骨髓间充质干细胞定向诱导成类软骨细胞的实验研究

目的　体外诱导骨髓间充质干细胞 (MSCs)向软骨细胞表型分化 ,探讨其分化的条件 ,为其作为软骨组织工程种子细胞提供实验基础。方法　取第二代成年大鼠骨髓间充质干细胞 ,实验组用无血清培养液诱导 ;对照组用含 10 %胎牛血清的培养液自然分化。Ⅱ型胶原免疫组化、甲苯胺蓝染色、透射电镜检测其分化情况。统计学分析不同时间、不同接种密度的软骨分化率。结果　诱导后的MSCs具有软骨细胞特点 ,不同诱导时间、不同接种密度的Ⅱ型胶原免疫组化阳性率有显著差异。诱导 14d为最佳 ,诱导率与细胞接种密度成正相关。结论　成年大鼠骨髓间充质干细胞在无血清培养基能向软骨细胞方向转化。     

Lubeluzole对大鼠脑缺血再灌流时神经元的保护作用

目的 为了观察lubeluzole对大鼠脑缺血再灌流时神经元的保护作用。方法 本实验采用阻塞SD大鼠大脑中动脉2h，再灌流1、3、6、12、24、48h制成局灶性脑缺血动物模型，用免疫组化方法观察给药前后神经生长因子、脑源性神经营养因子在神经元的表达特点。结果 神经生长因子、脑源性神经营养因子在脑组织的分布相似。正常组和假手术组的皮质、丘脑等处的神经元为阴性；缺血模型组的缺血区皮质、丘脑的神经元为阴性或弱阳性，阳性神经元主要位于非大脑中动脉供血区和缺血周边区；治疗组缺血区的皮质、丘脑等处的神经元为弱阳性至中等阳性，缺血周边区为强阳性。结论 在缺血后6h内使用lubeluzole能降低神经元受损伤的程度，促进神经元的生长。     

实验性重症肌无力大鼠模型的建立及巨噬细胞在发病机制中的作用探讨

目的探讨早期重症肌无力发病机理中巨噬细胞的作用及巨噬细胞相关的细胞因子和趋化因子的变化。方法用原位杂交探索在EAMG动物模型靶器官肌肉组织中细胞因子和趋化因子mRNA的表达。采用原位杂交和免疫细胞化学染色双染技术,检测在Lewis大鼠EAMG早期,巨噬细胞浸润和程序性细胞凋亡。结果在EAMG早期观察在7和12天的EAMG大鼠肌肉组织中可见TNF-α、IL-1β和IL-6mRNA的表达细胞瞬时爆发,其峰值分别是(8.7±2.2)、(13.1±1.2)和(6.9±2.4)cells/mm2。第15天TNF-αmRNA的表达细胞数量再一次上升,IFN-γ、IL-4、IL-10、TGF-β和溶细胞素的mRNA表达细胞非常低。这些细胞主要在EAMG的早期观察到,范围是1～4cells/mm2。结论(1)EAMG早期大量巨噬细胞浸润,程序性细胞凋亡是浸润的巨噬细胞消除的主要方式;(2)EAMG早期于肌肉组织中细胞因子低水平表达;没有发现C-C趋化因子。     

论卫生行业依法治理

行业依法治理是实践依法治国方略,推进依法治省进程的迫切需要。在全国大力推进行业依法治理工作中,卫生行业的各级行政部门应与时俱进,依靠法律保障,促进卫生行业发展。卫生行业依法治理是指依照卫生法律法规,通过各种途径和形式管理卫生行业各项事务,保证卫生行业各项工作依法进行,逐步实现卫生行业规范化、科学化、法制化。依法治理是一个具有丰富内涵的体系,各级卫生行政部门与广大群众都是实践依法治理卫生行业的主体,而卫生行业依法治理是为实现依法治国方略的目标分解和工作具体化。1开展卫生行业依法治理的重要意义1.1开展卫生行业…     

小神经球体外和脊髓内移植促进神经干细胞向神经元分化

目的 研究神经干细胞小神经球体外和脊髓内移植后的分化。方法 从20周人胚胎分离神经干细胞进行鉴定,经培养成小神经球体外诱导分化;成年雌性Wistar大鼠于T11水平行椎板切开术并横切腰段脊髓,立体定向注射细胞50000个进入两侧脊髓断端中线的3个部位（薄束、楔束及皮质脊髓束）。移植3个月后利用双标免疫荧光观察神经干细胞的分化情况。结果 小神经球实验组在体外和受伤大鼠脊髓内诱导分化的神经元高于单细胞悬液对照组,前者有显著差异．后者有极显著差异。小神经球脊髓移植后细胞的存活率明显增加,与对照组相比有显著差异（P〈0．05）。结论 小神经球移植增加细胞的存活率,分化的神经元数量增加,应当成为较好的脊髓神经干细胞移植方式。     

