HIF-1α与CDX2在结直肠腺癌组织中的表达及意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与基因系尾型同源盒基因2(CDX2)蛋白在结直肠腺癌组织中的表达及其与结直肠癌发生、发展的关系,并且研究HIF-1α与CDX2表达之间的相关性.方法 收集62例结直肠腺癌及20例正常结直肠组织标本,采用免疫组化SABC法检测标本中HIF-1α、CDX2蛋白的表达,并采用Spearman等级相关分析分析HIF-1α与CDX2表达之间的相关性.结果 在20例正常结直肠黏膜组织中HIF-1α及CDX2蛋白表达阳性率分别为5.0%(1/20)及95.0%(19/20),在62例结直肠腺癌组织中HIF-1α及CDX2蛋白表达阳性率分别为62.9%(39/62)及69.4%(43/62),不同组织中蛋白表达的差异均有统计学意义(P<0.05).结直肠腺癌中,HIF-1α、CDX2蛋白的表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移及Dukes分期有关(P<0.05);Spearman等级相关分析表明,HIF-1α与CDX2的表达呈负相关(r=-0.293 2,P<0.05).结论 HIF-1α表达上调、CDX2表达下调可能与结直肠腺癌的发生有关,且这两者间呈负相关.HIF-1α可能参与调控CDX2的表达,进而加速了结直肠癌的恶性进展.     

Pleiotrophin的表达及其在血清水平与结肠癌的关系

目的：探讨pleiotrophin（PTN）的表达及其血清水平与结肠癌的关系。 方法：应用real time-PCR、Western blot方法检测46例结直肠癌组织及其对应癌旁组织中PTN mRNA及蛋白表达水平;ELISA方法检测76例结直肠癌患者和58例健康体检者血液样本中的PTN表达水平。 结果：PTN mRNA在结直肠癌组织中表达量以及PTN蛋白的阳性表达率均明显高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义（均P<0.05）;无论是PTN mRNA表达水平还是蛋白阳性率均与患者年龄、肿瘤组织类型无关（均P>0.05）,而与肿瘤的分化程度呈负向关系、与TNM分期呈正向关系（均P<0.05）。结直肠癌患者血清PTN水平明显高于正常人群（P<0.05）。 结论：PTN在结直肠癌组织中表达增高;血清PTN水平检测可作为诊断结直肠癌参考指标之一。

     

基于失巢凋亡基因构建直肠癌预后预测模型

目的 分析失巢凋亡相关基因对直肠癌患者预后的影响。方法 从TCGA数据库获得直肠癌患者的基因表达数据,通过最小绝对收缩和选择算法（least absolute shrinkage and selection operator, LASSO）构建直肠癌-失巢凋亡基因预后预测模型。使用Kaplan-Meier生存曲线,受试者工作特征（receiver operating characteristic, ROC）曲线,单因素和多因素分析等方法对预后预测模型进行评估。通过蛋白相互作用网络筛选与预后模型相关的基因,并进行富集分析。结果 6个失巢凋亡基因：酪蛋白激酶2 Alpha 1 (casein kinase 2-α1, CSNK2A1)、抑制素Bβ亚基（inhibin subunit beta B, INHBB）、p21活化激酶1(p21-activated kinase 1, PAK1)、CD63分子（CD63 molecule,CD63）、细胞间黏附分子β-1(catenin beta-1, CTNNB1)、促凝集素蛋白（clusterin, CLU）被确定为直肠癌预后相关基因。生存分析...     

