大鼠胚胎胸腺细胞体外培养后存活率及表面抗原的变化

应用同种胸腺移植治疗免疫缺陷和恶性肿瘤 ,疗效已经得到肯定。但对于胚胎胸腺取出后 ,经体外培养 ,细胞的存活情况及是否需经处理以降低其抗原性 ,尚无统一认识 ,本实验对其进行了研究 ,现报道如下。一、材料与方法1.材料 :孕 16ｄＳＤ大鼠 2 0只 ,由哈尔滨市药检所提供。ＦＩＴＣ标记的小鼠抗大鼠ＣＤ4、ＣＤ8单克隆抗体 ,批号ＣＡ95 13Ｃ -ＵＳＡ。2 .方法 :ＳＤ大鼠在无菌条件下剖腹取胎鼠胸腺 ,用生理盐水冲洗血迹 ,去除被膜、血管 ,用眼科剪剪成 <1ｍｍ3的组织块 3 0 0 0ｍｇ ,研磨过网 ,制成单细胞悬液。将单细胞悬液平均分为Ａ组 (…     

原位RT-PCR法检测柯萨奇B_3病毒感染HeLa细胞中的病毒RNA

利用生物素标记的核苷酸直接掺入法，建立了检测柯萨奇Ｂ３病毒感染的原位逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，并对经柯萨奇Ｂ３病毒感染的ＨｅＬａ细胞和未感染的ＨｅＬａ细胞进行了检测。结果表明，病毒感染的ＨｅＬａ细胞可见阳性信号，细胞呈蓝紫色，而未感染的ＨｅＬａ细胞无阳性信号，细胞不着色。说明该技术可应用于柯萨奇Ｂ３病毒感染的细胞和组织中的病毒ＲＮＡ检测，特别是用于病毒感染组织（如心肌炎、心肌病心肌组织）中病毒ＲＮＡ的定位检测。     

CD-1400全自动血细胞分析仪白细胞分类计数的实验室评价

目的 :比较仪器分类与显微镜目测分类的符合率。方法 :分别用仪器分类和显微镜目测分类 38例健康男性手指血白细胞。结果 :仪器分类和显微镜目测分类二者符合率较高 ,相关性良好 ,且精密度高。结论 :白细胞分析仪干扰因素诸多 ,在各种参数、图形正常的情况下 ,结合临床可作筛选检测。感染、新生儿、血液病等须有手工分类结果     

TGF—β1表达与小鼠病毒性心肌炎细胞凋亡的关系

本实验通过给ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔接种柯萨奇Ｂ－３ｍ病毒（ＣＶＢ３ｍ）诱发病毒性心肌炎（ＶＭＣ）感染病毒９ｄ后，ＶＭＣ检出率９３．３３％，应用原位末端标记法（Ｔ／ＶＮＥＬ）及免疫组化技术检测发现，７６．６７％感染病毒鼠心肌中发现凋亡细胞，７３．３３％，有ＴＧＦ－β１的表达，二者之间分布区域一致，提示细胞凋亡可能参与ＣＶＢ３ｍ诱导的ＶＭＣ的发生，发展，而ＴＧＦ－β１可能参与ＶＭＣ细胞凋亡的调控。     

人腺病毒3型六邻体基因的克隆与鉴定

目的 克隆人腺病毒3型(Ad3)六邻体-L1(Hexon-L1)、六邻体-L2(Hexon-L2)区基因，构建含有该基因的重组质粒，并进行测序鉴定，为进一步构建表达载体，制备基因工程疫苗打下基础。方法 从Ad3感染的HeLa细胞中提取Ad3DNA，用PCR方法扩增Hexon—L1、Hexon-L2基因，将得到的片段定向克隆到克隆载体pUC19质粒中，对克隆片段进行DNA测序鉴定。结果 构建了重组质粒pUC19Hexon，测序结果与Genebank中该序列进行同源性比较证明克隆的片段为。Ad3六邻体序列。结论 成功克隆了Ad3的Hexon-L1、Hexon-L2区基因。     

青蒿素抗柯萨奇B组病毒感染的实验观察

目的 探讨青蒿素体外抗柯萨奇B组3型病毒(CVB3)的作用。方法 以CVB3感染HeLa细胞为实验模型，采用微量细胞病变抑制法、半定量RT-PCR实验和间接免疫荧光实验的方法，观察分析青蒿素对CVB3的直接灭活、阻断吸附和抑制复制的作用，以及青蒿素对CVB3在感染细胞内核酸复制和蛋白表达的影响。结果 青蒿素不同程度地阻断病毒吸附和抑制病毒复制，明显抑制CVB3核酸复制与蛋白表达，未发现有直接灭活病毒的作用。结论 青蒿素类药物具有体外抗CVB3的作用，其抗病毒机制是通过阻断病毒吸附和抑制病毒复制来完成的。     

