脂质体作用形成载基因前阳离子脂质体(PLPD)；转铁蛋白(transferrin，Tf)再与PLPD作用形成转铁蛋白修饰的载基因前阳离子脂质体(Tf-PLPD)；中心组合设计优化制备工艺；以lacZ为报告基因转染人肝癌细胞株HepG2；测定形态、粒径、电位和转染效率。结果显示，PLPD形态近似于球体，平均粒径为(228.9±8.0) nm，多分散指数为0.122±0.020(n=3)；zeta电位为(-25.08±2.50) mV(n=3)，转染效率(12.18±3.80) mU·mg^-1(protein)。Tf-PLPD平均粒径为(240±12) nm，多分散指数为0.150±0.030(n=3)；zeta电位为(-24.10±2.50) mV(n=3)；转染效率(24.26±2.60) mU·mg^-1(protein)是裸质粒的20倍；实验结果也表明血清的存在不影响PLPD和Tf-PLPD的转染效率；PLPD和Tf-PLPD小于阳离子脂质体LPD对人肝癌细胞HepG2，SMMC7721和张氏正常肝细胞3种细胞株的毒性。由此可见，转铁蛋白修饰的前阳离子脂质体作为基因转运的非病毒载体具有良好的应用前景。     

转铁蛋白及其受体作为药物载体的研究进展

目的介绍转铁蛋白及其受体在药学中的应用和新的研究方向。方法通过查阅近年来国内外有关转铁蛋白和转铁蛋白受体特点及其应用的文献,综述了转铁蛋白和转铁蛋白受体的特点和分类;转铁蛋白转运金属离子的能力;利用转铁蛋白受体的抗体向脑部转运药物的应用;转铁蛋白和转铁蛋白受体的抗体与药物的结合方法及应用。结果转铁蛋白具有多态性,主要被划分为血清转铁蛋白、卵(清)转铁蛋白和乳(清)转铁蛋白;转铁蛋白受体主要有转铁蛋白受体1和转铁蛋白受体2;转铁蛋白既能转运金属离子又能转运化学药物及基因药物,并在利用转铁蛋白受体的抗体向脑部转运药物方面显示出巨大的应用前景;转铁蛋白可与药物通过静电引力直接吸附,也可以与药物通过共价键结合。结论转铁蛋白及转铁蛋白受体在靶向药物转运中得到了有效的应用,并将受到更为广泛的关注。     

坚龙胆抗炎活性部位筛选及抗炎机制探讨

目的:筛选坚龙胆抗炎作用的活性部位,并研究其抗炎机制。方法:分别选用ICR小鼠180只,随机分为18组,分别为正常组,模型组,醋酸地塞米松组(5mg·kg-1),坚龙胆乙醇粗提物、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水各层低、中、高剂量组(6,3,1.5g·kg-1),除正常组外,采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型、冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性模型,分别ig给予相应药物,正常组和模型组给予等体积的5%聚山梨酯-80,每天1次,连续7d,检测小鼠的耳肿胀度及小鼠腹腔毛细血管通透性。取180只SD大鼠,同上方式分组及给药,采用角叉菜胶致大鼠足跖肿胀造模,进行抗炎活性筛选;另取大鼠50只,随机分为5组,分别为空白组,模型组,阳性药醋酸地塞米松组(5mg·kg-1),乙醇粗提物组(6g·kg-1),水部位组(6g·kg-1)。每日ig1次,连续7d,采用角叉菜胶致大鼠胸腔炎症造模,测定胸膜炎大鼠胸腔渗出液丙二醛(MDA),前列腺素E2(PGE2),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量以及肺组织一氧化氮(NO),PGE2,TNF-α,IL-1β和MDA含量。结果:与模型组比较,各模型组小鼠耳廓肿胀、小鼠腹腔毛细血管通透性、大鼠足跖肿胀、大鼠胸腔及肺组织的炎症因子NO,PGE2,TNF-α,IL-1β,MDA均明显增高(P<0.01);与空白组比较,水部位高、中剂量(6,3g·kg-1)对二甲苯致小鼠耳廓肿胀,急性炎症导致的腹腔毛细血管通透性,角叉菜胶引起的大鼠足跖肿胀均有显著抑制作用(P<0.05,P<0.01),其余部位活性弱或基本无活性,坚龙胆水部位组(6g·kg-1)能抑制胸腔液MDA,PGE2,TNF-α,IL-1β含量升高(P<0.01),坚龙胆水部位组(6g·kg-1)能抑制肺组织NO,MDA,PGE2,TNF-α,IL-1β含量升高(P<0.01)。结论:坚龙胆水部位为抗炎活性部位,抗炎机制可能与影响炎症介质产生和抗氧化作用有关。     

球面对称设计优化胸腺五肽三甲基壳聚糖纳米粒的制备条件

目的探讨以三甲基壳聚糖为材料制备胸腺五肽纳米粒的制备条件。方法离子胶凝法制备胸腺五肽三甲基壳聚糖纳米粒(Tp5-TMC-NP),用球面对称设计优化制备条件,以粒径和包封率为评价指标,考查TMC浓度(X1)、海藻酸钠浓度(X2)、Tp5加入量(X3)三个指标对制备条件的影响,将实验结果用数学方法处理并进行方程模型拟合,根据拟合方程及由此绘制的反应曲面图(Response Surface Plot)考察指标的最优值和各因素相对应的最佳取值范围。结果以优化条件制得纳米粒粒径110.6 nm,药物包封率78.8%。结论制备方法简便,具有工业化生产的可行性。