珠海市户籍人群中α-地中海贫血的分子流行病学调查

目的 调查珠海市这一新兴“移民”城市人群中的α地中海贫血（简称α地贫）的携带率、基因突变类型及其分布特征。方法 抽取珠海市户籍人口的脐带血随机大样本，用血红蛋白电泳法测定Hb Bart's作为诊断α地贫的阳性参考指标。对所有Hb Bart's阳性样品用PCR的分析法进行α地贫基因分型，并在所有被检样品中进行两种常见静止型α地贫基因（－α^3.7和－α^4.2）的分子筛查。结果 在1548例脐带血样本中，检出Hb Bart's阳性样品190例；经基因分析，130例被确定了α地贫基因型（含131个突变等位基因），其中－－^SEA/αα68例、－α^3.7/αα41例、－α^4.2/αα15例、α^CSα/αα4例、α^QSα/αα1例及－－^SEA/α^QSα1例。值得注意的是，有39例－α^3.7/αα和－α^4.2/αα基因携带者检出自Hb Bart's阴性样品中。此外，尚有7例Hb Bart's阳性（含量为4.62%－7.03%）样品经系统基因分析未发现α地贫基因突变。因此，珠海市户籍人品中的α地贫基因携带率为8.91%（138／1548）；5种已知α地贫基因的基因频率依次为2.23%（－－^SEA）、1.32%(-α^3.7）、0.48%(-α^4.2)、0.13%(α^CSα)和0.065%(α^QSα)。另有92例低水平Hb Bart's阳性（含量为≤1.6%）的样品经基因分析排除了α地贫诊断。结论 阐明了珠海市户籍人口中的α地贫的携带率、基因突变类型及其分布特征，该研究进行遗传咨询和制定该地区基于人群筛查的α地贫预防计划提供了有价值的基础资料。Hb Bart's不宜作为诊断静止型α地贫的脐血筛查指标。     

基因疫苗pcDNA-AChRα211免疫小鼠建立重症肌无力动物模型

目的：用基因疫苗pcDNA-AChRα211，免疫C57BL／6小鼠建立实验性自身免疫性重症肌无力模型（EAMG）。方法：将人乙酰胆碱受体α亚基N端的主要免疫区（AChRα211）的基因片段插入到穿梭载体pcDNA3．0中，构建基因疫苗pcDNA-AChRα211。大量提纯质粒pcDNA-AChRα211后肌肉注射C57BL／6小鼠。用ELISA法检测小鼠血清中抗AChRα211，的IgG（ACh-RAb），并用PCR方法检测外源基因在小鼠各组织器官中的分布情况。结果：双酶切鉴定和序列测定表明构建了含正确目的基因阅读框的重组质粒pcDNA-AChRα211，ELISA分析表明该基因疫苗免疫的C57BL／6小鼠血清中含有AChRAb，且免疫三个月后在小鼠的肌肉、肝、脾、肾中仍可检测到目的基因AChRα211的存在。结论：重组质粒pcDNA-AChRα211作为基因疫苗能够诱导实验性自身免疫性重症肌无力。     

心理治疗在全程助产责任制中的应用

目的探村心理治疗封产科全程助产责任制分娩模式的影响。方法选择2002年3月至2004年9月在我院住院的初产妇1700例（均孕足月、单胎、无难产指征），随机分为治疗组和对照组两组，比较两组分娩方式、产程时间、产后出血。结果第一产程及总产程均短于对照组（P〈0．05），两组剖宫产率、阴道助产率、产后出血率比较均有显著差异（P〈0．05）。结论心理治疗应用于产科全程助产责任制，使产妇得到心理安慰和生理上的帮助，保障母婴健康，值得推广使用。     

医学教育实践中强化人文教育的作用初探

在医学教育过程中,长期以来,过分强调医学知识的传授,忽视人文素质的培养。没有自觉地培养学生的人文关怀,导致从业者的道德修养水平、自身成就感下降。因此,在医学教育中加强人文教育是非常必要的。1能力培养需要人文教育面对世界教育的发展趋势和我国经济建设、社会发展对人才的需求,改善学生的知识结构,加强能力培养,应当作为转变教育思想和观念、深化教学改革的重要方面。过去只注重专业知识的学习,忽视人文素质的修养,毕业生最突出的弱项是缺乏人文的知识和素养。医科毕业生应该是基础强、品德高、有文化的人才。针对上述问题,在当前修…     