小鼠病毒性心肌炎与血管内皮细胞凋亡的关系

柯萨奇Ｂ－３ｍ病毒可诱发ＢＡＬＢ／ｃ小鼠急性病毒性心肌炎，本实验通过ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔接种ＣＶＢ３ｍ，感染后８天ＶＭＣ检出率为９３．３３％，应用原位末端标记法及电镜检查发现：ＶＭＣ伴随有心脏血管内皮细胞及心肌细胞凋亡，其阳性率为７０．００％，实验结果提示：血管内皮细胞凋亡可能参与ＶＭＣ的发生与发展。     

秋季婴幼儿腹泻病原学研究

1973年 Bishop 等用电镜方法从急性非细菌性婴幼儿胃肠炎病儿十二指肠粘膜上皮细胞中发现了新的病毒颗粒。同时Flewett 等也从病儿粪便中发现类似颗粒,并认为此病毒在形态上不同于呼肠病毒(Reovirus)和环状病毒(Orbivirus),     

苍耳亭通过调控LOXL1-AS1/miR-520d-5p轴对白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨苍耳亭对白血病细胞的抗癌作用及其机制是否与调控长链非编码RNA（lncRNA）类赖氨酰氧化酶1反义RNA1（LOXL1-AS1）和微小RNA（miR）-520d-5p表达有关。方法 按转染细胞分组：对照组、苍耳亭6 μmol/L组、苍耳亭20 μmol/L组、苍耳亭60 μmol/L组、si-NC组、si-LOXL1-AS1组、苍耳亭+pcDNA-LOXL1-AS1组;采用细胞计数试剂盒（CCK-8）法、流式细胞术检测细胞增殖和凋亡。实时定量PCR（RT-qPCR）检测LOXL1-AS1和miR-520d-5p表达;蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤（Bcl）-2和Bcl相关x蛋白（Bax）蛋白表达。分别转染LOXL1-AS1小干扰RNA、LOXL1-AS1过表达载体至K-562细胞中,通过CCK-8法、流式细胞术、蛋白质印迹法分析干扰LOXL1-AS1表达或过表达LOXL1-AS1联合苍耳亭对K-562细胞增殖、凋亡以及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。双荧光素酶报告实验分析LOXL1-AS1和miR-520d-5p相互作用。结果 苍耳亭处理后K-562细胞增殖抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达、miR-520d-5p表达显著升高（均P＜0.05）,Bcl-2蛋白表达、LOXL1-AS1表达显著降低（均P＜0.05）。干扰LOXL1-AS1表达后K-562细胞增殖抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达、miR-520d-5p表达显著升高（均P＜0.05）,Bcl-2蛋白表达显著降低（P＜0.05）。过表达LOXL1-AS1明显减弱苍耳亭处理对K-562细胞细胞增殖、凋亡以及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。LOXL1-AS1与miR-520d-5p直接结合。结论 苍耳亭可抑制白血病细胞增殖,诱导其凋亡,其机制可能与抑制LOXL1-AS1/miR-520d-5p轴有关。     

ChiCGB方案对非霍奇金淋巴瘤行自体造血干细胞移植的预处理效果

【摘要】目的 探究非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者进行自体造血干细胞移植前行西达本胺+克拉屈滨+吉西他滨+白消安（ChiCGB）方案的预处理效果。方法 选择我院2015年3月~2019年7月收治的66例NHL患者相关资料进行回顾性分析,患者均行自体造血干细胞移植,移植前采用ChiCGB方案预处理。分析自体造血干细胞采集情况、移植完成后造血重建情况、预处理毒性、患者疗效以及生存情况。结果 患者采集单核细胞及CD34+细胞中位数分别为1136×108/kg和1368×106/kg;66例患者均顺利完成造血重建,粒细胞平均植入时间（1032±314）d;血小板平均植入时间（1228±506）d;患者移植期间感染发生率为5606%,移植过程中2级及以上出血、黏膜炎、肝损伤、腹泻、发热、恶心呕吐发生率分别为758%、2576%、2576%、5606%、3636%、6667%;3个月达到完全缓解和部分缓解患者分别为46例和17例,患者移植后总反应率为9545%;患者1年OS率和PFS率分别为8485%和7121%,3年OS率和PFS率分别为7273%和6061%;单因素与COX回归分析结果显示,疾病分期、难治性或者复发性疾病为影响患者3年OS率的独立危险因素（P＜005）;疾病分期是影响患者3年PFS率的独立危险因素（P＜005）。结论 NHL患者行自体造血干细胞移植前采用ChiCGB方案预处理无不可接受预处理毒性,同时患者预后较好,是自体造血干细胞移植患者安全有效的预处理方案。