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31.
利用目标基因测序技术发现马方综合征FBN1新突变 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立目标基因捕获结合第二代测序技术,对马方综合征(Marfan syndrome,MFS)患者的原纤维蛋白-1(fibrillin-1,FBN1)基因进行突变筛查,探讨MFS与FBN1基因突变的关系。方法:提取5例MFS患者外周血全基因组DNA,利用GenCap目标基因捕获技术(北京迈基诺公司),设计FBN1的65个外显子区域特异性捕获探针,与基因组DNA文库进行杂交,将目标基因组区域的DNA片段进行富集后,再利用illumina hiseq2000第二代测序仪进行测序,通过数据分析,确定突变位点,用Sanger测序法对突变位点进行验证。结果:设计合成的目标基因特异性捕获探针可有效地捕捉并富集基因组DNA的目标靶片段。5例患者目标区域平均测序深度为173.85~280.73,97.10%~98.00%目标区域4×覆盖度。经过数据分析及Sanger测序验证,发现1个新的无义突变c.5968 CT(p.Gln1990X)。结论:本研究所建立的GenCap目标基因捕获技术结合illumina hiseq2000第二代测序技术成功的发现了FBN1的新突变。该方法快速而有效,可以使我们对MFS分子病因学有更好的认识。 相似文献
32.
目的 探索家猪离体胃模型在对国际学员进行内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)培训中的应用价值。方法 对15名国际学员进行为期20 d的ESD培训,第一阶段为理论知识学习,完成消化内镜基础及动物模拟培训调查问卷。第二阶段将其随机分为离体动物模型组(A组,8人)和临床观察学习组(B组,7人)。A组在临床观察学习期间,同时按照规范操作步骤进行离体动物模型培训课程。培训结束时考核两组学员ESD操作情况,并再次完成问卷。应用SPSS 20.0进行t检验和卡方检验。结果 A组与B组ESD总操作时间差异有统计学意义(P<0.05),注射时间、标记时间差异没有统计学意义(P>0.05),切开时间及黏膜剥离时间差异有统计学意义。A 组与B组的ESD操作速度差异无统计学意义。两组切除标本大小差异无统计学意义。两组均有1例为分块切除病灶,其余为整块切除。在操作过程中各发生1例穿孔。同时,对比离体动物模型组学员培训前后操作情况,发现培训后ESD总操作时间、切开时间明显提高。结论 以理论知识为基础结合家猪离体胃动物模型培训的内镜培训具有较高的教学参考价值,能够使各国学员熟悉并初步掌握ESD的基础理论知识及操作方法,帮助各国学员日后在临床开展ESD操作。 相似文献
33.
目的 探讨敲低信号转导及转录活化因子3(STAT3)表达对人胶质瘤细胞系U251细胞功能的影响及相关作用机制. 方法 脂质体介导STAT3反义寡聚核苷酸转染人胶质瘤细胞系U251细胞,同时设无义序列组和空白对照组,48 h后MTT检测STAT3反义核苷酸对U251细胞增殖的影响,流式细胞仪检测各组细胞周期、细胞凋亡的变化,Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力,Western blotting检测STAT3和磷酸化STAT3(pSTAT3)蛋白、尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的表达水平. 结果 与空白对照组、无义序列组比较,STAT3反义核苷酸组细胞的相对存活率降低,G1/G0期细胞比例、细胞凋亡增加,Transwell实验显示滤膜细胞数明显减少,STAT3、pSTAT3、uPAR和Bcl-2蛋白的表达降低、Bax蛋白表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 反义STAT3可能通过调节相关基因表达抑制U251细胞侵袭能力并诱导其调亡,STAT3可作为胶质瘤基因治疗的有效靶点. 相似文献
35.
目的探讨冠心病患者室内传导阻滞的非缺血性致病因素。方法选择经冠状动脉造影证实的冠心病合并室内传导阻滞患者45例。行心电图及生化检查,用放射免疫法测定血浆内皮素(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)、人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)、白细胞介素-6(IL-6)等。进行单因素及多因素分析。结果单因素分析显示,各组生化指标、细胞因子、炎症指标比较差异均无统计学意义。以室内传导阻滞为因变量,以细胞因子、炎症因子、血电解质、血脂、血糖、血压作为自变量进行多因素Logistic回归分析,发现ET-1、血糖与室内传导阻滞成正相关(P〈0.05),CGRP与室内传导阻滞成负相关(P〈0.05)。结论血浆ET-1、血糖水平升高可促使冠心病患者发生室内传导阻滞,CGRP可能改善室内传导。 相似文献
36.
