基于基因免疫制备抗人绒毛膜促性腺激素β亚基单克隆抗体及其特性研究

用真核表达人绒毛膜促性腺激素β亚基((human chorionic gonadotrophinβ,hCGβ)的重组质TR421-hCGβ免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,ELISA法筛选阳性细胞株,经过多次的克隆化培养,最终获得10株持续、稳定分泌抗hCGβ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。随机抽取6H1杂交瘤细胞进行抗体的制备、纯化及免疫学特性的分析。间接ELISA法证明6H1单抗属于IgG2a亚类。Western blot证明6H1单克隆抗体可以特异性结合hCGβ,间接免疫荧光和流式细胞仪等结果表明,6H1单克隆抗体能够不同程度的结合不同来源的肿瘤细胞膜上表达的hCGβ分子,为进一步研究其生物学功能奠定了物质基础。     

未成熟树突状细胞诱导建立异基因嵌合体及延长移植物存活的可能机制

目的：研究应用供体来源的未成熟树突状细胞(inDCs)注射受体小鼠后，诱导形成异基因嵌合体及延长移植物存活的机制。方法：(1)应用供体(C57BL／6)来源的骨髓细胞，在体外培养出imDCs，灭活后体内输注或体外直接刺激受体小鼠(Balb/C)的脾细胞，观察脾细胞对供体细胞的应答反应；(2)取已建立异基因嵌合体并有效延长移植物存活的受体小鼠的脾细胞，观察其对供体细胞刺激的应答反应；(3)通过半定量RT—PCR检测不同免疫状态下Th1／Th2型细胞因子的表达情况。结果：应用imDCs体外预刺激脾细胞或体内注射imDCs受鼠的脾细胞，均呈现对供鼠脾细胞刺激的特异性低应答，这种低应答主要出现在受鼠脾细胞在供鼠脾细胞刺激后的72小时内；建立异基因嵌合体并延长移植物存活的受鼠对来自供鼠脾细胞的刺激也表现为低应答，而对于无关第三者脾细胞的刺激仍保持较高水平，二者比较，统计学处理有显著性差异(P＜0．05)；在诱导形成异基因嵌合体及延长移植物存活的过程中，一定程度上显示出Th1／Th2模式的偏移。结论：应用供体来源的imDCs注射给受体，诱导形成异基因嵌合体和延长移植物存活的机制可能与imDCs诱导受体T细胞无能有关，而且此过程中在一定程度上表现为Th1向Th2方向的免疫偏移。     

B7反义肽抑制同种异基因移植排斥反应的研究

目的 :探讨B7反义肽竞争抑制CD2 8 B7共刺激通路、抑制移植排斥反应的作用 ,为该反义肽在器官移植方面的应用提供实验依据。方法 :固相合成法合成含有MYPPPYmotif的B7反义肽N’ EFMYPPPYLD C’ ,纯度 95 % ,分子量 (MW)为12 71 6 ;用灭活的C5 7(H 2 d)脾细胞和体外培养新生C5 7心肌细胞作为刺激细胞 ,以适当浓度的B7反义肽处理刺激细胞后 ,再与BALB C(H 2 d)脾细胞作为应答细胞进行混合培养 ,观察此反义肽在体外抑制淋巴细胞增殖的效果 ;用此反义肽预封闭新生C5 7小鼠心肌后 ,移植到BALB C小鼠耳后 ,观察此反义肽在体内抑制移植排斥反应、延长心肌移植存活的情况。结果 :B7反义肽能抑制前述两种淋巴细胞增殖反应 ,抑制率分别为 38 4 %和 36 6 % ;并呈现出明显的剂量依赖关系 ,此反义肽预处理过的新生C5 7小鼠心肌 ,移植到BALB C小鼠 ,可较对照组平均延长 5 4天 (n =6 ,P <0 0 0 1)。结论 :人工合成的B7反义肽在体外可以通过抑制CD2 8 B7共刺激通路 ,抑制淋巴细胞的增殖 ,并可用于延长心肌移植物存活 ,为进一步研究其在移植免疫方面的应用提供了有益的启示。     

心肌梗死病人的康复指导

急性心肌梗死康复的治疗可分为冠心病病房康复期、普通病房康复期两类。急性心肌梗死各个阶段的康复内容均不相同，不仅包括临床症状的改善。也包括生理功能的恢复、心理状态的健康恢复，回归社会工作能力。     

