CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶原核表达载体的构建及其抗药活性分析

目的 分析头孢噻肟-水解酶-14(CTX-M-14)型超广谱β-内酰胺酶(ESBL)型菌抗药活性,为临床治疗提供参考.方法 收集分离产ESBL大肠埃希菌46株,采用PCR克隆目的 基因,采用基因重组技术构建pET28a-CTX-M-14质粒,采用BL21大肠埃希菌作为宿主菌进行表达,采用液体稀释法检测其抗药活性.结果 PCR扩增条带在约900 bp位置处,序列分析结果显示其与目的 基因符合;转化子对青霉素类、头孢一、二代及三代中头孢噻肟、头孢曲松耐药,对庆大霉素、四环素、喹诺酮类药物、碳青酶烯类敏感;对头孢他啶体外试验敏感,对加有酶抑制剂的抗生素稳定敏感.结论 本研究成功构建了CTX-M-14型ESBL原核表达载体,且具有广泛抗药活性;此为临床合理选择治疗药物提供了理论依据.     

小剂量尿激酶治疗不稳定性心绞痛35例疗效观察

小剂量尿激酶治疗不稳定性心绞痛３５例疗效观察哈尔滨医科大学附属第一医院内科（１５０００１）李为民，范长青，郭小兵，黄永麟１９９０年１月至１９９５年８月，我院对３５例经内科常规药物治疗无效的不稳定性心绞痛（ＵＡ）病人试用小剂量原激酶治疗，取得了较好的效...     

产超广谱β-内酰胺酶菌300株去巯基型基因检测

超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamase,ESBLs)的产生是革兰阴性杆菌耐药的重要原因之一.SHV是去巯基的英文缩写,SHV型ESBLs可以水解β-内酰胺类抗生素的巯基,主要引起产ESBLs菌对青霉素类抗生素耐药[1-3].为了解本院产ESBLs菌株的SHV型基因携带情况和临床分布特点,作者应用PCR技术对本院临床标本分离的300株产ESBLs菌株进行SHV型基因检测,对其院内流行情况进行调查.     

ret基因真核表达载体的构建及其瞬时表达

目的:构建ret基因真核表达载体pcDNA3.0-RET,为制作转基因动物提供实验基础.方法:利用HandⅢ及NotⅠ限制性核酸内切酶,消化pSK-RET及pcDNA3.0空质粒,获得目的基因及相应载体;通过T4连接酶重组DNA;通过氨苄青霉素(Amp)抗性、酶切鉴定及DNA序列分析,确定阳性克隆.通过脂质体包裹转染NIH3T3细胞,采用Western blot方法检测载体的瞬时表达状况.结果:Amp抗性筛选阳性;酶切片段电泳分析在5 400 bp及3 300 bp处有明显条带;DNA序列分析提示重组基因与实际序列一致;Western blot结果显示175 000处有明显条带.结论:ret基因真核表达载体pcDNA3.0-RET构建成功,并可瞬时表达.     

系统性红斑狼疮患者骨钙素、肿瘤坏死因子和白介素8水平变化及与免疫功能的关系

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者治疗前后的骨钙素(BGP)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素8(IL-8)的水平变化及与其免疫功能的关系。方法:采用放免法及酶免法检测了45例SLE患者治疗前后血清BGP、TNF-α及IL-8含量,采用速率散射比浊法测定免疫球蛋白,并与30例正常体检者进行对照。结果:45例SLE患者(SLE组)BGP水平明显低于正常对照组,而TNF-α及IL-8水平明显高于正常对照组(P<0.01),而补体C3水平低下。结论:SLE患者经激素治疗后有骨丢失现象,TNF-α、IL-8及补体C3参与SLE疾病过程,与炎症及疾病活动性相关。     

