2012年临床常见细菌分离及耐药性监测

目的：了解2012年我院细菌分离和耐药情况,为临床治疗提供依据。方法细菌鉴定和药敏实验采用VITEK微生物分析仪,耐药性分析采用WHONET5.4软件。结果2012年我院收集患者首次分离株2698株,最常见的菌种分别为大肠埃希菌（13.8%）、铜绿假单胞菌（12.4%）、白色假丝酵母菌（12.3%）、肺炎克雷伯菌（9.7%）、鲍曼不动杆菌（8.5%）、金黄色葡萄球菌（7.2%）、光滑假丝酵母菌（4.2%）、表皮葡萄球菌（3.8%）、粘质沙雷菌（3.0%）、阴沟肠杆菌（2.4%）,其中革兰阴性菌占57.6%,革兰阳性菌占22.9%,真菌占19.5%;耐甲氧西林金葡菌（methicillin resistant staphylococcus aureus,MRSA）检出率为65.6%,MRSA对β内酰胺类和其他抗菌药物的耐药率明显高于甲氧西林敏感的金葡菌（methicillin-sensitive staphylococcus aureus,MSSA）,未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药的葡萄球菌;肠球菌对万古霉素的耐药率为3.8%,粪肠球菌对大多数抗菌药物的耐药率明显低于屎肠球菌;大肠埃希菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率为0.6%、0.8%,低于肺炎克雷伯菌（8.3%、8.9%）;铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南耐药率分别为41.3%、32.7%,对头孢吡肟的耐药率最低（20.4%）;鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为61.8%、61.4%,对阿米卡星的耐药率最低（30.3%）,但它对多种抗生素的耐药率较高,均在50%以上;2012年泛耐药铜绿假单胞菌检出率为2.1%;白色假丝酵母菌对伏立康唑敏感性最好,未发现耐药株。结论定期进行细菌耐药性监测有助于了解我院细菌耐药性变迁,为临床经验用药提供理论依据。     

中国海域分离的啮氏艾肯菌致病性和抗生素敏感性研究

目的 就中国海域分离的啮氏艾肯菌对小鼠的毒力及伤口感染情况进行研究,并进行抗生素敏感性实验.方法 昆明小鼠腹腔注射啮氏艾肯菌悬液,观察一般状态、白细胞计数和血培养.第5天脱颈处死后解剖取脏器甲醛固定,石蜡包埋、制片,HE染色,光镜观察;昆明小鼠致伤后浸泡在含啮氏艾肯菌的人工海水中45～60 min,打捞后分笼于层流柜中饲养.于致伤浸泡后不同时间做白细胞计数及血培养,并观察一般状态和伤口炎性反应,定时取伤肢分泌物做细菌培养;实验完毕后伤肢甲醛同定,石蜡包埋、制片,HE染色,光镜检查;用K-B法做啮氏艾肯菌对各种抗生素药物敏感性实验.结果 小鼠注射啮氏艾肯菌液后,白细胞升高,感染12 h后20%小鼠心和肝脏有细菌生长.小鼠感染啮氏艾肯菌后,病变部位以肺、肝及.肾脏为重,病变性质主要是造成血液循环障碍,引起不同程度的充血、出血及血停滞现象.致伤小鼠经含啮氏艾肯菌的海水浸泡后,6、12、24、48、72 h伤肢培养均为阳性,感染后48 h时20%小鼠肠组织细菌培养阳性,其余时间点和其他组织细菌培养均为阴性.伤肢组织可见肌纤维排列疏松、紊乱、断裂,横纹肌间较多炎细胞浸润.啮氏艾肯菌对复方新诺明、哌拉西林、美洛培南、磺胺的敏感性仅为67%,对其他抗生素均表现为敏感.结论 中国海域分离的啮氏艾肯菌具有致病力,啮氏艾肯菌对复方新诺明、哌拉西林、美洛培南、磺胺的敏感性较低,对其他抗生素均表现为敏感.     

血清脂联素水平与肿瘤关系的实验研究

目的：探讨脂联素作为血清学标志物在肿瘤诊断和治疗中的价值。方法：用酶联免疫吸附试验对292例不同肿瘤患者和60名健康人血清中脂联素水平进行检测。结果：正常男女之间血清脂联素水平无差别;60名乳腺癌患者血清平均脂联素水平明显低于30名健康女性平均血清脂联素水平,66名结肠癌患者血清平均脂联素水平明显低于60名健康对照者,胃癌患者血清中脂联素水平与正常人血清脂联素水平无明显差别;肝癌和肺癌患者血清脂联素平均水平略高于正常人,但无统计学意义。结论：乳腺癌和结肠癌患者血清脂联素低于正常人;肝癌、肺癌、胃癌患者体内脂联素与正常人无明显差别。循环系统中低水平脂联素可能是某些肿瘤的危险因素。     

抗腐败西瓦菌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及初步鉴定

目的 制备和鉴定抗腐败西瓦菌单克隆抗体(mAbs),为建立重要海洋细菌快速ELISA检测试剂盒奠定基础.方法 用灭活腐败西瓦菌免疫小鼠,利用杂交瘤细胞融合技术,制备出抗腐败西瓦菌杂交瘤细胞株,用Giemsa染色对其进行染色体鉴定,并用间接ELISA方法筛选、鉴定其与腐败西瓦菌及其他重要海洋细菌的交叉反应性和效价.结果 共获得4株抗腐败西瓦菌的杂交瘤细胞株(02D6、02H12、03G4、03A7),均符合杂交瘤细胞染色体特点,其培养上清效价为10-1～10-2,具有良好的特异性和免疫反应性.结论 研究制备、筛选出抗腐败西瓦菌的特异性抗体,有助于进一步建立重要海洋细菌快速检测试剂盒.     