Ⅱ-Ⅲ期结肠癌根治术后复发危险因素分析及其列线图预测模型的应用价值

目的探讨Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发危险因素及其列线图预测模型的应用价值。方法采用回顾性病例对照研究方法。收集2013年1月至2016年6月西安交通大学第一附属医院收治的228例行根治性切除术治疗Ⅱ~Ⅲ期结肠癌病人的临床病理资料;男118例,女110例;中位年龄为62岁,年龄范围为25~87岁。所有病人行开腹或腹腔镜辅助结肠癌根治性切除术。观察指标:(1)术后复发情况。(2)影响Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发的危险因素分析。(3)Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发列线图预测模型的构建及评价。采用门诊或电话方式进行随访,了解病人术后3年复发情况。随访时间截至2019年6月。偏态分布的计量资料以M(范围)表示。计数资料以绝对数表示,组间比较采用Pearsonχ2检验或Fisher确切概率法。多因素分析采用Logistic逐步回归分析。将独立危险因素引入R 3.6.1软件,构建列线图预测模型。绘制受试者工作特征曲线(ROC),以曲线下面积(AUC)评价列线图预测模型的区分度。使用R软件绘制校准度曲线图评价列线图预测模型的一致性。结果(1)术后复发情况:228例病人中,53例术后复发,其中局部复发19例,远处转移34例。34例远处转移病人中,肝转移14例、肺转移7例、脑转移4例、多发转移及其他部位单发转移9例。53例病人术后复发时间为12个月(6~19个月)。(2)影响Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发的危险因素分析:单因素分析结果为肠梗阻、术前癌胚抗原(CEA)、腹腔积液、血管侵犯是影响Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发的相关因素(χ²=4.463、13.622、10.914、5.911,P<0.05)。病理学N分期是影响Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发的相关因素(P<0.05)。多因素分析结果显示:术前CEA>5μg/L、腹腔积液、血管侵犯、病理学N分期为N1期或N2期是影响Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发的独立危险因素(优势比=3.129,3.071,7.634,3.439,15.467,95%可信区间为1.328~7.373,1.047~9.007,1.103~52.824,1.422~8.319,3.498~68.397,P<0.05)。(3)Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发列线图预测模型的构建及评价:根据多因素分析结果,将术前CEA、腹腔积液、血管侵犯及病理学N分期引入R 3.6.1软件,构建Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发的列线图预测模型。术前CEA>5μg/L的列线图评分为41.7分,腹腔积液为41.0分,血管侵犯为74.2分,病理学N分期N1期为45.1分、N2期为100.0分,各项危险因素不同取值得分总和对应术后复发概率。绘制ROC评价列线图预测Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发的能力,其AUC为0.805(95%可信区间为0.737~0.873,P<0.05)。校准曲线图显示Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后列线图模型预测复发概率与实际复发概率具有较好一致性。结论术前CEA>5μg/L、腹腔积液、血管侵犯、病理学N分期为N1或N2期是Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发的独立危险因素;以此构建列线图预测模型有助于预测Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发风险。     

胆囊癌诊治中的困惑与思考

正胆囊癌是胆道恶性肿瘤中最多见的一种类型,占胆道肿瘤的2/3左右,约占胆道手术的1.53%。早在1777年,奥地利医师Stoll就报道了第一例胆囊癌。两个世纪后的今天,虽然胆囊癌发病率有逐渐增高的趋势,但国内外资料表明胆囊癌的诊治仍未取得突破性进展,疗效不尽人意。自2001年至今,笔者所在课题组先后进行了三次病例的回顾分析,旨在反映我国胆囊癌的诊治状况,以期科学地制订诊治方案,改善预后。2001年回顾性分析了我院44年来收     

脾脏肿瘤的诊断和治疗（附22例报告）

目的：总结脾脏肿瘤的诊断治疗经验。方法：回顾性分析1997～2005年本院收集的22例脾脏肿瘤临床病例资料。结果．22例中良性肿瘤8例，恶性肿瘤14例，其中15例行手术切除，无手术死亡。良性肿瘤预后良好，恶性肿瘤预后较差。结论：良、恶性脾脏肿瘤鉴别可根据CT、血管造影、病理活检。根治手术和综合治疗是改善脾脏恶性肿瘤预后的重要措施。     