人胚胎脊髓神经干细胞生长及分化过程中BDNF的作用研究

目的研究脑源性神经营养因子对人胚胎脊髓神经干细胞生长和分化的影响。方法孕20周水囊引产胎儿标本经家属同意捐赠,分离培养脊髓神经干细胞,分为正常对照组、BDNF蛋白组、BDNF抗体封闭组,计数神经球数目并以MTT法检测细胞活力,免疫组织化学检测NeuN和GFAP的表达情况并进行计数。结果与对照组相比,BDNF蛋白组神经球数目或MTT值均无明显变化,BDNF抗体封闭组的神经球数目和MTT值有明显减少(P<0.05);BDNF蛋白组NeuN阳性细胞数明显多于对照组(P<0.05),GFAP阳性细胞数与对照组相比有明显减少(P<0.05),BDNF抗体封闭组NeuN或GFAP阳性细胞数均少于对照组(P<0.05)。结论外源性BDNF可促进人胚胎脊髓神经干细胞向神经元样细胞分化;内源性BDNF在人胚胎脊髓神经干细胞的增殖分化过程中发挥重要作用。     

药学专业药理学实验教学改革的思考

药理学实验教学在药学专业整个教学过程中占有主导地位,因此药学实验教学的改革推动药学专业教学的不断向前发展,使其得到不断完善。针对药理学的学科特点,在教学过程中,通过改变实验教学方法、实验教学考核方式、增强师资队伍建设等方面进行药理学实验教学改革,将理论与实践有效地统一起来,提高学生对药理学实验的兴趣,以期培养学生主动分析解决问题的能力及勇于自主创新性的精神,这也是新时代下对培养创新、实用型人才的要求。药学实验教学的实践性很强,改革教学本身是个漫长的探索过程,希望本文一些阐述能起推进作用,也希望大家一起为之努力。     

Pax3与神经管畸形发育的研究进展

Pax3是一种重要的转录调控因子,与神经系统发育密切相关。在神经管发育中,Pax3参与脊髓背腹侧模式的形成,通过影响神经管背侧神经元的分化及细胞的凋亡,可影响神经管的闭合。在神经嵴发育中,Pax3是神经嵴细胞迁移及向各类细胞分化的重要调控因子,其表达过高或过低都可导致相关疾病的发生。神经管和神经嵴的发育障碍都可导致神经管畸形的发生。     

住院精神病患者并发躯体疾病的临床特点分析

目的:分析住院精神病患者并发躯体疾病的危险因素。方法:住院治疗的精神疾病并发躯体疾病患者846例纳入研究。统计患者并发躯体疾病的类型,分析年龄、性别、病程、学历、住院时间对并发躯体疾病的影响。结果:住院精神病患者合并的躯体疾病以高血压、脑血管病、高脂血症、糖尿病的发生率较高。住院精神病并发躯体疾病与患者的年龄、病程和住院时间有关,其中40～60岁、病程10年、住院时间11月的住院精神病并发躯体疾病患者人数较高(P0.05)。年龄、病程和住院时间是影响住院精神病并发躯体疾病的独立危险因素(P0.05)。结论:住院精神分裂症患者发生躯体疾病的概率较高,年龄、病程和住院时间是住院精神病患者并发躯体疾病的主要危险因素。     

支链氨基酸转氨酶1基因沉默对缺血脑损伤大鼠的保护作用

目的:探讨支链氨基酸转氨酶1(BCAT1)基因沉默对大鼠缺血性脑损伤的保护作用。方法:选取40只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、MCAO模型组(MCAO)、MCAO+空白质粒脑室注射组(NC-shRNA)、MCAO+BCAT1干扰质粒脑室注射组(BCAT1-shRNA),利用大脑中动脉栓塞法(MCAO)制备脑缺血模型,通过神经功能缺损评分判断大鼠神经功能损伤情况;real time RT-PCR检测大鼠脑缺血部位BCAT1 mRNA的表达水平;利用商品化试剂盒测定缺血脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;TUNEL染色检测缺血脑组织细胞凋亡情况。结果:MCAO组大鼠神经功能缺损评分升高(P<0.05),BCAT1 mRNA表达水平升高(P<0.05),脑组织梗死灶增大,SOD活性降低(P<0.05),MDA水平升高(P<0.05),TUNEL染色阳性细胞数量增多(P<0.05)。而BCAT1基因沉默可降低缺血性脑损伤后大鼠神经功能缺损评分(P<0.05),降低BCAT1 mRNA表达水平(P<0.05),缩小...