荧光定量PCR快速检测在病毒性角膜炎诊疗中的应用

目的 为病毒性角膜炎的患者进行疱疹病毒病原学快速检测,根据检测结果指导临床治疗。方法 选取未进行抗病毒药物治疗的患者,根据病情分别取其泪液或病变区角膜上皮细胞,用荧光定量PCR方法对单纯疱疹病毒（herpessimplex virus,HSV）1型、HSV2、水痘-带状疱疹病毒（varicella zoster virus,VZV）、人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）和EB病毒（EB virus,EBV）的核酸进行定量检测。结果 90例病毒性角膜炎患者中有54例检测出疱疹病毒核酸,检出率为60.0%;发病后首次就诊的病毒性角膜炎患者中疱疹病毒核酸的检出率为94.7%,明显高于多次发作后就诊的患者（检出率为34.6%）,2者差异比较具有统计学意义（P<0.001）。发病后首次就诊的病毒性角膜炎患者感染的主要病毒为HSV1、EBV和HSV2,多次发作后就诊的患者感染的病毒主要为HSV1和HCMV。5种疱疹病毒中HSV占病毒检出数的74.0%,上皮型角膜炎中疱疹病毒核酸的检出率为30.6%,基质型角膜炎中疱疹病毒核酸的检出率为95.1%,基质型角膜炎中疱疹病毒检出率高于上皮型角膜炎(P<0.001）。上皮型角膜炎中HSV1病毒的检出率和平均拷贝数明显高于其他病毒;基质型角膜炎中HSV1、HSV2病毒的拷贝数明显高于其他疱疹病毒拷贝数。结论 病毒性角膜炎患者应尽早进行核酸检测以明确疱疹病毒类型及拷贝数,检测结果为进一步的抗病毒治疗和疗效判断提供科学依据。     

加强学术交流促进甘肃省免疫学事业发展

甘肃省免疫学会学术年会于近期在兰州军区兰州总医院召开。来自军、地医院，大专院校和科研单位的100名代表出席了会议，共收到论文116篇。免疫学专家分别就：①人禽流感；②基因治疗研究现状；③朊粒与朊粒病；④现代疫苗概念及分类；⑤肝相关干细胞研究进展；⑥基因芯片技术在临床诊断中的应用；⑦RNA干扰；⑧临床实验室管理的基本要求等作了专题报告。现摘要简述如下。     

南海海域真菌检测

无菌采集海水,经真菌增菌、真菌培养、分纯后进行鉴定和药敏实验.结果 :从南海海域分离出的真菌38株,以胶红酵母菌分离率最高,其次是无名假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌;在真菌药敏实验中,以两性霉素B敏感性最好,没有发现耐药株.认为南海海域真菌种类广泛,此项调查对于该海域真菌感染的防治有重要意义.     

DC负载肝癌相关抗原后诱导CTL的效应与机理研究

目的：探讨DC负载肝癌相关抗原后诱导CTL的效应与机理。方法：用GM—CSF和IL-4从健康人外周血诱导DC，使之负载肝癌相关抗原，用流式细胞术检测负载肝癌抗原后DC对自身淋巴细胞的活化；分别用MTT法和ELISA检测负载肝癌相关抗原后DC活化的淋巴细胞培养上清中TNF和IL-12水平；用原位杂交检测淋巴细胞内IFN-γmRNA表达；用流式细胞术检测负载肝癌相关抗原DC活化后淋巴细胞表面Fas—L表达；最后检测负载肝癌相关抗原：DC活化的淋巴细胞对肝癌细胞的特异性杀伤及淋巴细胞培养上清对肝癌细胞的非特异性抑制。结果：负载肝癌相关抗原DC在体外诱导活化的淋巴细胞在体外对肝癌细胞的杀伤以特异性CTL为主，同时分泌较高水平Thl型细胞因子IL-12和TNF，负载抗原DC活化的淋巴细胞培养上清对肝癌细胞也具非特异性抑制作用。结论：研究结果为肝癌DC疫苗的进一步研究及临床应用奠定了基础。     

介绍一种简便快速的血凝板洗涤法

基层实验室处理血凝板多采用1～2%盐酸浸泡和流水冲洗。我们经反复比较,推荐一种消毒效果好,简便快速的洗涤法。     

人外周血中树突状细胞的诱导及鉴定

目的：从健康人外周血诱导高纯度树突状细胞（dendritic cell,DC)方法：用贴壁法从健康人外周血获取单核细胞，对传统的诱导方法加以改进，经GM－CSF（100ng/ml)和IL－4（500U/ml)持续诱导7天，在此期间不再补充新的细胞因子，新鲜培养基和促成熟因子，以获取高纯度DC，结果：经上述方法处理后，从健康人外周血中诱导出了大量高纯度DC，其能高表达HLA－I，Ⅱ类分子，共刺激分子和粘附分子，显示出成熟DC的特征，这些DC能强烈诱导同种体淋巴细胞的增殖，其内吞能力在第3天达最高，之后明显下降，结论：本研究所建立的从外周血获取大量成熟DC的方法经济，简便，为DC的深入研究和临床应用奠定了基础。     

河豚毒素及石房蛤毒素拮抗剂研究进展

河豚毒素(TTX)和石房哈毒素(STX)均是剧毒的非蛋白毒素,极微量即可置人于死地。TTX主要存在于河豚的睾丸、卵巢、肝、脾、眼球和血液内;STX主要来源于海洋或淡水中的某些有毒藻类,并通过食物链蓄积于贝类蟹类等水产品中。以往的研究已经明确了这两种毒素的理化性质及中毒机制,目前的研究主要是针对这两种毒素的拮抗剂,如单链抗体片段、人造雪卡毒素、4-氨基吡啶及其衍生物、新鲜余甘果汁及S-P剂、新斯的明和东莨菪碱等。     

人脐带间充质干细胞的高效分离及对小鼠免疫功能的影响

目的建立一种从健康人脐带中分离间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）的简单、经济、高效方法,并探讨其对小鼠免疫细胞的影响。方法取经剖宫产获得的健康人脐带血管与外膜之间的胶状物并剪切成小于1 mm3的小块,用组织块贴壁法直接培养MSCs,并用获得的MSCs注射于健康C57 BL/6小鼠皮下。结果获得的MSCs高表达CD105、CD73、CD44和CD90,不表达CD34、CD45和人类白细胞抗原 DR,符合干细胞的各种生物学特性。结论用简便、经济的方法获得了健康人脐带间充质干细胞,注射C57 BL/6小鼠体内后,小鼠的血细胞及T细胞亚型未改变,自身免疫系统稳定,为进一步的研究奠定了实验基础。