过表达CDX2抑制裸鼠结肠癌移植瘤的生长

目的:探讨过表达CDX2对结肠癌LoVo细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,为结肠癌生物治疗提供实验依据。方法:脂质体法介导pEGFP-C1-CDX2真核表达载体转染入结肠癌LoVo细胞,G418筛选出稳定表达CDX2的LoVo细胞(LoVo-CDX2细胞);接种LoVo-CDX2细胞制备裸鼠皮下移植瘤模型,观察CDX2过表达对LoVo细胞移植瘤生长的影响。结果:West-ern blotting结果显示,转染pEGFP-C1-CDX2组LoVo细胞中CDX2蛋白表达量高于pEGFP-C1组及未转染组。LoVo-CDX2、LoVo-C1和LoVo细胞接种裸鼠的第20天,LoVo-CDX2组移植瘤质量较LoVo组和LoVo-C1组移植瘤质量显著减轻[(0.62±0.22)vs(2.10±0.78)、(2.56±0.76)g,分别P<0.05和P<0.01〗。结论:CDX2过表达可以抑制结肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤的生长。     

人神经菌毛素-1基因shRNA慢病毒载体的构建

目的:构建并鉴定靶向人神经菌毛素-1(NRP-1)基因的小发卡RNA的慢病毒载体.方法:针对NRP-1mRNA设计了4条shRNA,并构建pGCSIL-RFP-shNRP1慢病毒质粒,PCR扩增阳性克隆并测序鉴定.用pGCSIL-RFP-shNRP1、pHelper1.0和pHelper2.0质粒共转染293T细胞包装产生慢病毒,测定病毒滴度.将慢病毒干扰RNA及含有NRP-1过表达载体共转染293T细胞,Western blot法检测Flag表达,观察NRP-1蛋白相对表达抑制效果.结果:PCR和测序结果与设计的干扰序列一致,病毒滴度达1×109 Tu/mL.转染细胞中NRP-1蛋白相对表达显著降低.结论:成功构建了高效率的人NRP-1基因shRNA慢病毒载体.     

缺氧下调结肠癌细胞株CDX2表达的研究

目的探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和基因系尾型同源盒基因2(CDX2)在人结肠癌细胞株SW480和LS174T不同缺氧时间的表达及其可能的作用机制。方法(1)MTT方法检测在不同CoCl2浓度(100,150,200μmol/L)下和不同时点(24,36,48 h)时对SW480和LS174T细胞活力以及增殖的影响,筛选适宜的CoCl2作用浓度。(2)在细胞化学缺氧培养相应时段,采用半定量RT-PCR技术检测HIF-1α,Snail和CDX2的mRNA的表达变化;同时采用Western blotting技术检测CDX2的蛋白表达。结果结肠癌细胞株在不同浓度CoCl2环境下随缺氧时间的延长,细胞活力明显受到抑制。在低浓度CoCl2(100μmol/L)干预下,随着缺氧时间的延长,HIF-1α和Snail mRNA表达逐渐上升,缺氧24 h时达到高峰,CDX2 mRNA及蛋白表达水平逐渐下降。结论缺氧诱导HIF-1α过表达可通过下调CDX2而加速结直肠癌的进展。     

胃肠道病变磁体预标记辅助腹腔镜定位术初探

目的 评估胃肠道病变磁体预标记辅助腹腔镜定位术的可行性及安全性。方法 2019年4月-6月,拟行腹腔镜根治术的胃、结直肠肿瘤住院患者8例,在行腹腔镜切除术前接受了内镜下磁体预标记。术中通过腹腔镜孔道送入另一枚磁体,在磁体相互吸引力导引下,快速与病变附近预标记的磁体隔胃肠道壁而吸引在一起,实现病变定位。采用回顾性分析方法,对8例患者术前标记及手术情况进行分析和总结。结果 8例患者全部术前内镜下成功标记病灶, 并实现了术中快速准确定位。内镜下标记平均用时为5.75±2.45min,术中定位平均用时1.94±0.56min。所有患者均完成腹腔镜肿瘤切除术,定位准确,结直肠肿瘤病灶平均近端和远端切除边缘分别为105和74mm,无不良并发症发生。结论 胃肠道病变磁体预标记辅助腹腔镜定位术简便、安全、准确;同时不增加额外诊治设备、无需消化内镜术中配合操作,大大减少院内感染风险。