提高病人满意度的方法与对策

病人满意度不仅是反映医疗质量的重要渠道，是医疗质量考评体系中不可缺少的一个环节，在医疗模式转变的今天，如何提高病人满意度是各个医院发展研究的重要问题。本文从收集患者信息、正确引导病人以及医患和谐沟通三个方面进行分析，为提高病人满意度提出适当的方法与对策。     

透析膜和内毒素对尿毒症患者单个核细胞白细胞介素—1？…

目的：研究不同透析膜和内毒素对尿毒症患者外周血单个核细胞白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）基因表达和蛋白质合成的影响。方法：细胞和不同透析膜孵育后采用原位杂交检测ｍＲＮＡ水平，单个核细胞培养后酶联免疫吸附试验法测定细胞总蛋白质水平。     

不同程度的青年近视患者眼动行为特征分析研究

  目的  检测青年近视患者的眼球运动参数,比较不同程度近视组眼动参数差异,分析眼动参数与眼轴长度、等效球镜度的相关性。  方法  招募91例青年近视患者,基于等效球镜度将研究对象分为轻度、中度和高度近视组。收集研究对象的年龄、性别资料,完成基础临床检查,采用眼动仪检测研究对象的双眼注视、反射性扫视和反向扫视功能。采用单因素方差分析或秩和检验比较3组近视患者的一般资料和眼球运动参数,采用Pearson或Spearman相关性分析注视区95%二维椭圆面积（BCEA）、扫视运动各项参数与眼轴长度、等效球镜度的相关性。  结果  轻度、中度和高度近视组的95%BCEA分别为2.08 （0.54,14.69） deg2、4.99（0.94,49.22） deg2、5.79 （2.18,64.91） deg2。3组研究对象的95%BCEA差异有统计学意义（P=0.029）,轻度近视组的95%BCEA比高度近视组更小（P=0.01）。3组研究对象的各项扫视参数差异无统计学意义（P>0.05）。95%BCEA与眼轴长度呈正相关（r=0.342, P=0.001）;95%BCEA与等效球镜度呈负相关（r=?0.322,P=0.002）;扫视运动各项参数与眼轴长度、等效球镜度均无相关性（P>0.05）。  结论  青年近视患者眼轴越长、近视程度越高,注视稳定性越差。高度近视患者的注视稳定性低于轻度近视患者。不同程度近视患者的扫视运动参数无差异。     

两种不同成分培养基制备CIK细胞的生物学特征

目的:采用细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cell,CIK cell)培养基(含低浓度IL-2、IFN-γ、IL-12和anti-CD3)和NK培养基(含高浓度IL-2和anti-CD3)体外刺激诱导CIK,分析CIK细胞的扩增、表型和细胞因子分泌情况。方法:健康自愿者来源的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),分别加入CIK培养基和NK培养基进行诱导培养,24 h后,换用含IL-2的1%自体血浆培养基继续诱导培养2周。在培养的第6天和第10天检测培养上清中IFN-γ的分泌情况,在培养的第10天以流式细胞术检测两组培养细胞表面CD3、CD4、CD8、CD16、CD56的表达情况。结果:CIK培养基和NK培养基均可使培养细胞在第7天时开始明显扩增,第10天时可扩增至200倍。其中,CIK培养基获得的细胞扩增倍数明显高于NK培养基,其IFN-γ分泌明显高于NK培养基组[(724.7±434.8)vs(108.9±60.6)pg/ml,P<0.01];而以NK培养基培养的细胞,CD3-CD16+CD56+细胞比例高于CIK培养基[(6.27±3.33)%vs(2.88±1.88)%,P<0.05]。结论:不同成分的CIK培养基和NK培养基均可促进CIK细胞的扩增和成熟,但呈现不同的生物学特征。     

红霉素片溶出度测定的考察

《中国药典》1995年版首次收载了红霉素片的溶出度测定方法[1],我们在试验过程中发现其最大吸收峰在482nm波长处。由于该吸收图谱最大吸收峰尖锐,在该处很小的波长变化将造成吸收度较大的变化,影响结果的准确性。1仪器与药品UV－2201紫外分光光度仪（日本岛津）;RC－3B药物溶出仪（天津大学）;标准品：批号：0307－9713（中国药品生物制品检定所）;红霉素片：广东A厂：980603福建B厂：9704145广东C厂：970909。所用试剂均为分析纯。2实验方法与结果2．l按药典红霉素片溶出度测定方法［‘］进行试验,红霉素标准品及供试品吸收光谱…