影响小鼠混合淋巴细胞反应的实验条件分析

混合淋巴细胞反应(MLR)可定量反映个体间组织相容性抗原遗传型的差异程度,亦可检测淋巴细胞的反应能力。目前已被广泛用于组织配型,免疫耐受和免疫活性细胞及其亚群之间的相互关系等方面的研究。由于小鼠的遗传型可经基因重组的方式加以改造,培育出具有一定遗传型的近交系小鼠,因而小鼠MLR常用为研究移植免疫的一种实验方法。MLR的测定通常以氚标记的胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入量作为指标。     

脊柱手术后脑脊液漏的护理

脑脊液漏是脊柱手术后并不常见的并发症,文献报道[1],脊柱手术后脑脊液漏的发生率约为2.31%～9.37%,我院自1998-01～2002-06共施行脊柱手术587例,手术后并发脑脊液漏7例,发生率为1.19%.由于及早发现并采取积极的治疗护理措施,无1例引起脑脊髓膜炎.护理体会如下.     

小鼠乳腺癌模型中趋化因子表达谱的检测及其意义

[目的]研究小鼠乳腺癌模型中趋化因子的表达情况，并探讨其在乳腺癌发生发展中的意义。[方法]用BALB／c鼠源性乳腺癌细胞系4T1细胞对BALB／c小鼠荷瘤，建立小鼠乳腺癌动物模型；选择11种与肿瘤发生发展相关的趋化因子，利用RT-PCR方法检测肿瘤组织中这些趋化因子的表达谱，同时分析乳腺癌早、晚期趋化因子的转录水平。[结果]与正常组织相比，乳腺癌肿瘤组织表达较高水平的CXCL16、LARC和MCP-1；肿瘤晚期较早期表达更高水平的MDC和MCP-1（P〈0．05）。[结论]趋化因子的差异性表达可能与肿瘤的发生发展密切相关。     

带血管蒂皮瓣移位术后观察护理

我科自 2 0 0 1 - 0 3～ 2 0 0 2 - 0 7施行带蒂皮瓣移位修复小腿及足部创伤 31例 ,术后血管危象及时观察处理 ,移位皮瓣全部成活 ,修复肢体得以保留并恢复功能。现就术后皮瓣的观察护理体会如下。1　临床资料本组男 2 3例 ,女 8例 ,年龄 9～ 58岁 ,皮肤缺损面积最小 5cm× 1 0 cm,最大 1 0 cm× 1 6 cm。修复小腿 1 6例 ,踝、足跟部 1 5例。移位皮瓣种类 ,足背皮瓣 1 0例 ,小腿内侧皮瓣 1 3例 ,腓肠肌内侧皮瓣 6例 ,股前外侧皮瓣 2例。所有皮瓣术后均用抗凝药物。2　术后护理2 .1　病室要求　室内保持清洁、安静 ,空气新鲜 ,室温 2 8～30℃…     

透析膜和内毒素对尿毒症患者单个核细胞白细胞介素-1β产生的影响

目的：研究不同透析膜和内毒素对尿毒症患者外周血单个核细胞白细胞介素１β（ＩＬ１β）基因表达和蛋白质合成的影响。方法：细胞和不同透析膜孵育后采用原位杂交检测ｍＲＮＡ水平,单个核细胞培养后酶联免疫吸附试验法测定细胞总蛋白质水平。结果：不同透析膜孵育后的单个核细胞在未用内毒素刺激情况下ＩＬ１βｍＲＮＡ水平有显著差别,但蛋白质合成量无差异,其中正常人仅有极微量ＩＬ１β合成;内毒素刺激下的单个核细胞ＩＬ１β合成量明显高于未刺激组,且铜仿膜孵育后的细胞明显高于聚砜膜和对照组。结论：正常人单个核细胞ＩＬ１β合成需双信号诱导,在尿毒症患者中内毒素和透析膜对单个核细胞ＩＬ１合成有协同作用。     

米索前列醇对择期剖宫产出血量的影响

1999年 1～ 10月我们对临床无宫缩的择期剖宫产孕妇 30例 ,于术前 1ｈ内舌下含服米索前列醇 (米索 ) 5 0 μｇ,观察其术中 ,术后出血量 ,并与同期随机选择的未用米索的孕妇进行对比。1　对象与方法1 1　观察对象　研究组 :有剖宫产指征而无宫缩产妇 30例。对照组 :同期随机抽样术前未用米索的无宫缩剖宫术孕妇 30例 ,两组一般资料具有可比性。1 2　方法1 2 1　用药方法　研究组剖宫产术前0 5～ 1ｈ舌下含服米索 5 0 μｇ,术中胎儿娩出后子宫肌注射催产素 10Ｕ ,对照组仅胎儿娩出后子宫肌注催产素 10Ｕ。两组胎盘均待自然剥离后娩出。1 2 …     