2006年度临床常见细菌分布及耐药性监测分析

目的了解2006年度本院细菌分布及对抗菌药物耐药情况,为临床抗感染治疗提供依据。方法药物敏感性试验采用琼脂纸片扩散法,耐药性分析采用WHONET 5.4软件。结果2006年度我院共收集患者首次分离株细菌1 497株,革兰阴性菌878株,革兰阳性菌400株,真菌219株。铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、粪肠球菌、阴沟肠杆菌是最常见菌,检出率分别为17.0%、13.2%、8.9%、7.0%、6.9%、4.7%、3.7%、3.2%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的比例分别为63.9%、82.1%,未发现对万古霉素和替考拉宁耐药的葡萄球菌。肠球菌对万古霉素耐药率为1.0%,对替考拉宁耐药率为3.8%。革兰阴性菌对亚胺培南-西拉司丁钠的敏感性最好,产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和克雷伯菌株的检出率分别为26.1%和34.2%。在痰标本中铜绿假单胞菌检出率最高,为22.2%,对亚胺培南-西拉司丁钠和头孢他啶敏感性最好;在血标本中大肠埃希菌检出率最高,共9株,占血标本阳性率的18.4%,对万古霉素敏感性最好,耐药率为0。结论加强细菌耐药性监测,以推动临床抗菌药物的合理使用。     

用夹心ELISA检测沙眼衣原体

目前，国内对沙眼衣原体感染的实验室诊断以直接免疫荧光法和聚合酶链式反应（PCR）为主，这两种方法本身的局限性限制了其在广大基层医院的应用，使其难以成为一种临床常规检查项目。酶免疫检测法以其快速、简单、经济和可同时检测大量标本而深受广大基层医院的欢迎。本文建立的方法将会满足国内广大基层医院的需求。材料和方法1材料1．l抗沙眼衣原体的多克隆抗体1．2抗沙眼衣原体75KDOMP的单克隆抗体5D9和ID6（本室自制）。2方法2．l沙眼衣原体多克隆抗体的制备，纯化与标记2．1．1家兔的免疫于家兔腋窝、腹股沟皮下多点注射台福氏完…     

胃癌组织CD1α和survivin表达及临床意义

目的:观察胃癌组织中树突状细胞及树突状细胞前体的分布,并探讨survivin作为胃癌生物治疗靶抗原的可能性.方法:用免疫组织化学染色对不同类型胃癌组织132例(中分化腺癌72例,低分化腺癌60例)CD1α,CD68,S100和survivin蛋白的表达进行了检测.结果:中分化腺癌CD1α表达率为33%(24/72),低分化腺癌CD1α表达率为10%(6/60),二者有显著性差异(x2=6.56,P＜0.05).中分化腺癌S100表达率为50%(36/72),低分化腺癌表达率30%(18/60),二者无显著性区别(P＞0.05).CD1α阳性胃癌组织S100表达均阳性,二者有良好的一致性.中分化腺癌CD68表达为91.6%(66/72),低分化腺癌表达率为60%(36/60),二者无显著性差别(P＞0.05),CD68和CD1α在中分化腺癌和低分化腺癌中的分布也有良好的一致性.Survivin在中分化腺癌的表达为91.7%(66/72),低分化腺癌表达为90%(54/60),二者无显著性差别(P＞0.05).结论:survivin和DC的结合在胃癌生物治疗中具有潜在而重要的应用价值,以survivin为靶抗原的胃癌个体化DC疫苗值得进一步深入研究.     

未行LASIK手术92例原因分析

目的 :分析 92例未行准分子激光角膜原位磨镶术 (LASIK)的原因 ,了解手术的适应范围。方法 :对 4 6 0例近视患者进行术前常规检查 ,对其中未行手术的 92例的病因进行分析。结果 :92例中眼底病变 32例占 34.8% ;对手术顾虑大 2 8例占30 .4 % ;眼压偏高 12例占 13.1% ;角膜厚度不足 8例占 8.7% ;角膜屈光力偏大偏小 6例占 6 .5 % ;角膜点状浸润、瘢痕 4例占4 .3% ;睫状肌痉挛 2例占 2 .2 %。结论 :近视预行LASIK手术的患者有一定的选择性 ,医患双方术前应加强谈话、沟通     

河豚毒素中和性单抗的制备、鉴定及TTX检测方法的建立

目的研制河豚毒素中和性单抗,建立基于河豚毒素单抗的河豚毒素检测方法。方法用TTX-KLH免疫Balb/c小鼠,用TTX-BSA间接ELISA筛选,建立杂交瘤细胞系,腹腔接种Balb/c小鼠诱生腹水,Protein A Sepharose CL4B亲和柱纯化,SDS-PAGE、间接ELISA鉴定;用常规法确定TTX对昆明小鼠的LD50;将单抗和TTX混合物注入小鼠腹腔,检测单抗对TTX的中和能力;建立检测TTX的竞争ELISA法。结果获得了2株TTX中和性单抗,腹水用Protein A Sepharose CL 4B纯化后抗体纯度大于95%;常规间接ELISA检测,显示单抗5E7的结合能力高于5E4。单抗对2 LD50 TTX攻击昆明小鼠的保护率为50%,建立了基于中和性单抗的TTX检测方法,TTX的最小检出浓度为1.56μg/mL。结论获得了TTX中和性单抗,对致死剂量TTX攻击昆明小鼠的保护率为50%,建立了基于中和性单抗的TTX检测方法,TTX的最小检出浓度为1.56μg/mL。