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重组白细胞介素10-pEGFP-N2质粒构建及表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 将IL-10基因定向克隆入pEGFP-N2质粒,探讨采用构建的质粒转染支气管上皮细胞H292朱,稳定表达IL-10和荧光蛋白可行性。方法 采用定向克隆技术,将IL-10基因克隆入pEGFP-N2质粒,用构建成功的IL-10--pEGFP-N2质粒在Fuge-6介导下转染培养的支气管上皮细胞株(H292),利用免疫组化、RT-PCR检测细胞中IL-10蛋白白和mRNA的表达,并在荧光显微镜下观察荧光蛋白表达,结果 (1)重组后的pEGFP-N2质粒已成功载入IL-10基因。(2)IL-10--pEGFP-N2质粒转染支气管上皮细胞H292株后,可在H292株内表达IL-10mRNA,IL-10蛋白和荧光蛋白。结论 重组的IL-10--pEGFP-N2质粒可在上皮细胞内表达IL-10和荧光蛋白。由于两者共用一个启动子,荧光蛋白表达可报告IL-10表达,适用于动物实验气道内的IL-10转基因研究。 相似文献
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目的 :探讨白三烯C4 (LTC4 )对体外培养人气道上皮细胞和平滑肌细胞内皮素 1(ET 1)基因表达及分泌水平的影响。方法 :在离体培养人气道上皮细胞株 (16 HBE)及气道平滑肌细胞 (ASMC)培养液中加入不同浓度LTC4 ,采用酶联免疫吸附 (ELISA)法测定培养液ET 1水平 ,用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)方法检测ET 1mR NA表达水平。结果 :LTC4 能使离体培养的 16 HBE及ASMC两种细胞ET 1mRNA的表达水平显著上调 ,并刺激ET 1释放 ,当LTC4 浓度≥ 10 -8mol/L时 ,两种细胞ET 1分泌水平均显著高于对照组。结论 :LTC4 能上调 16 HBE及ASMC两种细胞ET 1mRNA的表达并刺激ET 1释放 ,这可能是白三烯致哮喘气道炎症及重塑的重要机制之一。 相似文献
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射频消融结合健择顺铂治疗肺癌的短期疗效与安全性 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:观察在CT引导下射频消融(RFA)结合健择 顺铂治疗周围型非小细胞肺癌(NSCLC)的短期疗效和安全性。方法:选择临床分期为Ⅲb,Ⅳ期周围型NSCIC病人14例,给予健择 顺铂化疗,随后在CT引导下行经皮RFA,完成3周期化疗后CT平扫和增强扫描评价疗效,观察RFA术中术后并发症。结果:14例病人完成化疗和RFA:化疗第3周期完成后肿瘤体积明显缩小,总有效率(CR PR)85.7%.肿瘤组织密度均有显降低,表现为凝固性坏死和去血管征象;并发症包括局限性气胸2例,术后少量咯血3倒,术后发热11例。结论:RFA结合健择 顺铂化疗治疗Ⅲb、Ⅳ期周围型肺癌的短期疗效非常显,并发症发生率低.安全性高。 相似文献
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经鼻持续气道正压通气治疗阻塞性睡眠呼吸暂停综合征的压… 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 通过全夜多导睡眠图(PSG)有关呼吸紊乱和低氧血症的指标,预测阻性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)患才所需的经息罩持续性气道内正压敢(CPAP)的最佳压力水平(Pm),并用于指导临床应用。方法采用RHK-5500型多导睡眠监测联接BkiPAP(ST/D)系统测定18例OSAS患者经鼻罩CPAP的Pm并推导其与呼吸紊乱指数(RDI)或血氧饱和度低于90%时间(TS90)的回归方程。有杉此回归方程 相似文献
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支气管哮喘患者气道粘膜活检组织MMP-9表达的临床研究 总被引:8,自引:0,他引:8
目的 探讨支气管哮喘患者气道粘膜上皮细胞是否表达基质金属蛋白酶 9(MMP 9)及其与气道嗜酸粒细胞浸润、气流受限的关系。方法 选取 10例支气管哮喘患者、6例COPD患者及 10例正常对照 ,进行纤维支气管镜粘膜活检 ,对活检组织做MMP 9免疫组化及HE染色 ;同时对患者进行肺功能测定及组胺激发实验。结果 所有支气管哮喘患者气道粘膜上皮MMP 9免疫组化均为阳性 ,2 / 6的COPD患者气道粘膜上皮MMP 9免疫组化为阳性 ,而所有正常对照气道粘膜上皮MMP 9免疫组化均为阴性 ;相关分析显示 :支气管哮喘患者气道粘膜上皮MMP 9免疫组化评分与气道嗜酸粒细胞计数呈正相关 (r =0 6 2 ,P <0 0 1) ,与FEV1呈负相关 (r =- 0 5 1,P<0 0 1) ,与PD2 0 FEV1不相关。结论 支气管哮喘患者气道粘膜上皮表达MMP 9,此可能为导致气道嗜酸粒细胞浸润及气流受限的重要原因。 相似文献
98.