新世纪康复医学的发展方向与模式初探 总被引:8,自引:0,他引:8
郭俊 《中国康复医学杂志》2002,17(3):179-180
康复医学在我国发展近 2 0年来 ,已被我国政府视为融预防、医疗、保健于一体的、值得支持的学科。我们所认识的康复医学已不再只满足于生存者的功能恢复 ,而是要求更高的生活质量、健康的社会行为。本文拟探索康复医学 2 1世纪的发展方向与模式。1 康复医学在新世纪面临的挑战1.1 康复医学的发展现况康复医学是一门研究功能障碍转化规律的应用性极强的新兴学科 ,从发展伊始 ,其主导思想即与病残所致功能障碍的医疗密切相关 ,自 2 0世纪 80年代初发展迄今已有长足的进展。这些进展不仅充实了其基础科学的内容 ,而且渗透到与之相关的学科 ,… 相似文献
37.
38.
目的:观察馆陶黑小麦对2型糖尿病(T2DM)患者β-细胞功能和胰岛素抵抗的影响。方法60例患者随机分为馆陶黑小麦组、普通黑小麦组,对比β-细胞功能(HOMA-β)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的变化。结果馆陶黑小麦组的HOMA-β平均数治疗后48.69, HOMA-IR平均数治疗后为2.84;普通黑小麦组HOMA-β平均数治疗后41.08, HOMA-IR平均数治疗后为3.18,两组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论选馆陶黑小麦为主食可改善T2DM患者β细胞功能和胰岛素抵抗。 相似文献
39.
目的降低护理人员执行中心静脉导管(CVC)维护步骤的不正确率,为规范CVC维护步骤提供有效的管理方法。方法成立品管圈活动小组,按照品管圈活动的10个步骤进行各项活动,设计CVC维护步骤核查表,对CVC维护步骤不正确的问题进行解析,制定并落实3项改善措施。结果护理人员执行CVC维护步骤的不正确率由33%降低到4%,规范了CVC维护流程。结论品管圈活动在降低护理人员执行CVC维护步骤的不正确率中效果显著,知识更新培训、优化维护流程是规范CVC维护步骤管理的有效方法。 相似文献
40.
目的 研究白芷颗粒对早期糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的保护作用。方法 采用ip链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)法制备糖尿病模型,设置对照组、模型组、白芷(1.25 g/kg)组及羟苯磺酸钙(135 mg/kg)组。连续给药12周后采用苏木素-伊红(HE)和高碘酸-席夫(PAS)染色观察大鼠视网膜病理学改变;采用TUNEL染色法检测视网膜细胞凋亡情况;采用Western blotting检测视网膜组织紧密连接蛋白及磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)通路相关蛋白表达。人视网膜上皮细胞(adult retinal pigment epithelial cell line-19,ARPE-19)分为对照组、高渗组、高糖组、白芷(150 μg/mL)组和羟苯磺酸钙(20 μmol/L)组,对照组在含5.5 mmol/L葡萄糖的培养基中培养;高渗组在含5.5 mmol/L葡萄糖和25 mmol/L甘露醇的培养基中培养;高糖组和各给药组在含30 mmol/L葡萄糖的培养基中培养,并给予相应药物。采用TUNEL染色、免疫荧光、Western blotting法观察细胞凋亡、紧密连接蛋白及PI3K/Akt通路相关蛋白表达。使用PI3K抑制剂LY294002后,观察其下游凋亡相关蛋白的变化。结果 HE染色结果显示,模型组大鼠视网膜组织排列紊乱,视网膜变薄,白芷干预后较模型组有所缓解。TUNEL染色显示视网膜组织中细胞凋亡率增加。Western blotting结果显示,与模型组比较,白芷组咬合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白1(Zonula occluden-1,ZO-1)、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)/ B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved cystein-asparate protease-3,cleaved Caspase-3)蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。体外实验结果显示,白芷干预后细胞凋亡率降低(P<0.05),Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Occludin、ZO-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05);免疫荧光结果显示白芷干预后Occludin、ZO-1表达升高;此外,白芷能够促进高糖环境下PI3K/Akt的磷酸化,在使用PI3K抑制剂干预后抑制了Akt的磷酸化,Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论 白芷颗粒能够通过抑制细胞凋亡保护血-视网膜屏障损伤,从而延缓早期DR的发展,其作用机制可能与调节PI3K/Akt信号通路有关。 相似文献