阿尔茨海默病动物模型的建立及神经干细胞对阿尔茨海默病的治疗作用

目的：建立大鼠阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)动物模型．并观察神经干细胞对AD的治疗作用。方法：30只SD大鼠(体质量250～300g)被随机分为3组：模型组(n=10)、对照组(n=10)和神经干细胞治疗组(n=10)，模型组和神经干细胞治疗组用ALZET微型渗透泵侧脑室内慢性灌注Okadaic acid(OA)；对照组灌注等量的磷酸缓冲液。56d后神经干细胞治疗组在海马处进行神经干细胞移植。76d后用Morris水迷宫实验检测3组大鼠学习记忆能力；用旷场实验观察3组大鼠探究活动能力和紧张度；随后处死大鼠，分别用硫磺素-S法和镀银法检测3组大鼠海马中老年斑和神经元纤维缠结形成情况。结果：模型组的平均逃避潜伏期(mean escape latency，MEL)第1天为84S，第4天为60S；对照组的MEL第1天为66S，第4天为15S；治疗组的MEL第1天为68S，第4天为18S。模型组通过的格子数为21个．对照组为69个，治疗组为61个。模型组大鼠的学习、记忆功能和探究活动与对照组和神经干细胞治疗组相比均明显下降(P&;lt;0．05)；神经干细胞治疗组与对照组相比差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。显微镜下，模型组大鼠在海马可见到大量老年斑沉积和神经元纤维缠结形成：神经干细胞治疗组可见少量老年斑沉积和神经元纤维缠结形成；而对照组大鼠未见老年斑沉积和神经元纤维缠结形成。结论：通过微型渗透泵侧脑室内慢性灌注OA可成功地建立AD动物模型；神经干细胞可提高大鼠的学习和记忆能力并可减少老年斑沉积和神经元纤维缠结形成。     

人胚胎干细胞研究进展

胚胎干细胞 (Embryonic stem cell,ES)是从着床前的内细胞团 (ICM)或原始生殖细胞 (PGCs)经体外分离培养而建立的克隆细胞系。ES细胞的特点是只生长、不分化。并保持早期胚胎发育的多能性。人 ES细胞既具有其他哺乳动物 ES细胞的一般特性 ,又有自己的特殊性。人 ES细胞系的建立及开发利用具有重要意义     

论PBL教学改革中教师的地位和作用

我校临床七年制进行的PBL教学改革取得了较好的成果,培养了学生对医学科学的热爱,提高了学生的自主学习能力、人际交往能力和团队精神。但改革强调以学生为主体的同时,以往教师的作用被大大淡化,因此有必要重申改革中教师对教学工作的热爱、忠诚、设计和责任。     

大鼠骨髓间充质干细胞分化成心肌细胞的实验研究

目的 采用5-氮杂胞苷(5-aza)诱导骨髓间充质干细胞分化成心肌细胞。方法 分离培养骨髓间充质干细胞,采用密度为1．073的percoll分离液分离大鼠骨髓间充质干细胞并进行体外培养和连续传代,在第3代细胞以5-氮杂胞苷进行诱导,用免疫组化的方法鉴定心肌特异性肌钙蛋白I的表达。结果 诱导前,骨髓间充质干细胞形态均一,呈多突起扁平形态,诱导后细胞形态发生变化,细胞之间形成连接,排列方向渐趋一致,免疫组化显示表达阳性。结论 5-aza可诱导骨髓间充质干细胞分化成心肌细胞。     

心肌细胞移植对心梗大鼠心脏血流动力学影响的研究

目的 探讨心肌细胞移植到大鼠疤痕心肌组织后对大鼠血流动力学的影响效果。方法 利用细胞培养和移植技术,将胎鼠心肌细胞移植到心梗后的疤痕组织中,4周后测定左室血流动力学参数。结果 与正常组相比,心梗组大鼠左室收缩末期压(Pes)和左室压力最大变化值(dp／dtmax,dp／dtmin)明显减少,左室舒张末期压(Ped)和等容时间常数(Tc)明显增大;与心梗组相比,移植组上述指标明显改善。结论 心肌细胞移植到大鼠疤痕心肌组织后改善了心梗后大鼠的心脏功能。