连续性血液净化与急性呼吸窘迫综合征的救治 总被引:3,自引:0,他引:3
急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是指由心源性以外的各种肺内、外致病因素导致的急性、进行性坪吸衰竭,是一组连续变化的临床综合征,往往是多器官功能障碍综合征(MODS)中最早出现的器官功能障碍。主要病哩改变是肺微血管通透性增高而导致的肺水肿及透明膜形成;治疗上遵循呼吸病学与危重病医学紧密结合的原则,治疗措施包括:积极治疗原发病,机械通气改善肺氧合功能,多器官功能支持(MOST)以及调节液体平衡等. 相似文献
99.
反义内皮素转换酶核酸对尘螨过敏哮喘患者外周血单个核细胞释放白细胞介素5的抑制作用 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 探讨转导反义内皮素转换酶 (ECE)核酸的气道上皮细胞对尘螨过敏性患者外周血单个核细胞释放Th1/Th2相关细胞因子的影响。方法 尘螨过敏患者 2 1例 ,分离其外周血单个核细胞 (PBMC) ,根据实验要求分为 :未刺激组 (A组 )、反义ECE上皮细胞 +PBMCs组 (A1组 )、对照组上皮细胞 +PBMCs组 (A2 组 )及螨刺激组 (B组 )、反义ECE上皮细胞 +PBMCs+尘螨提取液组 (B1组 )、对照组上皮细胞 +PBMCs+尘螨提取液组 (B2 组 ) ,共培养 72h ,螨刺激组同时加入尘螨提取液 2 0 μg/ml。培养上清用酶联免疫吸附 (ELISA)法检测白细胞介素 5 (IL 5 )、γ干扰素 (IFN γ)。结果2 1例患者中有 12例患者经尘螨刺激后IL 5释放明显增加。将 12例患者进行统计学分析发现 ,未经尘螨刺激时 ,A1组IL 5和IFN γ水平分别为 [(6 0± 1 3)× 10 -9g/L]和 [(6 3± 2 6 )× 10 -9g/L],A2 组为 [(7 5± 1 1)× 10 -9g/L]、[(70± 5 2 )× 10 -9g/L],两组比较差异均无显著性 (P >0 0 5 ) ;尘螨刺激后 ,B1组的IL 5水平和IFN γ分别为 [(8 2± 1 6 )× 10 -9g/L]、[(10 0± 4 1)× 10 -9g/L],B2 组分别为[(12 0± 1 8)× 10 -9g/L]、[(15 3± 71)× 10 -9g/L],两组IL 5比较差异有显著性 (P =0 0 4 7) ,而IFN γ水平比较差异无显著性 (P > 相似文献
100.
目的克隆并分析华南地区粉尘螨主要变应原Derf2的cDNA片段。方法广州地区收集、鉴定、培养的粉尘螨,提取总RNA,RT-PCR扩增其Derf2片段,连接入T载体,测序和分析。结果Derf2片段长度为558bp,与GenBank公布的Derf2(D10448)的核酸序列比较,在62个核苷酸处插入了87个核苷酸,插入点前后的核酸序列没有差异,按原读码框进行读码显示插入了29个氨基酸,插入点前后的氨基酸序列没有改变。结论获得华南地区粉尘螨的Derf2cDNA片段,和已公布的序列相比,有较大差异。 相似文献