综合ICU中低年资护士培训方法探讨

目的探讨为综合ICU培养合格的护理人员的方法。方法根据ICU护士应具备的素质及低年资护士的特点,采用定期集中培训、一对一带教、参加护理查房等方法,对基础理论和基本技能进行强化,重点加强了ICU专科护理知识地训练。结果通过客观考核和主观考核,效果良好。结论经过为期12个月两个时段较规范的岗位培训,低年资护士能较好的适应ICU工作。     

M1型巨噬细胞源外泌体增强卵泡膜细胞的活力

目的:探讨M1型巨噬细胞源外泌体对卵泡膜细胞活力的影响及其作用机制。方法:采用脂多糖(LPS)处理Raw264.7小鼠巨噬细胞,构建M1型巨噬细胞模型及巨噬细胞-卵泡膜细胞共培养体系。超速离心法分离巨噬细胞分泌的外泌体;通过电镜、Western blot和纳米流式检测仪鉴定外泌体。体外分离培养小鼠卵泡膜细胞,与PKH67荧光标记的外泌体共孵育,观察卵泡膜细胞摄取外泌体的情况。CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术分析细胞周期分布,q PCR及Western blot检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1B(CDKN1B)的表达。结果:在巨噬细胞-卵泡膜细胞共培养体系中,LPS诱导的M1型巨噬细胞通过外泌体增强卵泡膜细胞活力。电镜、Western blot及纳米流式检测结果显示,巨噬细胞源外泌体被成功分离。PKH67标记的外泌体与卵泡膜细胞共孵育实验证实卵泡膜细胞能摄取大量巨噬细胞源外泌体。这些外泌体可增强卵泡膜细胞的活力,使卵泡膜细胞G0/G1期比例下降,S期比例升高,且卵泡膜细胞CDKN1B的m RNA及蛋白相对表达量均明显低于对照组。结论:卵泡膜细胞能摄取巨噬细胞分泌的外泌体。M1型巨噬细胞源外泌体通过抑制CDKN1B的表达而增强卵泡膜细胞的活力。     

6-羟多巴诱导大鼠黑质的持续胶质细胞反应

本研究将40μg6- 羟多巴注射到SD大鼠一侧纹状体制作Parkinson病动物模型,研究黑质反应性神经胶质增生在Par kinson病发病过程中的可能作用。筛选成功的模型大鼠,术后12周处死。应用免疫荧光双标记法检测模型大鼠黑质胶质细胞对多巴胺能神经元损伤的反应。结果显示:在注射后12周,损伤侧黑质仍然存在明显的星形胶质细胞反应和小胶质细胞激活。此外,小胶质小结和淋巴细胞浸润的存在提示在注射后12周的注射侧黑质内依然有多巴胺能神经元死亡。结论: 6 -羟多巴对大鼠黑质多巴胺能神经元的急性损伤可以通过胶质细胞反应从而对多巴胺能神经元产生长期的毒性作用。     

甘氨酸受体在甘氨酸抗心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用机制研究

目的：探讨甘氨酸受体在心脏保护中的作用及甘氨酸受体的性质。方法：利用原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞建立心肌缺氧/复氧(A/R)模型，并用甘氨酸受体阻断法和消除细胞外氯离子法, 测定各组培养心肌细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）及一氧化氮（NO）的含量、钙离子浓度和心肌细胞凋亡率。结果：A/R组用甘氨酸处理后SOD活性、NO含量升高，MDA含量、［Ca²⁺］_i、细胞凋亡率降低，与A/R组比较显著差异。分别用甘氨酸受体阻断剂士的宁和消除细胞外氯离子处理后，甘氨酸的上述保护作用明显减弱，与A/R组比较无显著差异。结论：甘氨酸能抑制缺氧/复氧乳鼠心肌细胞的自由基生成、抑制钙超载，减轻心肌细胞的凋亡并增加细胞内SOD等保护蛋白和NO的合成而发挥细胞保护作用。甘氨酸的细胞保护作用可能是通过甘氨酸受体发挥作用的，甘氨酸受体的本质可能是甘氨酸门控氯离子通道。