透析膜和内毒素对外周血单个核细胞细胞因子产生的影响

目的　研究不同透析膜和内毒素对正常人和尿毒症患者外周血单个核细胞 (PBMC)肿瘤坏死因子 α(TNF α)及其可溶性受体p5 5 (TNFsRp5 5 )产生的影响。 方法　与不同透析膜或内毒素孵育后的PBMC培养后采用酶联免疫吸附法测定细胞总TNF α和TNFsRp5 5水平。 结果　在未用内毒素时 ,铜仿膜、聚砜膜孵育组和对照组PBMCTNF α和TNFsRp5 5生成量无显著差异 ;内毒素刺激后的PBMCTNF α和TNFsRp5 5产生量显著高于相应的未用内毒素刺激组 ,而铜仿膜刺激组又明显高于聚砜膜和对照组 ;尿毒症患者PBMC受内毒素刺激后TNF α和TNFsRp5 5升高幅度明显小于正常人 ;PBMCTNF α与TNFsRp5 5产生量呈正相关。 结论　内毒素和透析膜对尿素症患者PBMCTNF α及TNFsRp5 5合成具有协同作用 ;尿毒症患者PBMC存在着对内毒素刺激反应低下 ;TNFsRp5 5可能是炎症反应的标记物而不是调节剂。     

基于基因免疫的抗HBV M蛋白单克隆抗体的制

目的 以基因免疫制备抗乙型肝炎病毒M蛋白的单克隆抗体。方法 构建表达M蛋白的重组质粒pcDNA3-PreS2／S，免疫雌性BALB／c小鼠，以杂交瘤技术制备单克隆抗体。结果 目的基因片段PreS2／S(875bp)正确插入质粒pcDNA3，重组质粒转染细胞上清、基因注射肌肉、脾脏局部均可检测到M蛋白表达。免疫小鼠后以杂交瘤技术获得了一株分泌抗HBVM蛋白的杂交瘤细胞株2D3。结论 证实了基因免疫可用于制备抗乙型肝炎病毒M蛋白单克隆抗体。     

一株抗双链DNA单克隆抗体的制备及其特性研究

制备抗双链DNA(dsDNA)单克隆抗体并对其生物学特性进行初步研究。以活化淋巴细胞的DNA为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体;用体内诱生法制备腹水,以间接酶链反应吸附试验(ELISA)法分析抗体的亚类、特异性和亲和力;用免疫荧光法检测抗体的荧光核型;用考马斯亮蓝法检测注入杂交瘤细胞的小鼠的尿蛋白含量。结果显示,成功获得了1株持续稳定分泌抗dsDNA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为6C2;该细胞株所分泌的抗体亚类为小鼠IgG2a,能特异性结合dsDNA,亲和力常数为2.67×10~8mol/L,免疫荧光核型为均质型;将6C2细胞注入正常BALB/c小鼠腹腔后,小鼠的尿蛋白含量较对照组明显增高。结果表明,抗dsDNA单克隆抗体6C2是致病性抗体,对于进一步研究抗dsDNA抗体的致病机制具有重要的价值。     

COX-2反义寡核苷酸抑制宫颈癌Hela细胞的研究

目的：通过研究环氧合酶-2（COX-2）反义寡核苷酸（AS-ODNs）对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制及对其抑制原理进行分析,探讨COX-2 AS-ODNs对宫颈癌的治疗意义.方法：Hela细胞分6组培养：对照组（A）、正义寡核苷酸（SODNS）组（B）、脂质体组（C）及反义寡核苷酸组 （D）设3个亚组.MTT实验检测细胞的增殖情况;在转染后48 h,RT-PCR法检测COX-2 mRNA的表达水平,Western blot检测COX-2蛋白的表达,流式细胞仪测定细胞周期的变化.结果：与其他组比较,AS-ODNs转染的细胞增殖缓慢,且随着AS-ODNs的浓度增加细胞增殖指数有下降的趋势,COX-2 mRNA及蛋白表达明显下调,表达量随AS-ODNs转染浓度的增加而减少,细胞周期S期细胞比例明显减少,G2/M及G0/G1期细胞所占比例增多,P ＜0.05.结论：COX-2反义寡核苷酸对Hela细胞的增殖有抑制作用;其抑制机制可能与抑制COX-2转录与翻译及细胞周期再分布有关.